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文章摘要
重组角质酶的制备及合成乙酸乙酯条件优化
Optimization of Recombinant Cutinase Fermentation Conditions and Its Application in Ethyl Acetate Synthesis
  
DOI:10.3969/j.issn.1673-1689.2018.08.016
中文关键词: 角质酶  毕赤酵母  高密度发酵  酯合成  乙酸乙酯
英文关键词: 
基金项目:
作者单位
郭小杰 食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122
江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡214122 
宿玲恰 食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122
江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡214122 
吴敬 食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122
江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡214122 
陈晟 食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏 无锡 214122
江南大学 工业生物技术教育部重点实验室江苏 无锡214122 
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中文摘要:
      为了实现镰孢菌角质酶的高效表达,对重组菌株P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCuA在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化,获得的最优发酵条件为:诱导温度28 ℃,初始诱导菌浓OD600为100,诱导阶段甲醇体积分数为1%条件下进行诱导产酶。在该条件下发酵138 h时上清酶活可达到最大值419 U/mL,是优化前的2倍。对重组角质酶在有机溶剂中合成乙酸乙酯的酯化条件进行了优化,结果表明,当底物乙酸浓度为 0.1 mol/L,乙醇浓度为0.15 mol/L,温度 50 ℃,在异辛烷中反应16 h,乙酸乙酯可以达到最大转化率 94.12%。
英文摘要:
      In order to achieve efficient production of the cutinase from Sirococcus conigenus,the optimization of fermentation conditions was investigated in P. pastoris KM71 harboring the plasmid pPIC9K-ScCuA. The optimized fermentation conditions were as follows:the inducing temperature is 28 ℃,the induction phase methanol concentration is maintained at 1% When the initial cell concentration OD600 reached 100. Under the optimum condition,the enzyme activity reached 419 U/mL at cultivation of 138 h,was 2 times than before.Different reaction parameters for the synthesis of ethyl acetate by direct esterification in organic solvents are investigated. The highest yield of 94.12% is obtained at 0.1 mol/L acetic acid,0.15 mol/L alcohol using a reaction temperature of 50 ℃ for 16 h incubation time in iso-octane.
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