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文章摘要
通过提高胞内辅酶水平促进L-苯甘氨酸的合成
Improve the Synthesis of L-phenylglycine by Increasing the Intracellular Coenzyme Level
投稿时间:2018-09-02  修订日期:2018-09-17
DOI:
中文关键词: L-苯甘氨酸  全细胞转化  烟酸转磷酸核糖激酶  NAD+合酶  烟酸  胞内辅酶水平
英文关键词: L-phenylglycine  whole cell transformation  nicotinic acid phosphoribosyltransferase  NAD+ synthase  nicotinic acid  intracellular coenzyme level
基金项目:
作者单位E-mail
刘巧利 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室 liuqiaoli221@163.com 
杨套伟 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室  
周俊平 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室  
徐美娟 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室  
张显 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室  
饶志明 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室 raozhm@jiangnan.edu.cn 
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中文摘要:
      NAD(H)是全细胞转化合成L-苯甘氨酸中必需的辅酶,其在胞内的浓度对L-苯甘氨酸的合成至关重要。本研究通过共表达烟酸转磷酸核糖激酶和NAD+合酶的编码基因pncB和nadE,以期提高胞内辅酶水平,从而提高全细胞转化效率。结果表明, pncB和nadE的共表达使胞内NAD(H)含量提高了2.35倍,同时添加20 mg/L的烟酸使胞内NAD+含量进一步提高了2.42倍,最终,全细胞催化活性和转化产量分别提高了94%和36.6%,说明在辅酶依赖型全细胞转化中,胞内辅酶水平的提高可以有效提高转化效率。
英文摘要:
      Coenzyme NAD(H) is necessary for whole cell synthesis of L-phenylglycine, so intracellular NAD(H) level is critical for L-phenylglycine synthesis. In this study, the co-expression of the genes pncB and nadE encoding of nicotinic acid phosphoribosyltransferase and NAD+ synthase separately was conducted to increase intracellular NAD(H) level so as to accelerate the whole-cell transformation. The results showed that the NAD(H) level in whole cell was increased by 2.35-fold when pncB and nadE were co-expressed, and it was further increased by 2.42-fold with the addition of 20 mg/L Snicotinic acid(NA). Significantly, the whole cell catalytic activity and L- phenylglycine yield were increased by 94% and 36.6%, respectively, indicating that the transformation efficiency can be effectively improved by the increase of intracellular coenzyme levels in the coenzyme-dependent whole cell transformation systems.
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