转基因食品检测关键技术研究及应用
自1974 年科恩（Cohen） 揭开转基因技术应用的序幕起，“转基因” 这个词在全球承受了无尽争议。2015 年1 月13 日，欧洲议会全体会议通过一项法令，允许欧盟成员国根据各自情况选择批准、禁止或限制在本国种植转基因作物。面对转基因食品，目前的世界趋势是：对相关食品必须给消费者真实而明确的信息。因此，不论是对转基因食品贴示标签，或是对转基因与非转基因原料的分别输送，转基因原料和食品的检测技术是必不可少的。
Morisset （2008） 利用NASBA 技术在芯片上完成对转基因玉米MON863 和MON810 的多重定量检测，证明了该方法在转基因检测方面的可应用性。Freeman（2011）根据量子点特性设计生物探针用来检测小分子DNA。目的片段存在的情况下可以与探针结合暴露酶切位点，经ExoⅢ内切酶切开后探针与量子点的距离变增大发出荧光。CN201010604671.0 公开了一种基于荧光量子点编码二氧化硅球进行多种转基因植物的检测方法，其采用反相微乳法制备的二氧化硅球结构均一，过程简单易操作，控制QDs 的种类和比例能够准确编码二氧化硅球， 二氧化硅对QDs 的荧光起到保护作用， 提高QDs 的稳定性。CN200910181247.7 公开了一种葡聚糖四氧化三铁磁性纳米粒子的制备方法、葡聚糖四氧化三铁磁性纳米粒子用于转基因大豆检测过程中DNA 的提取纯化以及PCR 产物的纯化。CN201510064905.X 公开了一种利用微流体芯片高通量检测转基因玉米的方法，其使用单列流体通道包含反应孔腔数目不少于20、通道不少于3 列的微流体芯片进行检测。在一次PCR 扩增过程中， 同时完成2 个玉米内源基因以及18个外源重组品系的筛查检测，检测灵敏度可达1％。CN201510075479.X 公开了一种利用多重PCR 技术检测转基因番木瓜的方法。该方法包含如下步骤：S1.设计多重PCR 的5 对引物；S2.以待检测番木瓜基因组DNA 为模板，在PCR 反应中加入S1.设计的所有引物，进行PCR 及电泳，从而得知所检测的番木瓜是否为转基因番木瓜。该发明多重PCR 具有高效性、系统性、经济简便性，成功建立了检测番木瓜中转基因成分的五重PCR 技术，检测限为0.2 ng，达到了转基因番木瓜快速筛选的目的。CN201510005351.6 公开了一种食品中转基因成分的检测方法，包括：步骤一、提取原材料的总蛋白；步骤二、将步骤一得到的总蛋白质注射到检测装置中，使总蛋白通过检测装置，检测装置包括加样装置、多根中空纤维聚丙烯膜和第一多孔板体，中空纤维聚丙烯膜上附着有与转基因蛋白特异性结合的第一抗体，加样装置包括第二多孔板体和圆锥体，中空纤维聚丙烯膜的两端分别固定在第一和第二多孔板体上且分别与其上的孔洞贯通；步骤三，洗涤；步骤四，将与转基因蛋白质特异性结合的且带有标记的第二抗体注射到检测装置的加样孔，使第二抗体通过检测装置；步骤五，洗涤；步骤六，检测中空纤维聚丙烯膜上是否存在标记，并将检测结果和原材料中是否存在转基因成分联系起来。CN201410484724.8 公开了一种新的转基因地衣芽孢杆菌检测试剂盒及其检测方法，其通过巧妙地设计针对转基因地衣芽孢杆菌序列的带标记引物和探针，结合PCR扩增和核酸试纸条检测技术，实现了转基因地衣芽孢杆菌的高效快速检测。该方法特异性强，灵敏度高和稳定性好，对于提高转基因地衣芽孢杆菌的准确性、缩短检测时间具有重要的作用。
CN201310409728.5公开了一种米或米制品中是否含有转基因水稻LLRICE62 的检测法，以米或米制品为待测样品，以转基因稻米LLRICE62 为阳性对照，以非转基因稻米或者非LLRICE62 的转基因稻米为阴性对照；包括以下步骤：1）、设计耐除草剂转基因水稻LLRICE62 的对应引物组； 2）、提取待测样品、阳性对照、阴性对照的DNA；3）、将步骤2）所得的待测样品的DNA、阳性对照的DNA、阴性对照的DNA 分别利用步骤1）所得的引物组设置PCR 反应体系进行扩增；4）、利用步骤3）所得的待测样品反应液、阳性对照反应液、阴性对照反应液进行比对，从而判定米或米制品中是否含有转基因水稻LLRICE62。随着我国农业转基因生物技术的飞速发展以及人们对转基因产品安全的持续热点关注，各种转基因检测技术也就成了研究热点。高灵敏度、高通量、自动化和低成本是转基因检测技术将来的发展趋势。（江南大学图书馆张群）
