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首页 > 过刊浏览>2025年第卷第4期 >163-172. DOI:10.12441/spyswjs.20240617001
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重组靛蓝色素合成酶快速定量检测L-谷氨酰胺
CSTR:
作者:
作者单位:

1.常熟理工学院生物与食品工程学院，江苏 苏州 215500;2.芝诺(苏州)生物科技有限公司，江苏 苏州 215500;3.常熟理工学院江苏省高值化合物绿色生物制造工程研究中心，江苏 苏州 215500

作者简介:

通讯作者:

朱益波（1980—），男，博士，教授，硕士研究生导师，主要从事微生物合成研究。E-mail： centuryrain@126.com

中图分类号:

国家自然科学基金青年基金项目 （22208027）；苏州市科技创新项目（SNG2022059）；常熟市关键核心技术攻关项目（CS202305）。

基金项目:

国家自然科学基金青年基金项目 （22208027）；苏州市科技创新项目（SNG2022059）；常熟市关键核心技术攻关项目（CS202305）。


Rapid Quantitation of L-Glutamine Based on Recombined Blue Pigment Synthetase A
Author:
Affiliation:

1.School of Biology and Food Engineering, Changshu Institute of Technology, Suzhou 215500, China;2.Zeno (Suzhou) Biotechnology Co., Ltd., Suzhou 215500, China;3.Jiangsu Engineering Research Center of High-Value Compound Green Biomanufacturing, Changshu Institute of Technology, Suzhou 215500, China

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    摘要:

    【目标】快速、经济且准确地检测复杂样品中L-谷氨酰胺（L-glutamine， Gln）的浓度。方法 利用重组大肠杆菌（Escherichia coli）表达的靛蓝色素合成酶（blue pigment synthetase A，BpsA），开发快速精确定量Gln的方法。通过对脱辅基BpsA（apo-BpsA）进行体外活化及测定条件优化获得BpsA全酶（holo-BpsA）。结果 所获holo-BpsA可在适宜条件下于30 min内完成对Gln的定量测定，该方法检测限为10.46 μmol/L，定量限为31.68 μmol/L，板间标准偏差为1.41 μmol/L，板内标准偏差为0.85 μmol/L；针对5种常用培养基的平均加标回收率为94.7%~106.6%，其标准偏差基本在5%以下。holo-BpsA在-20 ℃下保存2个月后，酶活力未见显著变化。结论 作者开发的基于BpsA快速检测Gln的方法操作简便、专一性强、耗时短，具有较高灵敏度和准确度。

    Abstract:

    Objective The aim of this study is to determine the concentration of L-glutamine (Gln) in complex samples rapidly, economically, and accurately.Method A method for the rapid and precise quantification of Gln was developed based on the blue pigment synthetase A (BpsA) expressed by recombinant Escherichia coli (E.coli). The holoenzyme holo-BpsA was obtained by activating apo-BpsA in vitro and optimizing the measurement conditions.Result The obtained holo-BpsA can complete quantitative determination within 30 min under suitable conditions. The method showed the limit of detection being 10.46 μmol/L, the limit of quantification being 31.68 μmol/L, the interplate standard deviation of 1.41 μmol/L, and the intraplate standard deviation of 0.85 μmol/L. The average spiked recovery rate for five commonly used culture media varied between 94.7% and 106.6%, with the standard deviation mostly below 5%. There was no significant change in the enzyme activity after holo-BpsA was stored at -20 ℃ for two months.Conclusion The method developed for rapid quantitation of Gln based on BpsA is simple to operate, highly specific, and time-saving and has high sensitivity and accuracy.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

袁天慧,李晗,张怡婷,赵钰,成琦,韩雨洁,徐得磊,朱天择,罗兵,朱益波.重组靛蓝色素合成酶快速定量检测L-谷氨酰胺[J].食品与生物技术学报,2025,(4):163-172.

YUAN Tianhui, LI Han, ZHANG Yiting, ZHAO Yu, CHENG Qi, HAN Yujie, XU Delei, ZHU Tianze, LUO Bing, ZHU Yibo. Rapid Quantitation of L-Glutamine Based on Recombined Blue Pigment Synthetase A[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2025,(4):163-172.

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  • 收稿日期:2024-06-17
  • 最后修改日期:2024-09-19
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  • 在线发布日期: 2025-08-06
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