基于DNA银纳米簇的金黄色葡萄球菌检测方法的构建

doi:10.12441/spyswjs.20240905001

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基于DNA银纳米簇的金黄色葡萄球菌检测方法的构建
DOI:
                        10.12441/spyswjs.20240905001
                    
CSTR:
                        
                    
作者:
                        
                        
                    
作者单位:天津科技大学食品科学与工程学院，天津 300457
作者简介:
通讯作者:康青（1990—），女，博士，讲师，硕士研究生导师，主要从事食品安全相关研究。E-mail：kangqing@tust.edu.cn
中图分类号:
基金项目:国家级大学生创新创业训练计划资助项目（202210057042）。

Construction of Staphylococcus aureus Detection Method Based on DNA Silver Nanoclusters

Author:

Affiliation:

School of Food Science and Engineering, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China

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摘要:

【目的】建立一种简单、灵敏的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）检测方法，用于食品中该致病菌的高效检测。【方法】以金黄色葡萄球菌为研究对象，基于指数扩增反应（exponential amplification reaction，EXPAR）结合DNA银纳米簇（P-AgNCs）开发了一种简单、灵敏的金黄色葡萄球菌荧光检测方法EXPAR-P-AgNCs。通过设计识别探针，可在金黄色葡萄球菌存在的情况下触发EXPAR，生成大量的靶标DNA（T），T与发夹P结合，富G序列远离P-AgNCs，从而降低P-AgNCs的相对荧光强度，实现了对金黄色葡萄球菌的检测。【结果】金黄色葡萄球菌浓度在1×10²~1×10⁶ CFU/mL时，相对荧光强度与其浓度呈线性相关，检测限达10 CFU/mL，且特异性明显，无交叉反应。在牛奶、猪肉样品中加入金黄色葡萄球菌，利用该方法测定金黄色葡萄球菌，回收率为94.5%~115.0%。【结论】所构建的检测方法灵敏度高、特异性好，为病原微生物及其他影响食品安全的污染物的检测提供了思路。

Abstract:

[Objective] A simple and sensitive detection method for Staphylococcus aureus is established for the efficient detection of this pathogen in food.[Method] Targeting Staphylococcus aureus, a simple and sensitive fluorescent detection method for Staphylococcus aureus, EXPAR-P-AgNCs, was developed based on exponential amplification reaction (EXPAR) combined with DNA silver nanoclusters (P-AgNCs). A recognition probe was designed to initiate EXPAR in the presence of Staphylococcus aureus, generating a large amount of target DNA(T). The binding of T to hairpin P displaced the G-rich strand from P-AgNCs, resulting in a decrease in the relative fluorescence intensity of P-AgNCs and enabling the detection of Staphylococcus aureus.[Result] The relative fluorescence intensity showed a good linear relationship with Staphylococcus aureus concentration in the range of 1×102 and 1×10? CFU/mL. The limit of detection was as low as 10 CFU/mL. The method shows high specificity without cross-reactions. The recovery rates for Staphylococcus aureus spiked in milk and pork samples ranged from 94.5% to 115.0%.[Conclusion] The developed detection method demonstrates high sensitivity and excellent specificity, offering a promising approach for the detection of microbial pathogens or other contaminants threatening food safety.

参考文献

相似文献

引证文献

引用本文

陆晓彤,李金昭,杜欣军,康青.基于DNA银纳米簇的金黄色葡萄球菌检测方法的构建[J].食品与生物技术学报,2025,(6):144-152.

LU Xiaotong, LI Jinzhao, DU Xinjun, KANG Qing. Construction of Staphylococcus aureus Detection Method Based on DNA Silver Nanoclusters[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2025,(6):144-152.

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收稿日期:2024-09-05
最后修改日期:2024-12-26
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在线发布日期: 2025-10-11
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