2011, 30(1):1-5. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.001 CSTR:
摘要:菌种保存是微生物研究中的一项基础工作。在-196℃下活细胞物质代谢和生长几乎完全停止,液氮超低温保存使微生物的长期稳定保存成为可能。作者就影响乳酸菌、酵母菌、微藻、原生动物液氮超低温保存存活率的因素进行了讨论。此外,作者还讨论了液氮超低温保存中还存在的一些问题。
2011, 30(1):6-11. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.002 CSTR:
摘要:综述了乳蛋白基因多态性和检测方法以及其对乳品加工及人类营养影响的研究进展。酪蛋白的基因型较多,除了基因差异外,还有磷酸化水平与糖基化程度等其他影响因素。乳清蛋白部分,β-乳球蛋白(-βLG)的基因型较多,而α-乳白蛋白(-αLA)的基因型较少。乳蛋白基因多态性可从蛋白水平和基因水平两方面进行检测。乳蛋白基因型会显著影响乳的加工特性,包括热稳定性、凝乳性能及干酪的产率和品质。乳蛋白基因与人类营养息息相关,随着分子技术的发展,基因多态性的应用会更广,需进一步的研究来更好地描述多态性与乳品加工及营养之间的关系。
2011, 30(1):12-19. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.003 CSTR:
摘要:茶黄素是一种重要的功能因子,具有很好的应用价值和开发前景,已成为国内外研究的热点。作者对茶黄素的分子结构、理化性质进行了介绍,并对茶黄素的形成机理、制备、分析测定方法、分离纯化和功能活性的研究进行了综述,为茶黄素的进一步研究提供一定的理论基础。
孟宪军 , 李斌 , 李元甦 , 朱力杰 , 傅俊范 , 薛雪 , 汪艳群
2011, 30(1):20-24. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.004 CSTR:
摘要:利用响应面分析法对微波辅助提取北五味子中三萜工艺进行研究,在单因素试验的基础上,选取乙醇体积分数、提取时间和预处理剂倍数作为考察因素,采用响应面试验设计,利用Design Expert软件Central Composite设计实验进行优化组合,从而确定微波提取北五味子三萜的最佳工艺参数:乙醇体积分数53.6%、预处理剂倍数为4.6倍、提取时间1.89 min,预测北五味子总三萜提取率达到2.137%。验证试验证实了该方程有很好的拟合度,该方法具有提取率高、污染小、节约能源的特点。
2011, 30(1):25-31. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.005 CSTR:
摘要:以海芦笋为主要原料,并添加增色增香增味物质及助成型物质,用真空微波与真空干燥联合干燥技术生产重组脆片。固定海芦笋添加量为70 g,研究增色增香增味物质不同添加量,糯米粉、蔗糖、花生蛋白粉不同添加量及不同煮制调味时间对产品品质的影响,感官评定结果表明:当添加胡萝卜9 g,白芝麻8 g,味精0.05 g时,产品品质最好;正交试验显示:糯米粉添加量为8 g,蔗糖添加量为4.5 g,花生蛋白粉的添加量为4 g,最佳煮制调味时间为6 min时产品质量最佳。
2011, 30(1):32-36. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.006 CSTR:
摘要:研究了不同质量分数的芒果浓缩汁在不同温度下的流变学特性。回归分析发现,在研究的温度和质量分数范围内,芒果浓缩汁表现为Herschel-Bulkley流体,温度对黏度的影响可用阿伦尼乌兹方程表示,质量分数对黏度的影响可用幂函数表示,推导出了温度和质量分数对浓缩芒果汁黏度综合影响的方程。随着芒果浓缩汁质量分数的提高,体系的静态屈服应力值也增大。
2011, 30(1):37-43. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.007 CSTR:
摘要:作者研究了营养型鸡精对拘束负荷小鼠免疫功能的改善作用。将小鼠随机分为正常对照组,拘束应激组,25 mg/kg RU486(糖皮质激素受体拮抗剂组),1 mL/hg BEC(营养型鸡精)组及2mL/hg BEC组,每组10只。除正常对照组外,其余各组连续灌胃给药5 d后拘束负荷18 h,拘束恢复3 d后取血取脾脏测定相关指标。结果显示:BEC不仅可以明显改善拘束应激对小鼠脾脏的损伤,提高脾淋巴细胞总数,而且能显著降低应激小鼠血浆中皮质酮的含量,抑制相关凋亡因子的基因表达,提高线粒体膜电位,减少细胞色素C的释放。BEC可以通过抑制应激小鼠脾淋巴细胞的凋亡来维护脾淋巴细胞数目和功能,改善应激负荷引起的免疫抑制作用。
2011, 30(1):44-48. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.008 CSTR:
摘要:为了研究谷朊粉酶解产物中发挥抗氧化活性的肽片段,采用截留不同相对分子质量的超滤膜对谷朊粉酶解产物进行初步分离富集,并通过测定各级多肽的亚铁离子螯合能力、对亚油酸的自氧化抑制能力以及对ABTS自由基的清除能力来评价其体外抗氧化能力。结果表明:抗氧化能力由弱到强依次为:大于10 000<10 000~5000<小于5 000。对于相对分子质量在5 000以下的组分,当质量浓度为0.2、0.4 mg/mL时,亚铁离子螯合能力是超滤前样品的2倍左右;对亚油酸自氧化的抑制能力在36 h后比其它相对分子质量片段的组分效果明显;而当质量浓度为4 mg/mL时,TEAC值达到1.45 mmol/L Trolox;并且由高效液相色谱法对其相对分子质量进行分析发现,小分子肽占了绝大部分,说明抗氧化肽主要集中在相对分子质量2 000以下。
2011, 30(1):49-54. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.009 CSTR:
摘要:研究了甘氨酸螯合铁纳米脂质体作为补铁剂对缺铁性贫血大鼠的补铁效果。通过对SD品系初断乳大鼠喂养缺铁基础饲料,建立缺铁性贫血大鼠模型,再用甘氨酸螯合铁纳米脂质体对缺铁性贫血大鼠补铁,并与甘氨酸螯合铁和硫酸亚铁进行比较。结果表明,甘氨酸螯合铁纳米脂质体能够显著增加大鼠血液中血红蛋白含量,提高血清铁含量,降低血清总铁结合力(P<0.05);并且它能够有效地促进大鼠肝脾组织中铁含量的增加。因而,甘氨酸螯合铁纳米脂质体可显著改善大鼠的缺铁性贫血状况,且比甘氨酸螯合铁和硫酸亚铁有更好的补铁效果。
2011, 30(1):55-59. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.010 CSTR:
摘要:研究了苦荞麦蛋白质TBWSP31对Bcap37乳腺癌细胞的作用机制。采用流式细胞仪分析测定苦荞麦蛋白质TBWSP31对Bcap37细胞作用后,对细胞周期及癌基因和抑癌基因蛋白产生的影响。结果表明,TBWSP31对Bcap37细胞的增殖抑制作用存在时间效应和剂量效应。TB-WSP31作用于Bcap37细胞后,G0/G1期细胞比例增加,DNA合成期-S期细胞减少,说明细胞受阻于G0/G1期,阻滞G0/G1期的细胞向S期转化,细胞的恶性增殖相应减慢。TBWSP31可以上调抑癌基因蛋白Fas的表达,下调癌基因蛋白bcl-2的表达。
2011, 30(1):60-64. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.011 CSTR:
摘要:研究肉味香基的抗氧化效果,并对抗氧化成分进行分离,得到具有高抗氧化活性的组分。利用膜分离和硅胶柱对肉味香基进行分离,用人淋巴细胞的谷胱甘肽和脂肪过氧化水平评价各组分的抗氧化能力。根据相对分子质量将肉味香基分离得到3个组分,其抗氧化能力随相对分子质量的增加而增强,即:高相对分子质量组分(H-MRPs)>中相对分子质量组分(M-MRPs)>小相对分子质量组分(L-MRPs)。H-MRPs被进一步分离得到极性由弱到强的三个组分H-MA、H-MB、H-MC,其抗氧化能力从高到低为:H-MA>H-MB>H-MC。因此,肉味香基中主要抗氧化成分是高相对分子质量组分,其抗氧化能力随极性增强而减弱。
2011, 30(1):65-69. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.012 CSTR:
摘要:研究桦褐孔菌多糖对肿瘤细胞增殖的抑制和对荷瘤裸鼠的体内抑瘤作用。采用MTT法检测桦褐孔菌多糖对Jurkat和Daudi细胞增殖的影响,建立Jurkat荷瘤裸鼠模型,研究给药后对荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用。表明桦褐孔菌多糖在体外具有直接杀死Jurkat和Daudi肿瘤细胞的作用,最高抑制率分别为62.29%和66.42%,具有良好的剂量-效应关系,同时具有显著的体内抗肿瘤活性,大小剂量对Jurkat荷瘤的抑制率分别为43.52%和57.48%,并且能显著提高裸鼠的脾脏指数,表明桦褐孔菌多糖具有显著的抗肿瘤活性和增强免疫功能。
2011, 30(1):70-77. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.013 CSTR:
摘要:为充分利用三角帆蚌资源、开发利用其中的多糖类物质,运用热水浸提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白质、乙醇再沉淀的方法提取获得了三角帆蚌多糖(HCPS),提取率为3.5%左右。运用DEAE-纤维素-52色谱和葡聚糖G-100色谱对三角帆蚌粗多糖进行分离纯化,得到3个纯化组分(HCPS-1、HCPS-2和HCPS-3),3个组分HCPS-1、HCPS-2和HCPS-3的得率分别是26.9%、30.2%和3.9%。运用化学的、物理的方法测量分析了三角帆蚌粗多糖及其纯化组分的部分理化性质,包括总糖质量分数、蛋白质质量分数、硫酸基质量分数、相对粘度、单糖组成、相对分子质量以及红外光谱(FTIR)。HCPS-3具有较高的蛋白质质量分数、较高的硫酸基质量分数和复杂的单糖组成,这些与HCPS-1、HCPS-2明显不同。
2011, 30(1):78-83. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.014 CSTR:
摘要:大根萝卜特有的风味在高温下很容易改变或消失,因此为了保持这种特有的芳香气味,在大根泥的速冻加工前处理中不易进行热烫处理。作者以生冻大根泥的加工工艺为基础,应用臭氧水与超声波协同处理代替原有的次氯酸钠溶液杀菌方法使微生物得到更好的控制,同时使速冻产品的颜色、风味等品质得到了更好的保持。
2011, 30(1):84-89. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.015 CSTR:
摘要:以耐热核酸酶基因nuc、纤维蛋白原结合蛋白基因clfA和SmaI限制性酶切片段特异序列为靶基因,设计筛选引物,建立并优化了检测金黄色葡萄球菌(Staphylococus aureus,SA)的多重PCR体系。采用10株SA和46株非SA验证了该多重PCR具有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到1.197 3 ng。人工污染样品,当起始污染量为1.2个/g时,37℃增菌培养6 h即可检出。一共检测了43份样品,检出3份阳性样品,其中有2份阳性样品与传统方法一致,另外一份阳性样品用测序验证。作者建立的多重PCR方法可特异、快速地实现对SA的检测。
2011, 30(1):90-94. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.016 CSTR:
摘要:五味子是一种具有广阔开发前景的传统中药材。实验中,以五味子为原料,利用水提醇沉法得到了五味子粗多糖。在料液质量体积比为1 g∶32 mL,浸提温度99℃,提取时间4 h的适宜的提取工艺条件下,粗多糖的提取率达5.61%。采用酶法与Sevag法联用脱除粗多糖中蛋白质效果较好。利用凝胶色谱柱层析法对多糖半纯品进行分级分离,得到了两种多糖Ⅰ和Ⅱ。经薄层色谱分析,初步确定了两种多糖的单糖组成,又通过红外光谱分析,证明多糖Ⅰ可能为α-呋喃糖,多糖Ⅱ可能为β-吡喃糖。
2011, 30(1):95-100. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.017 CSTR:
摘要:作者采用了基于模块性的图聚类算法来探测蛋白质相互作用网络中的集团,在具有2 617个节点11855个相互作用的酵母蛋白质相互作用网络中探测出177个集团,同时采用慕尼黑信息中心(Munich Information Center,MIPS)的层次功能注释对其进行了注释,并且验证得到的集团的确是内部连接紧密的子图。
2011, 30(1):101-105. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.018 CSTR:
摘要:以大豆分离蛋白为底物,游离氨基酸含量、多肽分布、水解度为指标,氨肽酶ProteAXG为对照,开展中性蛋白酶和氨肽酶双酶协同水解的研究。在底物质量浓度6 g/dL,中性蛋白酶添加量5000 U/g,氨肽酶添加量9.75×105U/g,pH 8.5,温度50℃,水解4 h后,水解液中游离氨基酸含量13.6 mg/mL,多肽相对分子质量在1100以下,其中600左右的多肽约占16%,二肽三肽约占75%,水解度达50.8%。氨肽酶与中性蛋白酶优化后,水解度达62%。结果表明:该氨肽酶无论单独或与中性蛋白酶组合水解,都能达到较为深度的水解效果。
陈晓萍 , 孙付保 , 陈晓旭 , 张建华 , 张宏建 , 毛忠贵
2011, 30(1):106-112. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.019 CSTR:
摘要:采用响应面法试验设计,对康宁木霉(Trichoderma konigii)固态发酵玉米皮生产纤维素酶的条件进行了优化,并建立了纤维素酶随麸皮添加量、物料初始水分质量分数和pH值变化的二次回归方程。利用该方程探讨了各因子对纤维素酶的影响。结果表明,各因子对纤维素酶的影响顺序为:物料初始水分质量分数>麸皮添加量>pH值,各因子间交互作用不显著。结合单因素实验,最终确定适宜的发酵条件为:麸皮添加量24.4 g/dL;营养液添加量:1.0 g/dL硫酸铵,0.05 g/dL磷酸二氢钾,0.1 g/dL硫酸镁,0.2 g/dL乳糖;初始水分质量分数58.6%;pH 5.5。在此条件下发酵120 h,滤纸酶活达到11.3 IU/g,较未优化前提高了2.9倍。
王柯 , 毛忠贵 , 张成明 , 张庆华 , 陈程 , 王欣 , 姜立 , 何江 , 张建华 , 张宏建
2011, 30(1):113-117. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.020 CSTR:
摘要:木薯酒精废水中固形物(干基)的主要成分为纤维素和半纤维素,分别为30%和18%。由于内切-β-1,4-葡聚糖苷酶(CMC酶)和木聚糖酶在高温厌氧消化过程中对纤维素和半纤维素的水解起关键作用,作者比较了从厌氧污泥中提取CMC酶和木聚糖酶的6种方法,并分析了其在厌氧污泥中的分布情况。结果表明,用质量分数1% Triton X-100来提取CMC酶和木聚糖素酶是一种高效且温和的酶提取方法,且至少有占总酶质量90%的CMC酶和70%的木聚糖酶分布在污泥絮凝体(细胞表面或胞外聚合物)中。
2011, 30(1):118-123. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.021 CSTR:
摘要:为探索罗布麻酶法脱胶的最优工艺条件,采用筛选的新型罗布麻脱胶菌种——琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii FM208850),在单因素实验基础上,运用Box-Behnken设计的响应面试验方法对酶法脱胶工艺进行了预测。根据回归分析确定了最优工艺:添加质量分数0.2%Na2CO3使沤麻液初始pH值为9.5,酶量8.38 mL(161.3 U/mL),质量体积比1 g∶16 mL,脱胶温度45℃,脱胶时间10 h;此工艺下测得残胶率为7.937%。与回归模型预测残胶率相差不大,模型与实际情况拟合较好。
2011, 30(1):124-130. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.022 CSTR:
摘要:构建并筛选耐热分枝犁头霉cDNA文库获得639 bp热稳定α-半乳糖苷酶基因片段,并以5′-RACE和3-′RACE技术获得上下游片段1817 bp和1092 bp,拼接得α-半乳糖苷酶全长序列2228 bp,其完整开放读码框为2142 bp,编码713个氨基酸,G+C含量43%;产物预测等电点5.2,预测相对分子质量81000。该基因(GenBank No.DQ234280)属α-半乳糖苷酶36家族,与其他来源的α-半乳糖苷酶基因同源性较低,与链霉菌Streptomyces avermitilis MA-4680的α-半乳糖苷酶同源性最高为38%。
2011, 30(1):131-137. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.023 CSTR:
摘要:脱枝酶是淀粉加工过程中水解其1,6-糖苷键的水解酶,为淀粉彻底糖化所必需。作者从高温菌Bacillus sp.CBB272的培养液中,经过盐析、凝胶过滤层析、弱阴离子交换层析以及强阴离子交换层析联用的方法,纯化出一种新型脱枝酶。该酶在SDS-PAGE上的相对分子质量约为70 000,最适作用温度为70℃,最适作用pH为6.0。该酶在30~70℃、pH 4.5~9.0之间具有优良的稳定性。该酶在50℃和pH 6.0下水解支链淀粉的Km、Vmax分别为4.0324 mg/mL和0.1841 mg/(min.mL)。研究了不同金属离子对该酶活性和热稳定性的影响,发现Ca2+、Mg2+、Mn2+等金属离子对于该酶具有显著的激活效果,并且Ca2+对该酶的热稳定性具有很好的提升作用。
李昌伟 , 蔡宇杰 , 廖祥儒 , 李枝玲 , 罗军侠 , 张大兵
2011, 30(1):138-143. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.024 CSTR:
摘要:研究了由镰刀霉菌(Fusarium sp)JN158发酵所产紫色素的提取条件和理化性质,结果表明:该紫色素的提取溶剂为体积分数95%乙醇溶液;紫色素在酸性条件下对温度,光照,柠檬酸和苯甲酸钠有较好的稳定性;最大吸收波长为310 nm和510 nm;对H2O2和Na2SO3敏感;蔗糖与葡萄糖有增色效果;金属离子Zn2+、Na+、Ca2+对色素稳定性无影响,K+、Mg2+、Fe3+、Al3+、Cu2+对色素影响较大。
2011, 30(1):144-150. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.025 CSTR:
摘要:采用CMC唯一碳源平板法和内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等3种酶平板鉴别法从海南红树林土壤中分离到109个有阳性信号的菌株,经发酵产酶复筛选出一株产纤维素酶活相对较高的真菌HBZ003。经鉴定该菌为产紫青霉(Penicillium purpurogenum)。通过发酵产酶条件优化,获得最佳培养基组成为:麸皮8 g/L,CMC 2 g/L,(NH4)2SO43 g/L,KNO32 g/L,KH2PO43 g/L,NaCl 6 g/L,CaCl20.5 g/L;发酵条件为250mL三角瓶中装培养液100mL,在pH4.0、30℃,160 r/min条件下振荡培养5 d,测得发酵液中CMCase和FPA分别为16.04U和4.08 U。
2011, 30(1):151-155. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.026 CSTR:
摘要:伐地那非是用于治疗阳痿的磷酸二酯酶(phosphodiesterase type-5,PDE-5)抑制剂药物。违法添加到保健品和中成药的伐地那非及其结构类似物对公众健康构成了威胁。单克隆抗体4B9被鉴别为能够同时检测伐地那非及其类似物。以这株抗体建立的间接竞争ELISA方法,对伐地那非的检测限为5.0 ng/mL,线性范围为5.0~40 ng/mL(R2=0.952),IC50值为18.2 ng/mL。对20个中成药进行检测没有发现假阳性,伐地那非最低检出浓度为0.08 mg/g;添加回收率76%~116%,批内差异为9.7%~16.2%。
2011, 30(1):156-160. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.027 CSTR:
摘要:为建立三聚氰胺免疫分析方法,采用戊二醛法合成免疫抗原MEL-BSA和包被抗原MEL-OVA,全抗原经紫外吸收法检测证实偶联成功且偶联比约为16∶1。用MEL-BSA免疫BALB/c小鼠,用常规单克隆制备技术筛选获得1株稳定分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的细胞株6E3。腹水经纯化后,研究了抗体效价、竞争抑制能力及与结构类似物的交叉反应率,其中抗体效价为1∶64 000,检测线性范围为0.1~3.2 mg/L,IC50为1.01 mg/L,与三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺及三聚氰酸二酰胺的交叉反应率均小于0.1%,该方法有望用于三聚氰胺免疫检测试剂的研制开发。
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