摘要:基于34条微生物脂肪酶序列,用多元逐步回归法分析了影响脂肪酶最适温度的氨基酸及其二联体。结果表明:与最适温度呈正相关性的氨基酸是Y,负相关性的有I、S、K;呈正相关性的氨基酸二联体有IR、KS、NY、SA、ST和YR,负相关性的有DK、DY、IS、KA、WS、YS和QI。通过对相关性氨基酸二联体在耐热和不耐热脂肪酶中空间位置的分析发现:与最适温度呈正相关性的氨基酸二联体多数位于α-螺旋区,且分布在酶蛋白表面;而呈负相关性的多数位于β-折叠区和无规则卷曲区,一般分布于酶蛋白内部,并常出现在多肽链的N或C端。

摘要:探讨了改善蛋黄酱品质的最佳褐藻胶添加量,利用流变仪研究了不同添加量的褐藻胶对蛋黄酱流变特性的影响。静态流变特性的研究表明:蛋黄酱样品呈现出触变性、假塑性,流变学方程为Herschel–Bulkley;温度对蛋黄酱样品的表观粘度的影响符合Arrhenius模型。动态流变性质的研究表明:蛋黄酱样品显示弱凝胶的特性。实验表明:添加褐藻胶的能显著提高蛋黄酱的流变学稳定性,其中褐藻胶添加质量分数为2.0%的蛋黄酱样品比添加量为2.5%的蛋黄酱样品在流变学特性、感官特性上更接近全脂类蛋黄酱。

摘要:以水溶性低分子量壳寡糖作为修饰剂对已纯化的多聚半乳糖醛酸酶进行化学修饰,通过单因素试验和正交试验探讨pH值、温度、修饰时间、壳寡糖的用量等因素对修饰效果的影响和最佳修饰条件的优化筛选。结果表明,通过正交试验筛选出最佳修饰反应条件为:80mg活化的多聚半乳糖醛酸酶,反应体系中pH为4.0,反应温度为3℃,反应时间为12h,壳寡糖用量为150mg,修饰效果最佳。利用此条件对多聚半乳糖醛酸酶进行化学修饰具有显著的激活作用,修饰后酶的比活力是340.10U/mg protein,比修饰前提高了153.42%。

摘要:选用过氧化氢体系、羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系、亚硝酸盐体系、还原能力对蓝莓冻果多酚粗提物进行抗氧化活性的测定,并与VC做对比。在试验浓度范围内(0.5～10mg/mL),蓝莓冻果的多酚粗提物对几种体系有不同程度的抗氧化作用,清除过氧化氢能力较强,清除羟基自由基和亚硝酸盐的能力明显弱于VC,还原能力及清除超氧阴离子能力与VC较为接近。

摘要:以西农萨能奶山羊和荷斯坦牛为对象,研究山羊乳和牛乳挥发性游离脂肪酸组成的差异,并分析其分子机理。采用固相微萃取/GC-MS分析二者挥发性游离脂肪酸组成,对西农萨能奶山羊脂肪酸合成酶乙酰-CoA/丙二酰-CoA转移酶区域(AT-MT)cDNA克隆,对其AA序列及蛋白二级结构与荷斯坦牛进行比较。结果表明西农萨能奶山羊奶中癸酸(40.89g/100g)是影响其风味的主效成分。西农萨能奶山羊AT/MT AA序列、蛋白二级结构与荷斯坦牛存在明显差异。西农萨能奶山羊脂肪合成与代谢相关酶基因应是羊奶膻味形成的关键因素,传统育种和分子育种方法将是提高山羊乳品质的有效途径。

摘要:研究了椒样薄荷(Mentha piperita L.)与苏格兰留兰香(Mentha cardiaca G.)精油的抑菌活性,测定了精油的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。同时对两种薄荷叶片以及精油提取后残渣的多酚含量和抗氧化性进行研究,以期为椒样薄荷与苏格兰留兰香的多角度开发利用提供理论依据。结果表明:2种薄荷精油对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌和李斯特菌均有抑制作用,而对于肠炎沙门氏菌及黑曲霉没有抑制作用,椒样薄荷精油的抑菌效果比苏格兰留兰香精油强。另外,椒样薄荷多酚含量在提取精油后显著性减少,而苏格兰留兰香未显著性降低。两种薄荷精油提取后残渣具有较强的DPPH自由基清除能力,而FRAP抗氧化能力却显著性降低。

摘要:针对平菇季节性强和不耐贮藏的特点,对平菇软包装调味产品的护色及风味改进进行了研究,通过色差分析得到最佳护色方法为0.07g/dL抗坏血酸+0.1g/dL柠檬酸;通过单因素及L9(34)正交试验,采用感官评定、质构分析以及GC-MS分析得到最佳配方为:食用胶质量分数为1.8%、复配(卡拉胶:魔芋粉)比例3∶1(g∶g)、肉粉质量分数为1%、蘑菇香精质量分数为0.2%。

摘要:采用气相色谱法测定油茶籽油中脂肪酸组成,高效液相色谱法测定其维生素E含量。结果表明:初级压榨和精炼油茶籽油主要由4种脂肪酸组成,分别为棕榈酸(质量分数为7.68%和8.92%)、硬脂酸(质量分数为1.66%和1.78%)、油酸(质量分数为82.90%和81.09%)、亚油酸(质量分数为7.17%和7.22%);高效液相色谱法测定VE线性范围0.5～2.5μg(R2=0.999 3),平均回收率为98.05%,RSD为0.75%(n=5),初级压榨和精炼油茶籽油中维生素E含量分别为356.31mg/kg和107.07mg/kg。建立的色谱方法具有快速简便准确度高的特点。

摘要:利用羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)内疏水外亲水的空腔结构对东方琥珀玫瑰香精进行包合,以平均粒径为主要指标,粒径分布系数(PDI)及ζ电位为辅助指标对胶囊进行考察。通过单因素实验找出对包合工艺影响较大的因素。在此基础上采用Box-Behnken响应面设计法优化包合工艺,得到最佳包合工艺条件:包合时间为4h,磁力搅拌转速为1 000r/min,反应pH值为8,壁芯质量比为1.69,乳化剂为聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯(Tween-20),乳化剂香精质量比为3.13,固形物质量分数为1.5%。其平均粒径为72.8nm,粒径分布系数为0.127,ζ电位为-12.6mV。通过透射电镜观察发现纳米香精胶囊呈不规则的圆形。

摘要:采用大孔树脂对藿香蓟花蓝色素的提取液进行了吸附和洗脱试验,并确定藿香蓟花蓝色素的分离最佳工艺条件。结果表明,D301树脂对藿香蓟花蓝色素的静态吸附率达到90mg/g,吸附蓝色素的平衡时间较短且重复使用20次后吸附性能依然稳定;上柱优化条件为流速为3mL/min,质量浓度为0.2mg/mL,温度为20℃;柱层析饱和吸附后用1mol/L盐酸洗脱,洗脱率达到96.08%。

摘要:研究冷冻干燥、喷雾干燥、真空干燥、热风干燥对甲壳低聚糖品质的影响。以不同的干燥方式制备甲壳低聚糖粉,测定产品的物性、还原糖、总糖及游离氨基含量和抗氧化活性等质量指标。冷冻干燥产品的还原糖、总糖、游离氨基的含量以及清除OH.的能力最高,产品的色泽和溶解性较好;喷雾干燥产品各项指标均较接近冷冻干燥;真空干燥产品除了清除O2-.能力外,其他指标不及冷冻干燥和喷雾干燥,但优于热风干燥;热风干燥产品色泽较深,还原糖、总糖、游离氨基含量以及清除OH.的能力、溶解性都不及其他3种干燥方式。相对于其他3种干燥方式,喷雾干燥较适合甲壳低聚糖的工业化生产。

摘要:建立了基于单滴微萃取(SDME)结合气相色谱法测定塑料食品包装浸出液中3种邻苯二甲酸酯类物质含量的新方法。研究了萃取溶剂、萃取时间及搅拌速度等因素对萃取效率的影响,确定萃取的最佳条件:以1.4μL二甲苯为萃取剂,萃取时间为20min,萃取温度为40℃,搅拌速度为200r/min。在最优条件下,该方法的线性范围为0.1～100μg/mL,检出限为0.01μg/mL,实际样品的加标回收率为97%～113.9%。本法具有简单、快速和成本低等特点。

摘要:利用水提醇沉法从地木耳中提取多糖,再经初步纯化后,进行多糖的抗氧化性及抑菌作用实验。结果表明,地木耳多糖对.OH和DPPH自由基有较强的清除作用,且最高清除率分别为71.53%和66.35%。但地木耳多糖对O2-.自由基和亚硝酸盐几乎没有作用效果,最高清除率分别只有33.33%和22.38%。地木耳多糖对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有一定的抑制作用,最小抑菌质量浓度MIC在125～250μg/mL之间。而对金黄色葡萄球菌的抑制作用不明显。

摘要:通过富含硫氰酸盐、类黄酮类食物对大鼠食物利用率、肝肾功能的影响观察,结合对甲状腺的损伤,综合探讨此类植物化合物的生物学作用。模拟人体摄入食物类别、剂量及途径,给予实验大鼠不同剂量单一或联合富硫氰酸盐、类黄酮类食物,短期(30d)喂养后,采血及取相关组织分析。表明各实验因素对大鼠进食量影响不明显,联合高剂量组在实验第一周略有下降,但随实验进程延长,后期与其余各组比较差异不明显。对大鼠体重影响不大。单一白菜、豆角组、高剂量组大鼠肝脏系数与对照组比较显著降低(P<0.05、P<0.01、P<0.05);肾脏系数变化不明显;肝脏酶学指标ALT(丙氨酸氨基转移酶)/AST(天门冬氨酸氨基转移酶)各实验组较对照组相比显著减少(P<0.01);血清总胆红素各组与对照组相比均有所减少,白菜组、豆角组、联合中量组(实验组Ⅱ)、联合高剂量组(实验组Ⅲ)更为明显(P<0.01);血清尿素氮(BUN)豆角组、联合低剂量组(实验组I)、联合中剂量组(实验组II)、联合高剂量组(实验组III)与对照组相比显著增加(P<0.05、P<0.01、P<0.05、P<0.05)。结果表明随富硫氰酸盐、类黄酮类食物摄入量的增加,其对机体肝肾功能均有损伤,表现在肝脏更为明显。说明合理适量摄入的重要性,也提示盲目补充硫氰酸盐、类黄酮类会加重肝肾负担,对于有潜在甲状腺病史人群尤应引起重视。

摘要:研究了植物生长调节剂对Metarhizium anisopliae Tax-27产紫杉醇的影响,采用HPLC法检测。结果表明,赤霉素(GA3)质量浓度为4mg/L、茉莉酸甲酯(MeJA)质量浓度为60umol/L、矮壮素(CCC)质量浓度为25mg/L、6-苄氨基嘌呤(6-BA)质量浓度为4mg/L、萘乙酸(NAA)质量浓度为4 mg/L时该菌产紫杉醇的质量浓度分别为:670.49、838.11、942.57、455.72、450.48、953.35μg/L。但GA3、MeJA和CCC对M.anisopliae Tax-27菌丝体的生长有明显的抑制作用;6-BA和NAA对菌丝体的生长均有促进作用。

摘要:采用牛血清白蛋白偶联的三聚氰胺(melamine-BSA)完全抗原免疫BALB/C小鼠,应用杂交瘤技术制备抗三聚氰胺的特异性单克隆抗体。所得单克隆抗体效价可达5.0×105,且抗体的亚类类型为IgG1,抗体的亲和常数为3.21×109 L/mol。与三聚氰酸、三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺的交叉反应率分别为30%、93%和46%。说明该单抗可用于三聚氰胺类物质的检测,为研制高质量的三聚氰胺ELISA试剂盒和胶体金试纸条奠定了基础。

摘要:研究紫心甘薯对四氯化碳(CCl4)、卡介苗加脂多糖(BCG+LPS)诱发小鼠肝损伤的保护作用。ICR小鼠100只,雄性,按体重随机分为两大组,每大组随机分为5个小组,连续给药12d后,除空白组外,各实验组分别进行如下处理:A组:按10mL/kg剂量腹腔注射体积分数0.1%CCl4油溶液,建立小鼠肝损伤模型;B组:采用尾静脉注射BCG+LPS诱导小鼠免疫性肝损伤。12h后测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性和肝组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量;观察肝脏、脾脏系数的变化。紫心甘薯组各组肝、脾指数、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性和肝组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平与模型对照组各水平相比均具有显著性差异(P<0.05),且肝、脾指数水平与ALT、AST、MDA、GSH含量相关性显著(P<0.05)。说明紫心甘薯对CCl4所致小鼠急性化学性肝损伤、BCG+LPS诱导的免疫性肝损伤均具有显著的保护作用,且对CCl4所致小鼠急性化学性肝损伤、卡介苗和脂多糖诱导的免疫性肝损伤保护效果优于联苯双酯,其机制可能与其降酶、降低脂质过氧化水平、阻止肝细胞坏死作用有关。

摘要:植物甾醇脂肪酸酯可以通过脂肪酸和植甾醇在酸和碱的催化下直接酯化合成。为提高酯化率,采用胶束催化剂合成脂肪酸植物甾醇酯,研究了反应条件对反应的影响。研究表明,胶束催化剂十二烷基硫酸铜为合成植物甾醇脂肪酸酯的良好高效催化剂,并可回收利用。在酸醇摩尔比1.2∶1,十二烷基硫酸铜用量为植物甾醇摩尔百分比为1%,反应温度110℃,无溶剂反应4h的最佳条件下,植物甾醇的酯化率为80.7%～86.4%。

摘要:通过对影响花椒CO2超临界萃取的因素:萃取压力、时间、温度、CO2流量、夹带剂用量进行考察,由正交试验确定了较优萃取工艺,对花椒有效成分提取率的影响依次为:萃取压力>萃取时间>萃取温度>CO2流量>乙醇夹带剂用量;得出超临界萃取的较优工艺,以期为花椒CO2超临界萃取的工业化大生产提供科学依据。

摘要:以低盐固态酿造酱油为研究对象,跟踪监测了酱油酿造过程中水分含量、水分活度、氨基态氮、总酸、微生物(菌落总数、霉菌、酵母菌、产黄曲霉毒素B1的霉菌)、黄曲霉毒素B1(AFB1)的动态变化,结果发现成品酱油中的AFB150%来源于原料,50%源于制曲过程中污染的产毒菌在发酵前期产毒;蒸煮、制曲、发酵、淋油四阶段均对AFB1有一定的去除作用,但生产结束后,仍有52.04%的AFB1会从酱醅中迁移到成品酱油中,所以需针对污染源采取相应措施控制酿造酱油中AFB1的污染。

摘要:应用形态学、生理生化和16SrRNA基因序列分析方法,鉴定了从腐烂蓝藻中分离得到的一株细菌,利用液态发酵法探讨了碳、氮源等对其发酵产蛋白酶的影响并研究了其部分酶学性质。结果表明,该菌可归入沙雷氏菌属,定名为Serratia marcescens SYBC YH,其最适碳源为果糖、葡萄糖、羽毛粉或玉米粉,最适氮源为玉米浆粉、酵母膏和牛肉膏;该菌还可以蓝藻为唯一氮源发酵产耐有机溶剂蛋白酶。该酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。

摘要:从堆积骨骼的土样中经初筛、复筛和牛骨粉发酵实验,筛选出高产骨胶原蛋白酶的菌种MBL13(酶活36.80±1.93U/mL)。经形态学观察、生理生化特性、16SrDNA序列分析和傅里叶红外测定细胞结构,鉴定该菌株为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),并经牛骨胶原蛋白的酶解对比实验表明,MBL13所产的酶酶解骨胶原蛋白的能力强于标准品骨胶原酶I型(美国)。由于酶解后产生的多肽条带并不是连续的,说明发酵液中的胶原蛋白酶对牛骨胶原蛋白的酶解具有特定的酶切位点。

摘要:在摇瓶条件下对赖氨酸发酵的供氧、初糖浓度等进行了研究,并对氮源硫酸铵、营养因素玉米浆和L-苏氨酸进行了响应面分析试验,得到最优的摇瓶发酵条件。在此基础上,进行了7L自控发酵罐赖氨酸发酵试验。研究结果表明,在7L发酵罐中发酵64h左右,积累赖氨酸盐酸盐可达161g/L,糖酸转化率58.3%。

摘要:研究了表面活性剂对Fusarium sp.的发酵产脂肪酶的影响。结果表明,添加无患子提取物的酶活为最高,说明无患子提取物是最佳的的表面活性剂,并且确定提取无患子提取物的液固比为6∶1(mL∶g)时酶活达到最高。粗酶液经(NH4)2S04沉淀后进行双水相萃取分离,结果表明,采用质量浓度为30g/dL的PEG(M 4000)和质量浓度为20g/dL的NaH2PO4时纯化系数F和萃取率Sf达到最高;经过双水相萃取后,该脂肪酶的纯化倍数可以达到7.92,回收率为48.30%。

摘要:从长双歧杆菌WBL001基因组中克隆了serpin基因,构建重组Serpin蛋白的原核表达体系pBX2-serpin,纯化表达产物作为抗原,免疫小鼠制备Serpin的多克隆抗体。采用偶联Serpin的磁珠纯化多克隆抗体,并探究了不同溶剂对抗体洗脱效率的影响。纯化的多抗用于斑点杂交筛选产Serpin蛋白的菌株。结果表明:磁珠纯化多克隆抗体以1 mol/L NaOH的洗脱率最高,达50%;纯化后的Serpin抗体消除了与部分乳酸菌和致病菌的非特异性反应;采用斑点杂交方法从11株双歧杆菌中筛选到婴儿双歧杆菌WBAN07具有类Serpin蛋白。

摘要:主要研究了在大肠杆菌中克隆和表达海栖热袍菌(Thermotoga maritima)的一个α-葡萄糖苷酶(TM1834)。通过PCR方法克隆编码T.maritima的一个α-葡萄糖苷酶基因aglA,构建重组质粒pHsh-AglA,电击转化Escherichia coli JM109,通过热激诱导高效表达。SDS-PAGE检测出蛋白相对分子质量约55 000,经热处理,阴离子交换层析和疏水层析纯化后的α-葡萄糖苷酶最适反应温度为90℃,最适反应pH为7.5,在pH 6.5～8.5,温度65～100℃之间酶活仍达到50%以上。在辅助因子NAD+,Mn2+和还原剂DTT的存在条件下达到最高酶活。

摘要:研究尝试应用微生物菌体总RNA提取代替DNA提取,进而通过反转录-PCR(RT-PCR),结合变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术,以期揭示超高压处理后低温烟熏火腿中腐败微生物的存活情况,探索RNA-DGGE手段判定超高压处理后微生物存活状态的可行性。分别以400MPa和600MPa的压力在室温(22℃)条件下,对包装后的烟熏火腿进行10min超高压处理,未经高压处理样品作对照,于4℃冷藏条件下,贮藏1、15、30、60、90d,直接提取样品中微生物的总RNA,对其进行RT-PCR和DGGE指纹图谱分析。DGGE指纹图谱显示,超高压处理对烟熏火腿中的优势腐败菌具有较强的抑制作用,且随压力的升高抑菌效应增强;超高压处理后烟熏火腿微生物种群结构变得单一,Weissella viridescens和Leuconos-toc mesenteroides是超高压处理后烟熏火腿中的优势腐败菌。基于菌体总RNA提取的DGGE手段能够有效检测超高压处理后微生物的存活状况,揭示超高压对低温烟熏火腿中优势腐败微生物的抑菌效果。

摘要:比较两种从噬菌体展示文库中淘选抗黄曲霉毒素B1单域重链抗体的方法,并为淘选针对小分子物质的单域重链抗体提供参考。采用固相淘选技术,以黄曲霉毒素B1人工抗原为靶分子,淘选天然单域重链抗体库,分别采用Gly-HCl法和AFB1竞争法洗脱结合噬菌体,对洗脱物进行滴度测定,以回收率和富集度为指标,对两种洗脱方法进行比较。采用phage-ELISA法鉴定噬菌体克隆,并对阳性克隆进行交叉反应分析以及序列测定。滴度测定结果显示,Gly-HCl法回收率比竞争法高5～10倍。分别随机挑取20个单克隆进行phage-ELISA鉴定,其中,Gly-HCl洗脱法未获得阳性克隆,AFB1竞争洗脱法得到8个阳性克隆。序列测定结果显示,这8个克隆均编码单域重链抗体。

摘要:以反式茴脑为惟一碳源,通过富集培养和分离纯化,从环境中筛选到320株能以反式茴脑作为惟一碳源的菌株。经薄层层析法、紫外分光光度法和气相色谱法相结合对转化液进行分析,结果获得一株相对高产茴香醛的细菌菌株WGB30。该菌最适生长温度28℃,最适pH 6.5,在复筛培养基中,30℃摇床200r/min培养12h可达到对数期,在培养60h时茴香醛的摩尔转化率达5.08%。综合形态学、生理生化实验、Biolog EcoPlates鉴定和16SrDNA序列分析结果,将菌株WGB30鉴定为伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)。

摘要:建立三聚氰胺直接和间接竞争ELISA检测方法。三聚氰胺(melamine)-BSA免疫BALB/c小鼠,通过融合小鼠脾细胞与SP2/0细胞,制备分泌MEL单克隆抗体(monoclonal anti-body)的细胞株;体内诱生腹水制备MEL-mAb。用高碘酸钠法制备MEL-OVA-HRP偶联物并对其活性进行鉴定。分别用MEL-OVA和制备的MEL-mAb包被,用三聚氰胺标准液作为抑制物,做直接和间接竞争ELISA,并对两种ELISA方法在灵敏度、线性检测范围、检测时间进行比较。筛选出4株可以稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。其中的C4株腹水效价达到1∶104,亲和力常数(Ka)为2.92×108L/mol。三聚氰胺间接竞争ELISA和直接竞争ELISA检测法的IC50分别为3.12μg/L和56.88μg/L,线性检测范围分别为0.05～10μg/L和0.1～1 000μg/L。两种竞争ELISA方法都能应用于三聚氰胺的快速检测,但间接竞争ELISA比直接竞争ELISA更加灵敏。

摘要:诱变筛选出了耐pH、高剪切力,适合连续循环发酵生产L-乳酸新技术的JD.L-乳酸菌株。确定了连续循环发酵工艺条件:培养基采用棉粕水解液,培养温度51℃,PH值6.2,氢氧化钠中和发酵,氧化还原电位值(rh)为-100mV。流加速率控制在0.05h-1。根据连续循环发酵液技术要求,选择了采用1μm的微滤膜作保安过滤。然后10nm的超滤膜、相对分子质量300的纳滤设备,确定了菌体循环膜过滤基本参数。