2012, 31(6):561-569. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.001 CSTR:
摘要:大肠杆菌是表达重组蛋白运用最广泛的宿主之一。异源蛋白在大肠杆菌中的表达往往会形成不溶性的包涵体;表达蛋白如果分泌至周质甚至胞外,不仅能够正确折叠,而且能简化后续的纯化;信号肽在蛋白分泌的过程中起关键作用,本文综述了大肠杆菌的跨膜转运途径与基本分泌系统,阐述了信号肽的结构与序列对重组蛋白分泌能力的影响,以及提高重组蛋白分泌能力的有效策略,总结了大肠杆菌系统成功实现重组蛋白分泌表达的新进展,为工业酶制剂及蛋白质药物相关技术的发展提供指导。
2012, 31(6):570-574. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.002 CSTR:
摘要:介绍了NIR(近红外)无损检测技术的基本原理和数据处理方法,综述了国内外应用NIR无损检测技术在苹果糖度、酸度等内部品质以及褐变和病害等内部缺陷方面的研究现状,展望了苹果NIR光谱无损检测技术研究方向和应用前景。
2012, 31(6):575-579. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.003 CSTR:
摘要:以紫苏叶片为外植体,通过向B5培养基中添加不同浓度的激素组合,进行正交实验,研究其对紫苏叶片愈伤组织诱导率的影响。结果表明,在B5培养基中,添加2,4-D1.0 mg/L+KT0.4 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5mg/L时,愈伤组织诱导率最高。通过高效液相色谱法测定,紫苏叶片中迷迭香酸含量为0.25%,而在最佳培养基中培养40 d的愈伤组织中的含量为3.85%,有了显著的提高。研究为紫苏迷迭香酸高产细胞系的建立提供了理论依据。
2012, 31(6):580-586. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.004 CSTR:
摘要:用稀硫酸调节谷氨酸一钠(MSG)溶液pH使谷氨酸等电点结晶,模拟谷氨酸(L-Glu)发酵液等电结晶操作,研究外源添加L-苯丙氨酸(L-Phe)对谷氨酸结晶的影响。结果表明,实验范围内L-Phe的添加量对谷氨酸溶解度无影响,但在谷氨酸结晶过程中,L-Phe可以吸附到谷氨酸晶体表面并被包埋到晶体内部,从而能够抑制谷氨酸β型晶体的生长,同时对α型晶体的生长也有抑制作用,使α型晶体形态发生改变,晶体粒径随添加量的增加而减小。通过数学推导建立了结晶诱导时间与过饱和度之间的定量关系,在此基础上进一步研究了L-Phe添加量与谷氨酸结晶诱导时间的关系,结果表明L-苯丙氨酸的添加可以降低谷氨酸成核的固-液表面张力σ、成核自由能△G和临界成核半径r_c,同时降低了最大成核速率A,使得谷氨酸成核速率(J)随着L-Phe的添加量的增加而降低。
2012, 31(6):587-591. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.005 CSTR:
摘要:研究了在共培养体系中,产毒黄曲霉对米曲霉产蛋白酶、淀粉酶的影响及米曲霉对黄曲霉产黄曲霉毒素B1(AFB1)的影响,还分析了米曲霉降解AFB1的能力。结果发现黄曲霉对米曲霉产蛋白酶和α-淀粉酶有明显的抑制作用,而对β-淀粉酶的分泌无影响,培养10 d后,酸性蛋白酶活性、中性蛋白酶活性、碱性蛋白酶活性和α-淀粉酶活性分别降低了3.1、3.2、4.1和6.9倍;同时发现在整个培养过程中,米曲霉能有效抑制黄曲霉合成AFB1的能力,抑制率达75~90.91%,而对AFB1无降解作用。
2012, 31(6):592-598. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.006 CSTR:
摘要:在毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素-2融合蛋白(IL-2-HSA)过程中,诱导期甲醇浓度和pH值直接影响了IL-2-HSA表达量的高低和发酵过程的稳定。为了准确有效的控制这两个参数,本论文基于毕赤酵母诱导期的生理学特性和过程参数特征,提出了基于自联想神经网络的毕赤酵母表达IL-2-HSA过程的诱导期两阶段故障诊断。研究结果表明该诊断系统能够在线快速准确地诊断出毕赤酵母诱导期的各种故障。当系统提示出现故障时,离线分析,对比最优的pH值和甲醇质量浓度变化曲线,确定故障类型,采取相应措施。
2012, 31(6):599-605. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.007 CSTR:
摘要:建立了从重组菌中高效亲和制备胆固醇氧化酶的方法,将一种源自Brevibacterium sp.(DQ345780)的胆固醇氧化酶基因转入Escherichia co●BL21(DE3)表达,,选择核黄素-5’磷酸(FMN)及7-氯-异咯嗪作为亲和配体,构建胆固醇氧化酶亲和制备介质。通过两种介质的一步亲和吸附,获得纯度较高的胆固醇氧化酶样本,蛋白回收率分别为9.4%与9.9%(质量百分比),活性回收率分别为85.2%与93.4%(活性百分比)。使用SDS-PAGE分析,纯化得到蛋白分子量为约50 000,纯度分别为98.0%与97.5%(纯度百分比)。通过静态吸附分析,胆固醇氧化酶相对两种亲和介质的最大理论吸附值分别为71.0与78.5 mg/g介质;解离常数分别为12.8和7.3μg/g介质。
2012, 31(6):606-614. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.008 CSTR:
摘要:采用正交试验对从豆渣中提取可溶性膳食纤维(SDF)的工艺条件进行了优化,采用正交试验设计确定SDF的最佳提取工艺:酶解时间1.2 h,酶的添加质量分数为0.3%,酶解温度为45℃,pH值4.5。研究了SDF对杨梅汁稳定性的影响,在单因素试验的基础上,选取CMC-Na、黄原胶、果胶和SDF的添加量为自变量、沉淀率和△OD为响应值,利用响应面分析方法,模拟得到了二次多项式回归方程的预测模型,并确定了杨梅浊汁稳定剂的最佳配比:CMC-Na为0.056 2%,黄原胶为0.034%,果胶为0.06%,SDF为4.82%。
2012, 31(6):615-620. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.009 CSTR:
摘要:采用谷氨酰胺转胺酶(TGase)催化羊毛角蛋白发生交联反应,探讨了酶用量、成膜溶液的pH值、温度、处理时间对羊毛角蛋白膜抗拉强度及断裂伸长率的影响,并考察了酶促交联反应对羊毛角蛋白膜在水中稳定性的影响。借助电泳(SDS-PAGE)对TGase催化羊毛角蛋白交联反应引起蛋白质相对分子质量的变化进行表征。研究结果表明,TGase催化羊毛角蛋白发生交联反应提高了其成膜的抗拉强度和稳定性,降低了膜的断裂伸长率。较好的工艺条件为:酶用量30 U/g角蛋白,成膜pH值为7.5,温度40℃,时间18 h左右。SDS-PAGE结果表明,羊毛角蛋白在TGase的催化作用下发生共价交联形成了相对分子质量更大的蛋白聚合物。
高学清 , 汪何雅 , 钱和 , 夏荣光 , 张法良 , 赵晓联
2012, 31(6):621-627. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.010 CSTR:
摘要:比较葛根和葛花的解酒效果及葛根素剂量与解酒效果的相关性。先给小鼠灌胃葛根和葛花提取物,30 min后灌胃白酒(5.75g/kg·bw),观察醉酒小鼠的醒酒时间及ADH法测定小鼠血液乙醇含量变化,以探讨葛根和葛花对醉酒小鼠的影响。结果低、中剂量(2.5,7.5 g/kg·bw)的葛根水提物(PRW)和葛根醇提物(PRE)能显著缩短醉酒小鼠的醒酒时间(PRW:43.3%、48.7%;PRE:51.1%、53.6%),中剂量(7.5g/kg·bw)的葛花醇提物(PFE)能有效缩短小鼠睡眠时间(24.3%);中、高剂量(7.5,10 g/kg·bw)的PRW和PRE能有效抑制酒精的吸收,降低小鼠血液乙醇浓度,而高剂量的PFW和PFE对血乙醇浓度影响较小,与对照组相比仅在240min处有显著差异。结论葛根的解酒预防效果比葛花好,PRE优于PRW,且PR中的葛根素剂量与解酒效果呈现良好的正相关性。
徐晓燕 , 惠伟 , 关军锋 , 徐竹 , 张汉昌 , 杨米迪
2012, 31(6):628-633. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.011 CSTR:
摘要:研究了臭氧对冷藏条件下砀山酥梨采后生理以及贮期病害的影响。在冷藏(缓慢降温至(0±0.5℃)期间,每日用4 mg/m~3臭氧处理砀山酥梨3 h,定期测定了贮藏期相关生理指标和腐烂率,并进行了臭氧对砀山酥梨主要致腐菌梨青霉、梨褐腐、梨轮纹的离体和活体实验。臭氧处理可显著抑制砀山酥梨的呼吸强度,延缓可溶性固形物、可滴定酸以及丙二醛含量,有效降低果实的腐烂率,但对果实硬度没有显著影响;臭氧明显抑制引起砀山酥梨发生腐烂的青霉痛、褐腐病、以及轮纹病病原真菌孢子的萌发,抑制了接种病原菌在梨果实上的扩展。将臭氧用于砀山酥梨的贮藏,既可维持较高的贮藏品质,又可防治果实腐烂。
刘伟伟 , 孙秀兰 , 张银志 , 王进 , 樊惠良 , 陈文君
2012, 31(6):634-639. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.012 CSTR:
摘要:研究生物磁学的性质,从无锡太湖水域中分离到了一株沿着磁力线运动的微好氧细菌-趋磁细菌TH-1。尽管在其他淡水中曾经分离过到过趋磁细菌,但却从未在太湖中分离到过,因此TH-1是目前所见报道的第一株分离自太湖的趋磁细菌。采用透射电镜的方法对细菌进行了形态学观察,结果表明,每个细胞内含多个磁小体,呈圆形,直径范围在10~100 nm,分布在细胞质以及细胞壁前端。能谱结果显示,该菌磁小体的元素组成为铁(Fe)、硫(S)和氧(O)。还对该菌以及磁小体的磁性进行了分析并且对菌株做了初步的生化鉴定。结果表明,分离得到的菌株隶属于趋磁细菌。
2012, 31(6):640-646. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.013 CSTR:
摘要:研究了熟制配菜中主要原料的配比关系,即当胡萝卜10%、蒜苔17%、莴苣23%、千张5%、酱瓜10%、大豆油1.5%、食盐0.7%时,产品的感官评价最高。另外,还研究了乳酸链球菌素(Nisin)与山梨酸钾在熟制配菜中的复配抑菌作用,二者的复配可扩大抑菌范围,从而降低杀菌强度,减少风味物质的损失。结果表明,当Nisin、山梨酸钾的浓度分别为0.08、0.30g/kg时,杀菌条件为85℃、10 min,可有效抑制微生物的生长。
2012, 31(6):647-653. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.014 CSTR:
摘要:采用中性蛋白酶和氨肽酶复配酶解低值紫菜,体积分数60%乙醇沉淀去多糖,上清液为紫菜抗氧化多肽粗品,该粗品利用Sephadex G-10、DEAE-52和SOURCE 3RPC等色谱手段分离纯化,得到酶解紫菜抗氧化活性肽(ELAP)。当ELAP的质量浓度为100μg/mL时,其对超氧自由基、DPPH和羟自由基的清除率依次为23.25%,47.12%,47.12%,分别是同浓度下抗坏血酸(VC)的0.79,0.87,0.91倍,还原能力为VC的1.23倍,有很强的抗氧化性。ELAP经反相高效液相(RP-HPLC)分析型色谱测定其纯度达87.44%。超高效液相色谱-质谱法(Q-TOFMS)分析鉴定ELAP为一种6肽DGVGYG(Asp-Gly-Val-Gly-Tyr-Gly),其组成中Tyr与Gly本身就属于具抗氧化活性的氨基酸。
2012, 31(6):654-660. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.015 CSTR:
摘要:研究热处理和发酵两种处理方法对7种淡水鱼糜凝胶性质的影响。以青、草、鲢、鳙、鲤、鲫、鲂7种大宗淡水鱼为原料制备鱼糜,比较热处理和发酵两种处理方法制备的7种淡水鱼糜凝胶的凝胶强度、白度、折叠强度和持水性等。热处理鱼糜凝胶中,鲤鱼糜凝胶的破断强度、凝胶强度最高,分别为771.83 g、7 733.86 g·mm;鲫鱼糜凝胶的破断强度、凹陷深度、凝胶强度最低,为484.77 g、7.56 mm、3 667.38 g·mm;发酵鱼糜凝胶中,鲢鱼糜凝胶的破断强度、凹陷深度、凝胶强度最高,达到908.22 g、13.20 mm、11 995.08 g·mm;青鱼糜凝胶的凹陷深度、凝胶强度最低,为9.87 mm、6 690.96 gmm。不同鱼种类鱼糜凝胶的持水性、白度差异显著。与传统热处理鱼糜凝胶相比,发酵鱼糜凝胶具有更好的凝胶特性,其破断强度、凹陷深度、凝胶强度均有一定程度的提高,其中鲢鱼糜凝胶增加的比例最大,分别为64.88%、11.49%、83.37%。
2012, 31(6):661-666. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.016 CSTR:
摘要:试验对采片后的罗非鱼骨架(包括鱼头、鱼排和鱼鳍)进行加工,通过粉碎、配料调制、干燥、油炸等一系列工艺,生产出营养价值高且美味可口的香酥油炸骨片。针对骨泥熟化的几个关键工艺的参数进行了优化,通过单因素试验,确定糯米粉与玉米淀粉的适宜的复配比例为6:4;通过正交试验,确定干燥时间为50 min,油炸温度为180℃,油炸时间为50s为最佳工艺参数。
2012, 31(6):667-671. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.017 CSTR:
摘要:从苏芳花鲜花瓣提取分离花色素,研究其在体外的抗氧化性和抑菌性。结果表明:苏芳花花色素具有较强的还原性,能有效清除系统中的超氧阴离子和羟基自由基,且清除效果与色素浓度正相关。在苏芳花花色素浓度为0.48 mg/mL时,其还原力与0.1 mg/mL VC相当,而对超氧阴离子和羟基自由基的清除率则可分别达到59.3%和96.1%。苏芳花花色素能够显著抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球、枯草芽孢杆菌的生长。在色素浓度为0.48 mg/mL时,对3种菌的抑菌圈直径分别为9.46 mm、9.36 mm和8.14mm。苏芳花花色素具有较强的抗氧化性和抑菌性。
2012, 31(6):672. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2012.06.018 CSTR:
摘要:<正>微波食品是指应用现代加工技术,对食品原料采用科学的配比和组合,预先加工成适合微波炉加热或调制,便于食用的方便食品。微波食品加工简单化和方便化,适应现代人高效率、快节奏的生活方式。但是,由于微波加热本身所固有的缺点,使得速冻的预油炸食品在微波炉中复热时,产品表面"浸湿"、"浸油",失去了香酥松脆的良好口感。所以对可微波油炸食品的研制已成为传统食品工业化中的一个重要课题。
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