• 2013年第32卷第6期文章目次
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    • 纳米乳液包埋技术在功能性食品中的研究进展

      2013, 32(6):561-568. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.001 CSTR:

      摘要 (1198) HTML (0) PDF 901.70 K (2739) 评论 (0) 收藏

      摘要:纳米乳液包埋技术作为纳米科技的核心技术之一,在功能性食品组分(如:营养素、香精香料、着色剂、抗菌剂等)的运输载体构建方面显示出极大的潜力。本文立足于现阶段纳米乳液在应用于食品中存在的被包埋物的生物利用率及纳米颗粒的潜在生物毒性问题,综述了其产生的原因和影响因素,进一步明晰了纳米乳液技术的未来研究方向。

    • 3-氯-1,2-丙二醇对睾丸间质瘤细胞R2C生物活性的影响

      2013, 32(6):569-573. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.002 CSTR:

      摘要 (449) HTML (0) PDF 525.38 K (1649) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了探讨3-氯-1,2-丙二醇(3-Monochloropropane-1,2-diol,3-MCPD)对体外培养的大鼠睾丸间质瘤细胞R2C活性的影响,分别用0.5、1、2、4、6 mmol/L的3-MCPD刺激R2C细胞,利用MTT法得到3-MCPD对R2C细胞的IC25、IC50以及IC75。取以上3种不同浓度的3-MCPD作用细胞4 h和24 h,通过单细胞凝胶电泳法(Single Cell Gel Electrophoresis,SCGE)检测其作用4 h时对DNA损伤的程度;采用放射免疫法(Radio immunoassay,RIA)检测其作用4 h和24 h对孕酮合成的影响。结果显示:实验组与对照组相比,3-MCPD能抑制R2C细胞的增殖,其IC25、IC50和IC75分别为1.027、1.802、3.160 mmol/L;浓度为IC75的3-MCPD作用R2C细胞4 h后,对其DNA有损伤作用,且孕酮的合成量降低了16.0%;当3-MCPD各浓度组作用R2C细胞24 h后,与对照组相比孕酮合成量降低9.5%至61.2%。以上结果表明,3-MCPD能抑制R2C的活性,影响细胞孕酮的合成。

    • 啤酒酵母自溶液中的物质变化及酵母自溶评价指标探索

      2013, 32(6):574-580. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.003 CSTR:

      摘要 (679) HTML (0) PDF 692.19 K (2051) 评论 (0) 收藏

      摘要:以4株不同的啤酒酵母菌株为研究对象,比较其在模拟自溶条件下电镜细胞形态及溶液物质变化,寻找能够判定酵母自溶性能的较优评价指标。结果表明,α-氨基氮、甲醛氮、各种分子质量蛋白质和游离长链脂肪酸等指标虽然都随酵母自溶有一定的变化,但规律性不强,单一因素不适合作为判定酵母自溶的直接指标。随着酵母自溶性能和自溶程度的变化,(A260/A280)/死亡率呈现明显且一致的变化趋势,酵母自溶程度越大,该比值越小。该指标综合性好、灵敏度高、耗时少、操作简单,能够及时反映不同菌株自溶性能的差异,以及同一株菌在不同阶段的自溶情况,是较好的酵母自溶评价指标。

    • 茭白总蛋白质双向电泳技术体系的建立

      2013, 32(6):581-585. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.004 CSTR:

      摘要 (449) HTML (0) PDF 498.54 K (1568) 评论 (0) 收藏

      摘要:为建立茭白总蛋白质双向电泳技术体系,研究了TCA/丙酮沉淀法和改良酚抽法两种不同总蛋白质提取方法、蛋白质上样量、pH值范围及凝胶质量浓度等条件对2-DE的影响。结果表明,改良酚抽法更适合茭白总蛋白质的提取,采用17 cm、pH 4~7的胶条、1.0 mg的蛋白质上样量、12 g/dL的凝胶浓度、考马斯亮蓝G-250胶体考染法染色,最终可获得蛋白质点较多,背景清晰,分辨率较高的2-DE图谱,为进一步开展茭白差异蛋白质组学研究奠定了基础。

    • 不同产地苹果贮藏酸度预测模型

      2013, 32(6):586-590. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.005 CSTR:

      摘要 (440) HTML (0) PDF 631.97 K (1557) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了研究不同产地苹果贮藏期内酸度变化情况并对酸度进行预测,采用了计算机断层扫描(CT)技术对苹果进行了无损检测,并通过二次拟合建立预测模型。试验结果探明了苹果贮藏期内酸度的变化情况,建立了不同产地苹果酸度和CT值的响应曲面模型以及综合的酸度预测模型。验证试验结果表明,预测模型的平均误差率为12.14%,模型表现出了良好的预测效果。

    • Ce3+对厌氧产氢性能影响

      2013, 32(6):591-595. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.006 CSTR:

      摘要 (400) HTML (0) PDF 463.18 K (1689) 评论 (0) 收藏

      摘要:研究添加稀土元素Ce3+对废水产氢的影响。结果表明,稀土元素对产氢具有hormesis效应,添加Ce3+质量浓度为0.1 mg/L时,产氢量最大,为123.2 mL/g,是对照的120.3%。反应结束后,添加0.1、0.05 mg/L组的VFA量较大,分别为4 511.8、4 420.3 mg/L,是对照的1.49和1.46倍。各组分的葡萄糖利用率在76.2%~92.1%。脱氢酶活呈现先增加后降低趋势,添加0.1 mg/L组最大酶活为5 042.3μg/(g·h),是对照的110.0%。

    • 氯化钠对餐厨垃圾厌氧发酵产沼气影响

      2013, 32(6):596-602. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.007 CSTR:

      摘要 (452) HTML (0) PDF 634.88 K (1160) 评论 (0) 收藏

      摘要:通过在餐厨垃圾发酵过程中添加不同质量浓度的氯化钠,分析厌氧消化过程中产气量、中间代谢产物、酶活等指标,考察氯化钠对厌氧消化产沼气的影响。结果表明,添加低质量浓度氯化钠对产沼气量影响不大,而添加高质量浓度氯化钠则对产气有较大的抑制作用,添加2 g/L氯化钠对餐厨垃圾厌氧发酵产沼气没有影响,添加5 g/L氯化钠产气量比对照提高7.5%,添加10、20、30 g/L产气量分别比对照减少17%、24%、51%。对不同氯化钠质量浓度下产气的情况进行了动力学拟合,结果表明:添加5 g/L氯化钠时,产甲烷过程与Cheynoweth方程的相关系数R2为0.991,甲烷产量B0为399 mL/g,反应速率常数k为0.114 d-1。高浓度氯化钠影响厌氧代谢过程使得丙酸和总有机酸累积。添加20、30 g/L氯化钠下脱氢酶活性受到严重抑制,添加氯化钠浓度10、20、30 g/L氢酶失活15%、55%、60%。

    • 变幻青霉氨基甲酸乙酯降解酶产酶条件优化及酶的底物特异性

      2013, 32(6):603-607. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.008 CSTR:

      摘要 (430) HTML (0) PDF 479.19 K (1454) 评论 (0) 收藏

      摘要:在单因素优化基础上,运用正交试验设计理论,优化氨基甲酸乙酯降解酶产生菌P.variabile JN-A525的产酶条件。优化发酵培养基配方为:葡萄糖20 g/L,牛肉膏10 g/L,KH2PO45g/L、NaCl 1 g/L、KCl 5 g/L;发酵条件为:初始pH 6.0、培养温度32℃、接种体积分数3%、250 mL摇瓶装量70 mL、摇床转速100 r/min,在此优化条件下酶活比优化前提高了3.47倍。对经超声破碎、(Na)2SO4盐析、Superdex G-75凝胶过滤层析步骤初步纯化的酶之底物特异性的研究表明,在模拟黄酒体系下,该酶对尿素和氨基甲酸乙酯有相对强的降解作用,对一些酯类和氨基酸没有降解作用。

    • 硫辛酸对高脂日粮小鼠脂代谢紊乱及氧化应激的调节作用

      2013, 32(6):608-614. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.009 CSTR:

      摘要 (639) HTML (0) PDF 630.86 K (1603) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了研究硫辛酸(lipoic acid,LA)对高脂日粮小鼠体内氧化应激、脂类代谢及相关基因表达的影响。采用40只C57BL/6雄性小鼠,随机分为4组:对照组(正常日粮),高脂组(高脂日粮,含20%脂肪),LA组(高脂饲料分别添加0.05%、0.10%LA)。6周后测定小鼠血脂及血浆脂酶水平,全血、消化道及肝脏组织自由基(ROS)水平及肝脏抗氧化酶活性,并采用RT-PCR检测小鼠肝脏Cpt1a及ApoE的表达。结果表明,高脂日粮导致小鼠血脂显著升高、血浆脂蛋白脂酶(LPL)及肝脂酶(HL)活性显著降低(P<0.05);添加0.10%LA可显著降低血脂并提高LPL、HL的活性(P<0.05)。与正常组相比,高脂组血浆和组织中抗氧化相关酶活性显著降低,ROS和丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05),造成慢性氧化应激;添加LA可显著缓解氧化应激,0.10%LA可使其基本恢复到正常水平。高脂饮食导致小鼠肝脏Cpt1a表达显著下调,ApoE表达显著上调(P<0.05),而添加LA可显著缓解高脂造成的上述基因表达的变化。因此,高脂日粮会导致小鼠体内氧化还原状态失衡,造成脂代谢紊乱,LA可通过清除自由基、调整氧化还原状态,改善小鼠肝脏脂代谢功能。

    • 黑曲霉中葡萄糖氧化酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

      2013, 32(6):615-621. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.010 CSTR:

      摘要 (714) HTML (0) PDF 713.68 K (1612) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了提高葡萄糖氧化酶的生产能力,提取和纯化了黑曲霉Aspergillus niger PCTC的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增获得葡萄糖氧化酶基因,经测序,所得基因全长1 772 bp,编码含有589个氨基酸的蛋白质。将目的基因和表达载体pPIC9K连接经电转化导入毕赤酵母GS115中,在甲醇诱导和α信号肽的转运下,将葡萄糖氧化酶分泌到胞外。经G418梯度抗性平板和显色平板的初筛以及摇床复筛,获得了一株产葡萄糖氧化酶活力较高的菌株,该株菌在30℃、180 r/min的培养条件下,经0.5%的甲醇诱导发酵4 d可获得0.342 U/mL的酶活。对该菌株进行了摇瓶产酶条件优化,其最佳发酵条件为:200 r/min、pH 5、接种体积分数50%、25℃下经1.5%甲醇诱导7 d,酶活达到25 U/mL。实验结果表明:葡萄糖氧化酶基因已经成功转入毕赤酵母,并获得相当的产量。

    • 丁二酸酐修饰对枯草芽孢杆菌氨肽酶结构及酶学特性的影响

      2013, 32(6):622-627. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.011 CSTR:

      摘要 (396) HTML (0) PDF 607.90 K (1735) 评论 (0) 收藏

      摘要:采用丁二酸酐(SA)对经硫酸铵盐析和截留相对分子质量30 000的超滤膜分离提取后的氨肽酶(AE)在优化条件下进行化学修饰,SA对AE的平均氨基修饰率为55.86%,酶活保留率为105.81%;修饰后的氨肽酶紫外吸收光谱发生一定红移,圆二色谱分析其二级结构中无规卷曲比例有一定的增加,α螺旋、β折叠以及β转角的含量有所下降,说明修饰后的氨肽酶空间构象有一定改变;修饰后的氨肽酶,70℃保温5 h后仍然能保留70%以上的活性,与修饰前同等条件下酶活残留35%相比,其热稳定性显著提高。修饰后的氨肽酶动力学参数Km从1.0 mmol/L降低到0.75 mmol/L,表明其对底物的亲和力有明显的提高。此外,修饰后的氨肽酶最适温度和最适pH值也有一定的变化。结果表明SA化学修饰是一种可明显提高枯草芽孢杆菌氨肽酶与底物的亲和力及其热稳定性的有效方法。

    • 链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠轮廓状乳头中味蕾特征变化

      2013, 32(6):628-632. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.012 CSTR:

      摘要 (691) HTML (0) PDF 685.56 K (1042) 评论 (0) 收藏

      摘要:以ICR小鼠为实验对象,注射180 mg/kg剂量链脲佐菌素构建糖尿病小鼠模型,利用苏木精-伊红染色法及免疫组织化学方法分析了糖尿病小鼠味蕾形态变化和味觉信号转导相关蛋白表达变化。结果表明,对照组小鼠与糖尿病组小鼠轮廓状乳头大小及数量无显著差异;但糖尿病小鼠单个味蕾中味觉信号转导蛋白α-gustducin及磷酸脂酶Cβ2的阳性细胞数显著增加(P<0.05),而synaptobrevin-25(SNAP-25)阳性细胞显著减少(P<0.05)。综上所述,糖尿病引起的味觉变化可能来自于味信号转导蛋白表达的变化,而这些变化导致外周味觉感受信号无法有效地传导到味觉传入神经。

    • 大豆皂苷对四氯化碳致肝损伤小鼠肝脏氧化应激的干预作用

      2013, 32(6):633-638. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.013 CSTR:

      摘要 (416) HTML (0) PDF 528.89 K (2000) 评论 (0) 收藏

      摘要:研究大豆皂苷对四氯化碳(CCl4)所致急性肝损伤小鼠肝脏氧化应激的干预作用。将实验小鼠按体重随机分为5组,即正常对照组、模型对照组、水飞蓟素组(阳性对照组)及大豆皂苷高、低剂量组。每日给药1次,连续7 d。实验末期,除正常对照组外,其余组小鼠腹腔注射CCl4建立急性肝损伤模型,比色法检测血清白蛋白(Alb)含量、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性以及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。结果显示,大豆皂苷明显增高CCl4致急性肝损伤小鼠血清Alb水平,降低血清ALT、AST和ALP活性;升高肝组织总SOD、CAT和GPx活性,提高肝GSH水平,降低肝MDA水平;升高肝线粒体Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase和Mn-SOD活性,降低肝线粒体MDA含量。这说明大豆皂苷可降低CCl4致急性肝损伤小鼠肝脏氧化应激,对肝损伤具有保护作用。

    • 泡菜中乳杆菌的快速检出和乳杆菌质粒资源的初步调查

      2013, 32(6):639-644. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.014 CSTR:

      摘要 (492) HTML (0) PDF 558.00 K (1651) 评论 (0) 收藏

      摘要:乳杆菌(Lactobacillus)的质粒不仅决定了乳杆菌的某些性状,还应用于乳杆菌克隆表达载体的构建,是一种珍贵的遗传信息资源。为了调查中国泡菜中的乳杆菌质粒资源,采集了52份中国泡菜样品,采用乳杆菌PCR快速检出技术检出其中的乳杆菌,并用16s rDNA测序验证检出结果,然后提取检出乳杆菌菌株的质粒。结果检出1株清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)和18株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),乳杆菌检出率为36.5%。检出含质粒的乳杆菌菌株11株,琼脂糖电泳显示有9种质粒谱型,乳杆菌质粒检出率为21.2%,质粒谱型检出率为17.3%。调查结果提示,中国泡菜中蕴藏丰富的乳杆菌质粒资源,值得进行更大规模的调查和研究。

    • 产β-1,3-1,4-葡聚糖酶特基拉芽孢杆菌Bacillus tequilensis CGX5-1发酵培养基的优化

      2013, 32(6):645-650. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.015 CSTR:

      摘要 (517) HTML (0) PDF 555.41 K (1645) 评论 (0) 收藏

      摘要:采用响应面优化法对一株野生特基拉芽孢杆菌的发酵培养基进行优化,最终培养基各组分为:大麦粉68.4 g/L,玉米粉40 g/L,豆饼粉61.1 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO4·7H2O 0.1 g/L,CaCl20.1 g/L。用优化培养基在37℃摇瓶发酵52 h,β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶活达到191.96 U/mL,是优化前产酶水平的1.91倍。

    • 生物吸附剂壳聚糖对刚果红的吸附

      2013, 32(6):651-655. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.016 CSTR:

      摘要 (688) HTML (0) PDF 554.15 K (1802) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了确定生物吸附剂壳聚糖对刚果红的吸附行为特征,研究了pH值、初始浓度、时间及温度对刚果红在壳聚糖上吸附的影响。结果表明,pH值是影响壳聚糖吸附刚果红的重要因素,最佳pH值范围为4~7;动力学行为符合Lagergren准二级反应动力学模型,随着温度增加,平衡吸附量减少。吸附过程的表观活化能(Ea)为4.941 kJ/mol。壳聚糖对刚果红的吸附过程较好地符合Freundlich吸附等温方程。计算得到吸附过程的热力学参数△Go和△Ho分别为-10.10 kJ/mol(303 K)和-87.36 kJ/mol,表明壳聚糖对刚果红的吸附是一个自发的放热过程。红外光谱分析可知,壳聚糖吸附刚果红的过程中,壳聚糖分子中存在的大量羟基和氨基发挥了主要作用。

    • 动物食品中去甲基睾丸酮的纳米增强酶联免疫分析方法

      2013, 32(6):656-660. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.017 CSTR:

      摘要 (581) HTML (0) PDF 480.52 K (988) 评论 (0) 收藏

      摘要:作者通过辣根过氧化物酶标记抗体(HRP-IgG)蛋白分子固定在金纳米粒子(GNP)表面的方法,制备得到一种高活性的酶-金纳米复合物(HRP-IgG-GNP)。将该HRP-IgG-GNP应用于酶联免疫分析(ELISA)方法中,针对去甲基睾酮(NT),建立了一种高灵敏的纳米增强ELISA方法。该方法的检测灵敏度达到0.01 ng/mL,线性范围为0.03~10 ng/mL。与传统ELISA方法相比,该方法的灵敏度提高了10倍。该纳米增强ELISA方法有望开发高灵敏免疫分析方法中获得广泛应用。

    • 保护剂对胆固醇氧化酶稳定性机理的研究

      2013, 32(6):661-666. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.018 CSTR:

      摘要 (501) HTML (0) PDF 686.14 K (1722) 评论 (0) 收藏

      摘要:利用荧光光谱、圆二色性光谱及凝胶电泳等方法,研究液态胆固醇氧化酶失活机理。根据失活机理,选择添加两种不同保护剂提高酶稳定性,研究提高酶稳定性的机理。37℃下,添加15%甘油的液态酶稳定性较佳,45 h后酶活保留率提高58%,核黄素对酶基本无保护作用。经研究分析,甘油主要通过有效抑制分子间聚集,维持二级结构,增强酶稳定性;核黄素不能抑制酶自身聚集,对酶保护作用不明显。

    • 啤酒发酵过程中影响蛋白酶A分泌的因素

      2013, 32(6):667-671. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2013.06.019 CSTR:

      摘要 (502) HTML (0) PDF 441.64 K (1652) 评论 (0) 收藏

      摘要:纯生啤酒中残存的蛋白酶A严重影响泡沫稳定性,制约了纯生啤酒的质量提升。为了探索啤酒发酵过程中影响蛋白酶A分泌的因素,作者分别考察了菌种、酵母生理状态、酵母代数、麦汁浓度、发酵时间等对蛋白酶A分泌的影响。结果发现,蛋白酶A分泌量高的菌株,处于稳定期之后的酵母、较高的酵母代数、较高的原麦汁浓度和在发酵阶段末期都会导致发酵液中蛋白酶A活性偏高。建议在实际生产中,采用蛋白酶A分泌量少的菌种、调整酵母生理状态、使用小于3代的酵母、采用18°P以下的麦汁发酵和尽早结束发酵都会对降低蛋白酶A的分泌量起到积极作用。

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