2014, 33(11):1121-1128. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.001 CSTR:
摘要:热风微波耦合干燥(简称耦合干燥)是微波与热风同时作用于干燥物料的新型干燥方法和技术, 但微波加热不均匀性是制约其发展的一个主要因素。作者综述了国内外耦合干燥及其实验设备研究现状, 分析了其工业化的主要问题, 提出了解决微波均匀性的主要技术方案, 探索了工业化耦合干燥器的结构。
2014, 33(11):1129-1135. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.002 CSTR:
摘要:将D-阿洛酮糖3-差向异构酶(DPE)基因利用PCR进行扩增, 与枯草芽孢杆菌载体pMA5连接, 构建重组质粒pMA5-cbdpe。重组质粒转入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB800感受态细胞, 利用卡那霉素筛选和PCR鉴定, 获得一株DPE重组枯草芽孢杆菌菌株。该重组菌株无需诱导即可产生DPE酶, 18 h时酶活可达6.8 U/mL。该酶最适pH为7.0, 最适温度为55 ℃, 与大肠杆菌表达的DPE酶酶学性质相似。结果表明, DPE酶可在枯草芽孢杆菌中表达。
2014, 33(11):1136-1141. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.003 CSTR:
摘要:为进一步阐述α淀粉酶抑制淀粉回生的机理, 作者采用广角X射线衍射法(WXRD)和差示扫描量热法(DSC)表征极限糊精对小麦淀粉回生的影响。WXRD结果显示, 小麦淀粉中加入10%的F75和F88极限糊精组分, 回生样品的相对结晶度分别为3.09%和2.74%, 均小于不加极限糊精的相对结晶度(3.28%)。DSC结果也表明, 极限糊精组分F75和F88均可降低小麦淀粉的回生焓值。用Avrami方程拟合小麦淀粉结晶动力学, 小麦淀粉的重结晶生长为一次成核(n<1), 添加极限糊精后, 结晶速率常数k降低, 表明小麦淀粉的成核速度降低, 淀粉回生受到抑制。此外, 还采用分子动力学模拟的方法预测极限糊精影响淀粉片段回生过程。结果表明, 极限糊精与淀粉片段间经非共价作用阻碍淀粉链靠近形成有序化结构。
侯颖 , 储敏 , 蔡燕飞 , 杜芳芳 , 王晓敏 , 陈蕴 , 金坚
2014, 33(11):1142-1147. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.004 CSTR:
摘要:观察重组人ADAM15去整合素区域蛋白(记做rhddADAM15)干预HeLa细胞在体内外的增殖及迁移效应, 初步鉴定了其作用的相关通路, 为研究其作用机制提供基础。利用SRB法及划痕法测得rhddADAM15对HeLa体外的增殖及迁移均有明显的抑制作用, IC50分别为2.44、1.60μmol/L, 当其浓度低于8 μmol/L时, 细胞增殖及迁移抑制率与蛋白质浓度呈剂量依赖关系; 利用瞬时转染法在HeLa细胞内过表达rhddADAM15, 致使HeLa细胞的迁移能力下降, 细胞周期出现S期阻滞, 阻滞率约为5%; SRB法表明, MAPK通路激动剂EGF可以逆转rhddADAM抑制HeLa细胞增殖的效应; 利用斑马鱼肿瘤移植模型, 观察得到rhddADAM15对斑马鱼体内HeLa细胞生长及转移均有明显的抑制作用。以上结果表明, rhddADAM15可抑制HeLa细胞体内外的增殖及迁移, 这种抑制作用与MAPK信号通路密切相关, 作用靶点在细胞外及细胞内均有分布。
2014, 33(11):1148-1153. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.005 CSTR:
摘要:玉米秸秆经球磨预处理后物理空间结构和化学物质结构改变, 更容易被相应的酶降解, 进而被微生物利用, 其饲用品质提高, 从而可能替代饲料中的部分粮食。研究表明, 球磨预处理后的玉米秸秆粒径大小均匀, 约90%的颗粒集中在10~100 μm, 酸性洗涤纤维下降3.5%, 可溶性总糖提高2.0倍, 对其单糖组成分析发现:可溶性总糖的增加主要来自半纤维素和纤维素的分子断裂。用木聚糖酶和纤维素酶酶解球磨预处理后的玉米秸秆, 可溶性总糖和还原糖含量比酶解前分别提高了3.3倍和9.7倍, 球磨预处理后酶解效率大大提高。球磨预处理的玉米秸秆经固态酶解、发酵后, 总酸质量分数达26.3 mg/g, 纤维素和半纤维素质量分数分别下降9.1%和4.9%, 乳酸菌含量达到1.5×109 CFU/g, 饲用品质显著提高。
2014, 33(11):1154-1159. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.006 CSTR:
摘要:采用漂烫和3%盐水浸渍预处理, 研究真空冷冻干燥、高真空干燥和真空微波干燥3种不同的干燥方式对玉米干燥品质的影响。通过对硬度、脆度、色泽和感官评分等指标的综合分析, 表明2种预处理方式均能改善甜玉米粒干燥品质, 对高真空干燥影响最显著, 其中浸渍预处理产品的品质优于漂烫预处理, 但延长了干燥时间。
2014, 33(11):1160-1167. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.007 CSTR:
摘要:构建了一种荧光共振能量转移生物传感系统检测四环素的方法。以KGdF4:Tb3+纳米粒子为荧光能量供体, 氧化石墨烯为荧光能量受体, 基于氧化石墨烯对单链DNA的π-π共轭作用, 使得适配体功能化的KGdF4:Tb3+纳米粒子与氧化石墨烯足够靠近, 从而发生荧光共振能量转移, KGdF4:Tb3+纳米粒子的荧光被淬灭。当体系中存在四环素时, 四环素优先与其适配体特异结合形成复合物, 与氧化石墨烯结合能力减弱, 使得KGdF4:Tb3+纳米粒子的荧光淬灭程度降低, 据此可实现对四环素的定量检测。该方法在四环素质量浓度0.5~100 ng/mL范围内与体系荧光强度呈现良好的线性关系(R2=0.993), 最低检出限为0.25 ng/mL。该方法特异性好, 灵敏度高, 已成功应用于实际样品中四环素的测定。
2014, 33(11):1168-1175. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.008 CSTR:
摘要:在丙酮丁醇发酵的产酸期和产溶剂期两阶段, 向葡萄糖质量浓度固定的培养基中添加不同质量浓度酵母浸粉, 比较了不同碳氮比培养下的丙丁梭菌在相应阶段产气、耗糖、产有机酸、发酵相转型和产溶剂等发酵性能的差异。结果表明, 在产酸期, 适中的碳氮比(46.7~93.4 mol/mol)能够保证菌体以正常速度生长, 不至于过分刺激或是抑制有机酸的合成, 使发酵顺利完成相转型, 有利于缩短发酵周期; 在产溶剂期, 较高的碳氮比(93.4~186.7 mol/mol)可以有效抑制副产物溶剂丙酮和乙醇的积累, 且保持丁醇产量达到12 g/L以上, 从而获得较高的丁醇/总溶剂比例。继而再利用玉米粉、木薯粉和豆饼粉3种含碳氮比差异较大的生物质原料进行丙酮丁醇发酵, 验证了上述关于原料碳氮比对丁醇发酵各阶段发酵性能影响效应的结论。
尤燕莉 , 陈海英 , 黄忠海 , 杨哪 , 惠元 , 徐学明
2014, 33(11):1176-1181. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.009 CSTR:
摘要:采用75~85 ℃的热磨法粗磨豆浆30 min, 再经胶体磨循环处理20次, 使冰淇淋浆料粒径在100 μm左右, 口感细腻, 同时有效去除豆腥味。通过测定浆料粘度、冰淇淋膨胀率、融化率和硬度以及产品的感官品质等指标, 考察了不同全大豆替代比对冰淇淋品质的影响。结果表明, 当全大豆替代奶粉的比例达到30%时, 可使棕榈油添加量由全奶粉对照组的8%降至4%~6%, 冰淇淋的膨胀率和融化率分别为60.58%和48.40%, 与全奶粉冰淇淋相比, 膨胀率变化不显著(60.37%), 但抗融性得到显著改善(65.76%)。此外, 双蛋白冰淇淋的粘度和硬度均大于全奶粉冰淇淋, 分别为400 mPa·s和2 440.76 g, 组织状态更紧密, 冰晶较少, 且豆香与奶香相辅相成, 是一款品质优良、营养均衡、成本低廉的全新产品。
2014, 33(11):1182-1190. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.010 CSTR:
摘要:利用甲醇营养型毕赤酵母发酵生产外源蛋白过程中, 诱导期培养基中甲醇浓度波动严重影响发酵过程的稳定性。为此提出了基于智能型模式识别的发酵故障诊断系统。在某一时间窗口内, 利用支持向量机分类器对可在线测量的过程参数(发酵时间、搅拌转速、甲醇流加速率、O2消耗速率OUR、CO2释放速率CER)进行状态分类, 并结合模糊推理技术将发酵状态划分成甲醇浓度"适中"、"过量"、"匮乏"的3种模式, 构建智能型的故障诊断系统。在甲醇浓度不当的情况下, 该系统均能准确地判别出故障类型。通过补加甲醇或甘油, 可以对"错误"发酵批次进行补救。
2014, 33(11):1191-1195. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.011 CSTR:
摘要:为了解除高浓度L-丝氨酸对3-磷酸甘油酸脱氢酶的反馈抑制, 进一步提高L-丝氨酸的产量, 以一株能直接利用糖质原料发酵生产L-丝氨酸的谷氨酸棒杆菌SYPS-062-36 为出发菌, 经硫酸二乙酯逐级诱变处理, 在D-丝氨酸抗性梯度平板上挑取正突变株, 获得一株遗传性能稳定的高产菌株SYPS-062-33a-18, 其可积累L-丝氨酸(11.0±0.25) g/L, 较出发菌L-丝氨酸产量(6.65±0.23) g/L提高了65.4%。说明本研究不仅以D-丝氨酸作为抗性平板筛选得到高产L-丝氨酸的突变株, 而且为下一步进行反向代谢工程的研究提供了良好的实验材料。
2014, 33(11):1196-1203. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.012 CSTR:
摘要:以纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)SoF5-76为诱变出发菌株, 经紫外(UV)和亚硝基胍(NTG)复合诱变和筛选, 获得一株高产突变菌株SoF5-H23, 其发酵产埃博霉素B的量可达79.83 mg/L, 比出发菌株提高了1.27倍。通过Plackett-Burman实验和响应面分析法对纤维堆囊菌产埃博霉素B的发酵工艺进行优化。得到最佳发酵工艺为:马铃薯淀粉4.8 g/L, 葡萄糖0.5 g/L, 脱脂奶粉2.3 g/L, 豆饼粉2 g/L, 七水硫酸镁2 g/L, 无水氯化钙2 g/L, EDTA-Fe3+ 2 mL/L, 微量元素(TE)0.5 mL/L, 吸附树脂2%, 培养基初始pH 7.4, 装液量50 mL, 接种体积分数8%, 温度30 ℃。在此最优条件下埃博霉素B产量为 108.67 mg/L, 比优化前提高了36.13%, 此产量是国内外报道的埃博霉素最高产量。
2014, 33(11):1204-1209. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.013 CSTR:
摘要:从粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)中扩增得到马来酸顺反异构酶基因。将该基因连接到pET24a载体上, 并在Escherichia coli BL21(DE3)中实现了成功表达。酶学性质研究表明, 重组酶的比酶活力为48.01 U/mg。其最适温度为37 ℃, 最适pH为8.4。在最适反应条件下, Km值为4.20 mmol/L, Vmax为1.27 mmol/(L·min), kcat为4.38 s-1, 催化效率kcat/Km为1.04 L/(mmol·s)。研究结果进一步显示, 马来酸顺反异构酶具备良好的热稳定性(55 ℃半衰期为1.5 h)及高达99%以上的转化率, 为马来酸顺反异构酶的进一步研究和工业应用制备高纯度的富马酸提供了理论基础和支持。
2014, 33(11):1210-1215. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.014 CSTR:
摘要:以外观、营养成分、复水性及超微结构为指标, 比较4种不同的干燥方式对铁棍山药品质的影响。冻干(FD)对铁棍山药品质的保留最好, 冻干真空微波联合干燥(FD-MVD)对产品品质的保留接近于FD, 且能够使干燥时间缩短31%。微波真空干燥时间最短, 但品质不如前两种干燥方式。热风干燥(AD)对感官品质和维生素C破坏较多, 但对于多糖含量的保持与其它方法无异。超微结构的结果表明, MVD和AD对结构破坏较多, 而FD和FD-MVD很好的保持了原有的细胞结构。
2014, 33(11):1216-1221. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.015 CSTR:
摘要:通过体外细胞培养对"灵巴菌质"(巴豆发酵品)的石油醚部位和碱性醇提物的抗肿瘤活性进行初步筛选。对"灵巴菌质"以石油醚、二氯甲烷、水饱和正丁醇和甲醇四个极性梯度依次进行抽提, 得到石油醚部位(PEE)等4个提取部位; 甲醇提取物再采用酸溶碱沉-溶剂萃取等方法处理, 得到其碱性醇提物(AME)。通过快速、灵敏的MTT比色法考察石油醚部位和碱性醇提物对SMMC-7721、MGC-803、A549、HepG-2肿瘤细胞增殖的影响。PEE、AME与巴豆苷(Cro)一样, 对A549细胞增殖均有显著抑制作用, 且呈浓度依赖性; 而二者对MGC-803细胞活力没有明显影响。在一定浓度范围内, AME仅对SMMC-7721细胞增殖有抑制作用; PEE和AME对HepG-2细胞增殖却有促进作用。"灵巴菌质"的石油醚部位和碱性醇提物对SMMC-7721、MGC-803、A549、HepG-2等4种瘤株增殖的影响是有一定选择性的, 二者仅对A549细胞生长均呈现出明显的抑制作用。
2014, 33(11):1222-1227. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.016 CSTR:
摘要:对分离自内蒙古家庭传统发酵乳制品中的14株乳杆菌进行体外筛选。结果表明, 试验菌株均有降解MRS-CHOL培养基中胆固醇的能力, 对胆固醇的去除率在6.84%~42.97%。其中N59-1试验菌株对胆固醇的去除率为42.97%(P<0.05)。经生理生化特性和16S rDNA部分序列分析, 菌株N59-1与标准菌株L.plantarum的同源性为99.7%, N59-1可被判定为L.plantarum。30 d喂养试验结果表明, 各组小鼠的组织生长发育及血液理化指标等与对照组相比无显著差异(P>0.05)。
2014, 33(11):1228-1231. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.11.017 CSTR:
摘要:为了实现环磷腺苷的发酵生产, 对一株枯草芽孢杆菌 Bacillus. subtilis jsim-1277在摇瓶、自控罐、20 M3发酵罐上的发酵条件进行了试验。结果表明, 最适宜发酵条件是pH 6.7, 且添加K2HPO4 1.0 g/dL, NaF 0.05 g/dL; 在摇瓶、自控罐、大型发酵罐产苷分别为7.17、6.01、7.10 g/L。
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