2014, 33(3):235-240. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.002 CSTR:
摘要:利用双向电泳技术分离酿酒酵母全蛋白质,并比较了不同样品制备方法、不同凝胶参数,以及不同染色方法对电泳结果的影响。经过各个环节的条件优化,最终获得了无明显横纵条纹,背景清晰,分辨率较高,重复性较好的酿酒酵母全蛋白质双向电泳图谱。经PD-Quest软件分析,所得图谱约分离到1 000个蛋白质点,该双向电泳图谱的构建为后续氮代谢研究奠定了基础。
2014, 33(3):241-247. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.003 CSTR:
摘要:以卵白蛋白为原料,采用胃蛋白酶和胰蛋白酶复合水解,对其水解产物进行体外抑菌试验,并利用A咬KTA蛋白纯化系统、透析及RP-HPLC分离得到2个具有抗菌活性的组分F21和F22。考察了2种组分对大肠杆菌细胞膜渗透性和细胞膜完整性的影响,及其DPPH·自由基清除能力。50μg/mL的F21和F22组分对大肠杆菌分别具有84.6%和22.5%的抑菌率,对金黄色葡萄球菌分别具有53.3%和29.6%的抑菌率。半乳糖苷酶释放法和流式细胞仪分析结果表明,2种产物均能破坏大肠杆菌细胞膜渗透性和细胞膜完整性。此外,F21和F22组分均具有抗氧化能力,能有效清除DPPH·自由基,当质量浓度为2.0 mg/mL时,两者DPPH·清除率接近于1.0mg/mL GSH的DPPH·清除效果。卵白蛋白水解产物可作为抗菌剂和抗氧化剂加以深度开发利用。
王保全 , 平娟 , 张永州 , 黄继海 , 李昭华 , 董先智 , 庞晓斌 , 李梅基
2014, 33(3):248-254. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.004 CSTR:
摘要:首先利用不同相对分子质量聚丙烯酸钠从动物血液中分离纯化出超氧化物歧化酶(SOD),探索不同相对分子质量聚丙烯酸钠对SOD提取酶活性的影响。鉴于离子交换层析和凝胶过滤层析纯化时所用材料较昂贵,探索出一条适合工业化大规模生产的纯化方法。利用壳聚糖、亚氨基二乙酸(IDA)和环氧氯丙烷等材料合成一种新填料,根据亲和层析原理去除杂蛋白质,获得电泳纯级超氧化物歧化酶,使酶活性进一步提高,并和离子交换层析和凝胶过滤层析方法相对照,以期自制填料能代替Sephedex,DEAE-sepherose-fast flow等传统昂贵填料,以适合工业化生产。结果显示,低相对分子质量聚丙烯酸钠在血液SOD提纯工艺中更为适用,超滤后的粗酶液经离子交换层析、凝胶过滤层析和壳聚糖亲和层析纯化后经SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳后呈明显的单一条带,单亚基分子量16 kD,比活力达5 585 U/mg和6 148 U/mg,4 739 U/mg;产品得率分别为18.1%和13.7%,15.5%;纯化后活性回收率分别为61.2%,50.8%,42.6%。表明壳聚糖亲和层析方法在新工艺后续纯化工艺中有望代替Sephedex DEAEsepherose-fast flow为基础的传统纯化方法,适合工业化大规模生产。
2014, 33(3):255-260. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.005 CSTR:
摘要:通过给仔猪喂食微生态制剂,研究微生态制剂对仔猪生长性能、粪便pH值及肠道定植情况和肠道菌群的影响。结果表明,饲喂微生态制剂8周后,益生菌可以有效地定植在仔猪肠道内,并能够增加断奶仔猪的日增质量,降低料质量比和腹泻率。并且对仔猪生长性能的影响有时间效应,在断奶初期效果最佳;可以保持仔猪消化道的偏酸性环境,有利于益生菌的生长;还可以增加肠道中有益菌的数量,抑制有害菌的生长。
2014, 33(3):261-267. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.006 CSTR:
摘要:唾液酸化路易斯-X(sialyl lewis x,Slex)是选择素家族的一个共同糖配体,通过与选择素竞争性地结合炎性细胞,可以抑制炎症反应。克隆表达Slex合成过程中的关键酶,就可以在体外进行Slex的生物合成,从而进行相关生物制剂的开发。α-1,3-岩藻糖基转移酶(alpha-(1,3)-fucosyltransferase,FT)就是参与Slex生物合成过程的关键酶之一。利用相关软件对牛的FT基因进行了生物信息学的分析,了解了FT的相关理化性质。通过PCR的方法获得了FT基因,构建了重组质粒pMD19-FT,并亚克隆至表达载体pPIC9K。通过电转化将线性化的表达质粒pPIC9K-FT整合到宿主菌Pichia pastoris GS115基因组上,构建了重组酵母GS115-FT。经诱导表达后,SDS-PAGE检测到了目的蛋白质条带,证明了此基因在P.pastoris GS115中能够可溶性表达。
2014, 33(3):268-274. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.007 CSTR:
摘要:以酶活和相对酶活为指标考察了极低频交变磁场对过氧化氢酶活性的影响。结果表明:不同磁场强度、频率及酶液pH、处理温度都会造成过氧化氢酶的活性变化,其变化趋势是随着磁场处理时间的延长,总体上其酶活和相对酶活降低。但就温度而言,当处理温度55℃下,相对酶活远高于100%,4 h达到最高值2 142.86%。圆二色谱测定表明,25℃磁场处理后酶的α-螺旋和β-折叠的总量小于对照组,55℃磁场处理后酶的α-螺旋和β-折叠的总量大于对照组,可推测过氧化氢酶在此条件下形成具有相对耐高温的结构。
韦娜 , 王煜 , 张孝芳 , 冯叙桥 , 齐小花 , 邹明强
2014, 33(3):275-281. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.008 CSTR:
摘要:采用改进的基质固相分散提取技术提取辣椒制品中的罗丹明B,对提取工艺进行优化。选择分散剂种类、分散剂与样品质量比、洗脱剂组成及洗脱剂用量作为研究因素,以提取液中罗丹明B的含量为考察指标,运用L16(45)正交试验优选出了辣椒面中提取罗丹明B的最优工艺条件:分散剂硅胶,分散剂与样品质量比例1∶1;洗脱剂为质量分数80%乙腈水溶液,洗脱剂用量20 mL。辣椒油中提取罗丹明B最优工艺条件是:分散剂中性氧化铝,分散剂与样品质量比例2∶1;洗脱剂为体积分数80%甲醇水溶液,洗脱剂用量20 mL。辣椒酱中提取罗丹明B最优工艺条件是:分散剂中性氧化铝,分散剂与样品质量比例3∶1;洗脱剂为质量分数80%乙腈水溶液,洗脱剂用量5 mL。该提取方法萃取工艺简单,操作时间短,所需有机溶剂种类少,属环境友好型萃取方式。
许之扬 , 赵明星 , 缪恒峰 , 任红艳 , 黄振兴 , 王涛 , 高树梅 , 阮文权
2014, 33(3):282-287. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.009 CSTR:
摘要:实验研究不同氨氮质量浓度对餐厨垃圾厌氧消化过程的影响。实验结果表明:氨氮质量浓度对餐厨垃圾消化过程中出现的两个产气高峰均有显著影响,最高氨氮质量浓度组最大产气速率分别是对照组的44.8%和45%,产气高峰出现时间比对照组分别延迟6 h和42 h。氨氮质量浓度上升导致反应体系中总有机碳去除率降低,由此计算出氨氮抑制餐厨垃圾厌氧消化过程的半抑制浓度为7 860 mg/L。氨氮质量浓度的升高导致挥发性脂肪酸过量积累,其利用速率也相应减缓。
2014, 33(3):288-292. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.010 CSTR:
摘要:研究了即食鲮鱼饼工业化生产的关键工艺条件,分析了几种加工辅料对鲮鱼饼质构的影响,确定了制作鲮鱼饼的较佳配方。结果表明,几个关键工艺条件为:鲮鱼肉在低温下5倍的清水漂洗2次;擂溃过程,空擂5 min、盐擂20 min、混合擂溃5 min,擂溃完成后的鱼饼于40℃恒温培养箱内凝胶化2 h;油炸(160℃,70 s)、真空包装后经高温高压(115℃,12 min)杀菌。鲮鱼饼配方各成分质量分数为:鲮鱼肉74%、食盐2%、Tg酶0.2%、淀粉10%、肥猪肉10%、香葱0.5%、味精0.5%、水2.8%。
2014, 33(3):293-300. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.011 CSTR:
摘要:研究了微波辅助提取和田玉枣环磷酸腺苷(cAMP)工艺参数,并与传统溶剂法和超声波辅助法对比。结果表明,微波辅助提取和田玉枣cAMP最优工艺条件为:乙醇体积分数10%,微波功率300 W、微波时间3 min、浸泡时间6 h、料液比1∶30,和田玉枣cAMP提取量为795.63μg/g;各因素影响和田玉枣cAMP提取量的显著顺序:微波时间>微波功率>料液比>浸泡时间;微波辅助法较传统溶剂法和超声波辅助法提取量高、提取时间短、能耗低。采用LS-200型树脂分离纯化和田玉枣cAMP的分离效率为97.81%,cAMP粗品纯度3.47%。
2014, 33(3):301-307. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.012 CSTR:
摘要:采用产琥珀酸放线杆菌NJ113为发酵菌种,研究了5种型号的玉米浆(由法国罗盖特公司提供的095K,048K,095E,No.120924和一种国产玉米浆)对丁二酸发酵的影响。研究了095K和No.120924玉米浆替代酵母膏作为廉价氮源的可行性。结果表明,095K玉米浆可以完全替代酵母膏,No.120924的最适替代比例(体积分数)为60%~80%。测定095K玉米浆中氨基酸、维生素和金属离子的含量,并通过正交试验研究了玉米浆中关键组分对丁二酸发酵的影响,得到了6种关键组分(谷氨酸、苏氨酸、精氨酸、甲硫氨酸、烟酸和生物素)的质量浓度优化组合,与对照组相比,丁二酸产量提高了41.8%。
2014, 33(3):308-314. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.013 CSTR:
摘要:采用L9(34)正交试验法,以料液比、浸泡时间和提取时间为考察因素,研究得出江香薷挥发油最佳提取工艺条件:料液比1∶15 g/mL,浸泡时间0.5 h,提取时间6 h,提取率为0.934%。在此条件下,采用适当的数学模型对提取过程中试验数据进行拟合,得到挥发油提取率与提取时间的动力学关系式ln(V0-V)=-0.758 1t+0.830 8,K=0.758 1,A=0.830 8(R2=0.988 4)。正交试验表明,提取时间对挥发油的提取率具有显著影响。该动力学方程与挥发油的实际提取过程相似,可有效反映挥发油提取率与提取时间之间的关系。
薛洪宝 , 张晖 , 梁丽丽 , 杨俊松 , 申林 , 陶兆林
2014, 33(3):315-320. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.014 CSTR:
摘要:采用高效毛细管电泳-紫外可见检测法同时测定食品中5种人工合成甜味剂纽甜、阿斯巴甜、甜蜜素、糖精钠、安赛蜜的含量。内壁未涂层熔融石英毛细管(50μm×75 cm,有效长度60 cm),毛细管温度为25℃;缓冲液为0.2 mol/L硼酸盐(pH=8.29),分离电压+23 kV,进样压力3.45 kPa,进样时间3.0 s,UV-Vis检测器检测波长200 nm。结果显示:5种甜味剂线性回归方程相关系数r在0.999 21~0.999 89之间,定量限在2.2~552.6 mg/L之间,样品加标回收率在96.29%~102.31%范围内,相对标准偏差在3.81%~6.40%范围内。表明该方法简便、灵敏、快速、可靠、重现性好,能用于食品中5种甜味剂的同时测定。
2014, 33(3):321-329. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.015 CSTR:
摘要:以干燥紫椴花为原料,微波提取水溶性多糖,考察了微波时间、微波功率、料液比3个因素对多糖得率的影响,通过响应面法对紫椴花多糖微波提取工艺进行了优化,根据二次回归模型得到的最佳工艺条件为:微波时间9 min,微波功率585 W,料液比1∶67(g/mL),在此条件下,紫椴花多糖理论得率为12.57%。理化性质实验及红外光谱分析表明,紫椴花多糖具有多糖的通性。以抗坏血酸(VC)为对照品,测定了紫椴花粗多糖的总还原能力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和羟自由基(·OH)的能力,及对亚铁离子(Fe2+)诱发的脂质过氧化的抑制作用,对紫椴花粗多糖的体外抗氧化活性进行了评价。结果表明:紫椴花粗多糖具有一定的还原能力、清除自由基能力,及抗脂质过氧化能力,其抗氧化活性弱于相同浓度的抗坏血酸(VC)。
吕春茂 , 陆长颖 , 孟宪军 , 董文轩 , 魏雅静 , 刘婵婵
2014, 33(3):330-335. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.016 CSTR:
摘要:采用SD大鼠建立高血脂症模型并灌胃处理,通过测定模型血脂及肝脏病理变化,考察平欧榛子油辅助降血脂和预防脂肪肝的作用。结果表明:模型组的血脂水平与空白对照组差异极显著,高血脂症模型建立;大鼠灌胃结果显示,饲喂豆油及平欧榛子油低剂量、中剂量和高剂量大鼠总胆固醇(TC)的含量较高脂对照组大鼠差异显著,分别下降13%、13%、16%和16%;甘油三酯(TG)的含量较高脂对照组大鼠差异也显著,分别下降24%、24%、50%和47%;低密度脂蛋白(LDL-C)的含量较高脂对照组大鼠分别下降1%、4%、6%和26%;高密度脂蛋白(HDL-C)含量升高明显,分别升高28%、32%、41%和44%;大鼠的血糖(GLU)、丙二醛(MDA)、动脉粥样硬化指数AI1、AI2和冠心指数(R-CHR)均显著降低,并与榛子油的剂量呈现正相关;连续饲喂平欧榛子油有助于降低高血脂症大鼠肝脏脂质沉积,对大鼠肝细胞有一定的保护作用。
2014, 33(3):336. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.03.017 CSTR:
摘要:<正>我国甲壳生物质资源容量巨大,每年产生虾蟹壳等甲壳生物质废弃物1 000多万吨,可形成5 000亿元以上的产业规模。甲壳生物质资源的生态高值加工不仅能够变废为宝、利于环境、造福人类,而且能够有效促进农业增效、农民增收,成为促进水产养殖业与水产品加工业发展的副产物综合利用的新经济增长点。江南大学夏文水教授及其课题组成员针对我国甲壳生物质资源利用程度小、产品附加值低、环境污染严重等迫切需要解决的问题展开研究,建立了甲壳生物质资源的生态高值化加工技术创新理论和技
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