摘要:微生物发酵法是目前生产L-亮氨酸最主要的方法。选育L-亮氨酸高产菌株,有利于缩短国内亮氨酸生产与国外生产之间的差距,提高我国L-亮氨酸市场与国际的竞争力。作者概述了L-亮氨酸的生产方法、生物合成过程中酶的调节作用以及转运蛋白和亮氨酸响应蛋白对L-亮氨酸的调控作用,同时概述了国内外L-亮氨酸产生菌育种方法的研究进展。

摘要:发酵乳杆菌作为传统发酵食品中的优势乳酸菌具有安全性及遗传稳定的特点。作者着重阐述了发酵乳杆菌在传统食品中的分布以及应用,及其作为益生菌在耐受动物肠道不利条件、胆固醇降解、对腐败及病原菌的抑制、对人体的免疫增强作用等方面的益生特性及其机制的研究现状,并对菌株安全性方面的研究进行了综述,以期对发酵乳杆菌作为高品质的益生食品发酵剂奠定一定的理论基础。

摘要:以小麦秸秆为基本培养基质,漆酶活力为指标,对其培养条件--包括碳源、氮源、起始含水量和秸秆粒度进行了初步的优化,得到了较佳产酶条件。在此过程中测定了发酵后还原糖的质量分数,探究了白腐菌在小麦秸秆降解过程中的作用。另外,测定了添加氮源发酵后的麦草秸秆与未发酵麦草秸秆的组成,并进行了比较。

摘要:在乳酸乳球菌生长过程中外源添加浓度为10 mmol/L的亮氨酸,可有效提高乳酸乳球菌在酸胁迫环境下的酸耐受性。在酸性环境中(pH 5.0) ,添加亮氨酸的菌株的生物量为对照菌株的1.24倍;经过酸胁迫(pH 4.0) 5 h后,添加亮氨酸菌株的存活率是对照菌株的28.5倍。进一步的研究表明,亮氨酸的添加可提高胞内NH4+浓度,有效的维持酸胁迫环境下胞内pH(pHin) 的稳定,并有效维持乳酸脱氢酶(LDH) 的活性,从而有效提高了乳酸乳球菌对酸胁迫的抵御能力。

摘要:对耐盐副干酪乳杆菌在盐胁迫下的应激反应进行研究,比较其在含有6 g/dL NaCl和未含有NaCl的培养基中生长至对数生长中期的蛋白质组双向电泳图谱差异。结果表明:有20个蛋白质点表达发生明显变化,经过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定,其中热休克蛋白质GroEL和DnaK在盐胁迫下表达上调,参与脂肪酸合成的3-氧酰基-(酰载体蛋白)合酶Fab G表达下调,可能与该菌应对盐胁迫密切相关。

摘要:从中国传统固态发酵食醋醋醅中分离出5株产细菌纤维素(BC)的菌株,经生理生化特征及16S rDNA序列分析,它们均属于中间葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter intermedius),其中编号为1-17的菌株初始产量较高。应用扫描电镜技术(SEM)和傅里叶红外光谱技术(FT-IR)分析了BC结构特征。采用单因素研究了温度、培养时间、碳源、初始pH对BC合成的影响。确定菌株1-17最适温度为35 ℃,发酵时间为7 d,甘油和葡萄糖为最适碳源,最适初始pH为6.0,乳酸根离子和钙离子能够促进BC的合成。通过培养条件优化使得细菌纤维素产量从初始的(3.90±0.08) g/L增加到(7.90±0.19) g/L。

摘要:人血清白蛋白(human serum albumin,HSA),为血浆中含量最丰富的蛋白质,具有调控血液中的功能蛋白质、脂肪酸、激素、药物和维持血液渗透压功能。毕赤酵母工程菌Pichia pastoris GSll5/pPIC9K-rHSA经50 L发酵罐发酵,发酵液冷冻离心,上清液超滤浓缩后,依次通过Blue Sepharose 6FF亲和层析、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析和SP Sepharose 6FF离子层析纯化,实现rHSA的规模化制备,最终rHSA的纯度可达99.9%以上。通过rHSA的结晶条件筛选实验,筛选出沉淀剂分别为PEG 1500、PEG 3350、PEG 6000、MPEG 2000和MPEG 5000五种结晶条件,结晶环境均为疏水性环境,并且结晶环境不能含有类似DTT的强还原剂。其中沉淀剂为MPEG 2000条件下优化出的rHSA和pHSA蛋白晶体经X光衍射分辨率最好,分别为3.4 ?魡和3.1 ?魡,通过分子置换法得到rHSA和pHSA的晶体结构,二者结构大体相似,为rHSA在临床上的应用和HSA融合蛋白的晶体结构研究提供可靠的依据和基础。

摘要:以采自东北10个地区的10份传统发酵豆酱为研究对象,采用氨基酸自动分析仪分别对其游离氨基酸进行分析,并利用SPSS软件的主成分分析法,对豆酱的游离氨基酸质量分数进行综合评价。结果表明:不同地区传统发酵豆酱游离氨基酸质量分数存在差异,游离氨基酸综合质量最高的为QQHE1样品,其次为TL1样品,最低的为YK1样品。

摘要:利用云南文山采集的人工栽培和野生云南重楼Paris polyphylla Smith var．yunnanensis(Franch)根茎,对其内生细菌进行了分离、纯化及鉴定。分离得到40和44株云南重楼内生细菌。经16S rDNA测序,在NCBI中比对,MEGA4建系统进化树,所得内生细菌分别鉴定为分属于6和8个属。其中,人工栽培云南重楼内生细菌中,芽孢杆菌属(Bacillus)和肠杆菌属(Enterobacter)分离频率分别为35%、27.5%,是其优势内生细菌群;野生云南重楼内生细菌中,芽孢杆菌属(Bacillus)和克雷伯氏菌属(Klebsiella)分离频率分别为36.4%、20.4%,是其优势内生细菌群。本研究结果体现了人工栽培和野生云南重楼内生细菌分布的差异及云南重楼根中内生细菌的多样性,也为后续重楼内生菌的多样性开发提供了理论和实验基础。

摘要:建立了采用超高效液相色谱法(UPLC)测定桦褐孔菌发酵菌丝体中的白桦脂醇、麦角甾醇、羊毛甾醇、胆甾醇、豆甾醇和谷甾醇的质量分数的方法。色谱条件以shim-pack XR-ODSⅢ柱(150 mm×2 mm,2.2 μm)进行分离,流动相为乙腈100%,流速为0.8 mL/min,检测波长为202 nm,柱温为30 ℃。结果表明,UPLC法具有很好的重复性和回收率。甾类化合物分析的日内和日间相对标准偏差分别为0.10%~0.33%(n=5)和0.07%~1.66%(n=5)。获得了在0.3~1.6 μg范围内很好的线性范围。白桦脂醇、麦角甾醇、羊毛甾醇、胆甾醇、豆甾醇和谷甾醇的回收率分为97.05%,98.74%,95.65%,101.45%,96.62%和96.14%。UPLC法适合用来快速、准确定量测定桦褐孔菌发酵菌丝体中6种甾类化合物。

摘要:以白酒发酵过程中的优势菌枯草芽孢杆菌为模式菌株,针对具有高保守性及特异性的16S rRNA设计一组核酸探针,建立了对芽孢杆菌属进行定性和定量分析的新型的微板核酸杂交检测方法,优化了关键检测条件。结果表明,当S1酶反应温度为42 ℃时,芽孢杆菌属检测探针能分开目标序列仅差一个碱基的近缘属。当捕获探针和信号探针工作浓度均为5 nmol/L,与分析探针杂交温度都为50 ℃,杂交时间分别为60 min和15 min时,检测信号的强弱与细菌数呈良好的线性关系,能实现定量检测,灵敏度高达1.33×102 cells/mL。本方法提供了一个快速定性定量的检测技术,具有很好的应用于白酒发酵过程中芽孢杆菌属实时监测的潜力。

摘要:从土壤中筛选到一株产中性纤维素酶的细菌,初步鉴定为芽孢杆菌属。以其为出发菌株,利用单因素及析因试验、爬坡实验、中心组合实验,建立其发酵产酶过程的响应面(RSM)模型,通过对RSM模型分析,得到最优培养基碳氮源组成:麦芽糖质量浓度1.97 g/dL、酵母粉-蛋白胨混合氮源(1∶4)2.03 g/dL。验证发现,优化后酶活从130.40 U/mL提高到194.23 U/mL。

摘要:以咸蛋清和淀粉为主要原料,研究了糯米粉与玉米淀粉添加量、鱼糜添加量、麦芽糊精添加量、水分含量、微波功率及喷动频率等单因素对重组粒膨化效果的影响。实验结果表明,糯米粉与玉米淀粉比例为1∶1,鱼糜添加量50%,麦芽糊精添加量5%,水分含量为46%,微波功率48 W/g及喷动频率4次/min时得到的重组粒产品最好,产品具有较高的膨化率和脆度。

摘要:GABA在胰腺中能够发挥保护作用,但是其具体的作用机制尚不明确。为了确定GABA是否对胰岛β细胞具有抗氧化、抗凋亡以及促进胰岛素分泌的作用,作者采用高糖(44 mmol/L)诱导建立细胞氧化损伤模型,通过测定细胞存活率、细胞ROS生成量、细胞抗氧化酶活、丙二醛含量、胰岛素分泌量以及相关基因水平,分析探讨不同浓度的GABA(10、50、100 μmol/L)对高糖诱导氧化损伤的RIN - m5f细胞的保护作用。结果表明,GABA可以提高RIN - m5f细胞的存活率,降低ROS生成量,显著促进SOD和GSH - Px的活力,降低MDA的浓度,促进胰岛素分泌,提高Nrf2和Bcl - 2的mRNA水平,并降低GSK - 3β和Bax的mRNA水平。而且现出的这些作用存在量效关系。GABA的保护作用可能通过抑制GSK - 3β,进一步抑制Bax并激活Nrf2和Bcl - 2等关键因子从而实现。因此,GABA对RIN - m5f具有抗氧化、抗凋亡以及促进胰岛素分泌的作用。

摘要:以5'-胞苷酸和磷酸胆碱钙为底物,利用东方伊萨酵母生物转化生成胞二磷胆碱,并对转化条件进行优化,得到最优的转化条件(胞苷酸17.5 g/L,磷酸胆碱钙12.5 g/L,磷酸氢二钾12.5 g/L,硫酸镁3.0 g/L,硫酸锰0.6 g/L,葡萄糖50 g/L,甲苯30 mL/L,酵母泥375 g/L,转化液pH 8.0),胞二磷胆碱产量可达10 g/L以上,最高可达11.592 g/L。对转化液去细胞、去蛋白质,717离子交换树脂吸附胞二磷胆碱,以0.05 mol/L NaCl洗脱,可以得到纯度在98%以上的胞二磷胆碱。

摘要:作者比较了不同培养条件对Streptococcus equisimilis合成透明质酸相对分子质量的影响。结果表明:高质量浓度葡萄糖有利于长链透明质酸的合成,当发酵体系葡萄糖初始质量浓度从20 g/L上升至80 g/L,相对分子质量从1.24×106增大到2.02×106,提高了62.9%。葡萄糖补料培养不利于高相对分子质量透明质酸的合成,利用葡萄糖间歇和连续补料培养的方式得到透明质酸相对分子质量分别为1.53×106和1.42×106,比分批培养下降了19.9%和25.7%。在33~39 ℃范围内,较低温度有利于高相对分子质量透明质酸的合成,在33 ℃培养条件下透明质酸相对分子质量最高可达2.54×106。发酵液pH显著影响透明质酸的相对分子质量,在pH 8时,达到了最高的2.38×106。较高溶氧水平有利于高相对分子质量透明质酸的合成,在0~45%溶氧浓度范围内,相对分子质量随溶氧水平的增加从1.16×106提升至2.43×106,增长了109.4%。本研究结果为后续高相对分子质量透明质酸的生产提供有用的实验依据。

摘要:利用响应面(RSM)研究超微蛋白粉、食盐、木薯淀粉、海藻酸钠、谷朊粉在面粉中不同的添加量对高品质面条产品感官、硬度、弹性、咀嚼性、膨润度、溶出率、面汤浊度、最大剪切力及有机物含量(TOM)品质因素的影响。研究结果表明:当超微蛋白粉、食盐、木薯淀粉、海藻酸钠、谷朊粉在面粉中的添加量分别为2.84、1.87、11.63、 0.3、2 g/dL时可获得最佳的面条品质。