谢雪钦 , 杨向莹 , 高静 , 梁爽 , 康西西 , 张岩 , 王小晋 , 许美玲 , 王静 , 张捷
2015, 34(3):225-231. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.001 CSTR:
摘要:综合归纳了有机荧光分子、量子点、稀土配合物及单壁碳纳米管共4类重要近红外荧光标记探针的性质、特征,及其在光学性能改进、信号增强等方面的最新发展,分析评述了其在环境污染物及临床诊断标志分子免疫分析中的应用,展望了基于该类探针的免疫层析法在食源性致病菌快速检测中的应用潜能。相对于发射光光谱位于紫外及可见光区的信号分子,近红外荧光探针因其具有信噪比高、组织穿透力强、对基体损伤小等突出的优势,而在生物分析领域备受瞩目。随着化学合成技术的不断发展及新型荧光材料的持续发掘,近年来近红外荧光探针日益丰富,并在无损分析、免疫检测和生物造影等领域被广泛应用。
2015, 34(3):232-238. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.002 CSTR:
摘要:病原真菌通常会产生侵染垫、附着胞和吸器等侵染结构来完成对寄主的侵染。通过电镜观察不同时间不同病原菌对哈密瓜的侵染状况。试验结果表明,病原菌会导致哈密瓜细胞结构变化,例如细胞壁变薄,叶绿体解体,细胞结构遭到破坏,出现空泡化等一系列发病特征。研究结果为哈密瓜病原菌侵染过程,以及哈密瓜侵染性病害的防治提供了理论依据。
倪孔巍 , 张萌 , 徐大伦 , 张进杰 , 楼乔明 , 杨文鸽
2015, 34(3):239-245. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.003 CSTR:
摘要:为研究花蟹肉酶解物美拉德反应产物(MRPs)的理化性质和功能属性,用花蟹肉酶解物(P)分别与木糖(X)、葡萄糖(G)、乳糖(L)和果糖(F)进行模式美拉德反应,并测定MRPs的褐变程度和pH值变化,同时通过对MRPs进行DPPH自由基清除能力、还原能力、OH自由基清除能力和Fe2+螯合能力的测定,评价其抗氧化能力。结果表明,随着加热时间的延长,各MRPs的褐变程度增加,pH值下降,DPPH自由基清除能力、还原能力和OH自由基清除能力逐渐增加,但各MRPs的Fe2+螯合能力下降。还原糖种类不同,MRPs的抗氧化性不同,各MRPs的DPPH自由基清除能力、还原能力和OH自由基清除能力由强到弱依次为:木糖-花蟹肉酶解物(X-P)、果糖-花蟹肉酶解物(F-P)、葡萄糖-花蟹肉酶解物(G-P)、乳糖-花蟹肉酶解物(L-P)。
2015, 34(3):246-252. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.004 CSTR:
摘要:利用高光谱反射图像技术研究了猪肉新鲜度的无损检测。采集了180个猪肉样本在400~1 000 nm范围内的高光谱反射图像,提取了高光谱图像的光谱均值和熵两类特征;分别利用连续投影算法、主成分分析,以及连续投影算法结合主成分分析3种特征降维方法,提取了反映肉类新鲜度信息的重要特征变量;并建立了这些特征变量与挥发性盐基氮(TVB-N)的最小二乘支持向量机(LSSVM)预测模型;在此基础上提出了猪肉TVB-N含量的可视化检测方法。研究结果表明:相比于单一特征模型,利用光谱均值和熵融合特征的LSSVM模型可显著提高模型的准确度;连续投影算法结合主成分分析的特征降维方法,可显著降低模型的复杂度,提高模型准确度。利用光谱均值和熵两类特征,通过连续投影算法和主成分分析相结合的特征降维方法所建立的LSSVM预测模型,可取得最佳的预测准确度,其预测集的均方根误差RMSEP为1.96,相关系数(RP)为0.948,剩余预测偏差(RPD)为3.12,可满足实际检测需要。建立在此基础上的可视化方法,可直观显示肉类的腐败区域和程度。
2015, 34(3):253-259. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.005 CSTR:
摘要:为实现内切葡聚糖酶和木聚糖酶在毕赤酵母中的共分泌表达,进而降低酶制剂的生产成本,构建含木聚糖酶基因的重组表达载体pPICZαA-Aoxyn11A,经Sac I线性化后,电转化至含内切葡聚糖酶基因Aucel12A的重组毕赤酵母GSC7中,获得双重重组毕赤酵母GSCX8。经甲醇诱导表达后,GSCX8发酵上清液中内切葡聚糖酶和木聚糖酶的活性分别为47.77 IU/mL和192.71 IU/mL,为单独表达菌株GSC7和GSX5的85%和80%。酶学性质分析显示,内切葡聚糖酶的最适pH为4.0,在pH 3.0~8.5稳定;最适温度为50 ℃,在60 ℃以下稳定。木聚糖酶的最适pH为5.5,在pH 3.0~10.0稳定;最适温度为55 ℃,在50 ℃以下稳定。GSCX8遗传稳定性测试结果表明,内切葡聚糖酶和木聚糖酶在毕赤酵母中实现了稳定的共表达。
2015, 34(3):260-266. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.006 CSTR:
摘要:搭建了一个6 L容积曝气型垂直柱光生物反应器,在6-8月期间置于室外屋顶运行,旨在考察夏季室外培养微藻Chlorella sorokiniana的可行性。室外培养时,若pH超过8.5,微藻会出现明显絮凝沉淀现象。太阳光入射到反应器的高达(1 700±137) ?滋mol/(m2·s)的光照强度带来的光抑制作用及随之引起的超过48 ℃的高温,对微藻细胞的损伤造成了室外培养的抑制现象。当培养液温度超过40 ℃时,Chlorella sorokiniana几乎不能生长。在反应器周围放置金属镀层反射隔热膜反射板,可以减少(42.21±4.7)%的光照强度,使培养液温度下降2~4 ℃,但晴天时光照强度仍然可达900 ?滋mol/(m2·s)以上,光抑制作用不能很好被解除。为实现微藻在室外反应器中可持续地快速增长,仍需进一步采取措施减弱光照强度。
田英杰 , 孙进 , 谢振兴 , 马玉华 , 乐国伟 , 施用晖
2015, 34(3):267-273. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.007 CSTR:
摘要:探讨了高脂膳食小鼠补充γ-氨基丁酸(GABA)对骨性能的影响。40只6周龄C57BL/6雄性小鼠,随机分成4组:正常日粮组(control),高脂日粮组(HFD),高脂日粮小鼠饮水补充0.06、0.12 g/dL GABA组。试验结束前一周收集各组小鼠尿液,测定钙及羟脯氨酸含量;第20周结束试验,测定小鼠股骨、胫骨参数,以及股骨氧化还原指标,荧光定量PCR检测相关基因表达。结果显示,与对照组相比,HFD组股骨出现氧化应激,股骨GAD65显著下调、GABAbR显著上调(P<0.05),GSK3β显著上调而Nrf2显著下调(P<0.05);股骨和胫骨钙含量、骨强度等相关性能指标显著降低,尿钙及羟脯氨酸含量显著增高,且成骨细胞分化标志基因BGLAP2、col1a1显著下调,破骨细胞分化标志基因RANKL/OPG、CTSK、TRAP显著上调(P<0.05)。补充0.06、0.12 g/dL GABA可恢复GABAbR、GSK3β、Nrf2表达(P<0.05),减轻股骨氧化损伤,同时平衡骨细胞分化及代谢,提高股骨和胫骨性能。结果表明,GABA可调节股骨氧化还原状态,平衡骨代谢,改善股骨及胫骨性能;0.12 g/dL GABA改善股骨氧化应激和股骨性能的作用优于0.06 g/dL的。
2015, 34(3):274-282. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.008 CSTR:
摘要:为了大幅降低蔗糖厂蒸发工艺的能耗,首次将蒸汽喷射式热泵技术、冷凝水闪蒸和引出额外蒸汽预热糖汁等3种节能措施,同时运用于糖汁浓缩并流多效蒸发系统中,并建立了用矩阵方程描述的该系统的数学模型。模型具有很强的通用性,可实现上述节能措施的自由组合和热泵在任意效抽汽的功能,还可推广用于食品工业其它热敏性溶液的蒸发浓缩;模型存在最佳的热泵喷射系数和抽汽位置,同时采用上述3种节能措施且在最佳条件下可以高效节能。用迭代法结合矩阵法求解浓缩糖汁的热泵并流四效蒸发系统的模型,结果表明,同时采用上述3种节能措施,并在满足约束条件的前提下,将糖汁预热至90 ℃,热泵的喷射系数为0.5,抽汽位置在第2效时节省的生蒸汽消耗量高达41%左右。
2015, 34(3):283-290. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.009 CSTR:
摘要:分别采用加热、羟基铝柱撑和稀土镧对天然麦饭石进行改性,以模拟自然富营养水为处理对象进行改性麦饭石脱氮除磷实验研究。考察了投加量、pH值,以及反应时间等因素对改性麦饭石吸附性能的影响。并通过BET、SEM和XRD对改性前后麦饭石结构进行了研究,探讨了麦饭石的改性机理。结果表明,不同改性方法都能使麦饭石去除氮磷能力显著提高,对氨氮和总磷吸附效果最好的是稀土改性麦饭石,其次为柱撑改性麦饭石和热改性麦饭石。pH值为8,麦饭石投加量为15 g/L,反应时间为60 min条件下,稀土改性麦饭石的氨氮和总磷去除率最高,分别达到89%和75%左右。
2015, 34(3):291-294. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.010 CSTR:
摘要:利用差示扫描量热仪(DSC)对18种乳熟期玉米的糊化热力学性质进行研究,探讨玉米中主成分(水分,直链淀粉,支链淀粉及蛋白质质量分数)对其糊化热力学行为的影响,分析其成分与玉米糊化热力学参数之间的相关性。结果表明:水分质量分数、直链淀粉和支链淀粉的质量分数与起始糊化温度(T0)、峰值糊化温度(TP)均为极显著正相关,而与终止糊化温度(TC)、热焓值(ΔH)的相关性均不显著;此外,热焓值(ΔH)与终止糊化温度(TC)是极显著相关。
2015, 34(3):295-301. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.011 CSTR:
摘要:采用层层自组装(LbL)技术制备了肝素/壳聚糖(HEP/CHI)5微胶囊,并研究了其抗凝血性能、胃肠道稳定性和毒副作用等。结果表明:该微胶囊具有球形结构;在pH 5.0、7.4中肝素能够缓慢可控地释放;在pH 5.0、7.4以及模拟胃液、肠液条件下具有稳定性;APTT法和全凝固实验验证了它在体外具有良好的抗凝血效果;并且对内皮细胞无细胞毒性。因此,该微胶囊有望作为口服剂型,用于临床肝素给药。
2015, 34(3):302-310. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.012 CSTR:
摘要:为充分利用鱼片加工废弃物鱼骨中的胶原蛋白质,采用单因素以及正交实验法,研究胃蛋白酶在酸性介质条件下提取罗非鱼骨胶原蛋白质的最佳工艺,精制后的胶原蛋白质采用SDS-PAGE电泳、紫外及傅立叶变换红外扫描,圆二色检测,氨基酸分析,热变性温度测定等方法,分析胶原蛋白质的理化性质。结果显示:乳酸溶液pH 2.6,温度30 ℃,料液比1∶30(g/mL),加酶量200 U/g,提取时间24 h,此工艺条件下的粗胶原蛋白质提取率达到70.28%,得率为12.76%;罗非鱼骨胶原蛋白质含有2条α链和1 条β链,属于典型的I 型胶原蛋白质;罗非鱼骨胶原蛋白质的主要氨基酸为甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、谷氨酸和丙氨酸;罗非鱼骨胶原蛋白质的热变性温度为34.5 ℃。研究表明,采用胃蛋白酶提取鱼骨胶原蛋白质,提取率和纯度均较高。
赵明 , 何中杰 , 王瑞 , 姚明东 , 师慧 , 王振伟 , 孟尧
2015, 34(3):311-315. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.013 CSTR:
摘要:利用含PET-Urate Oxidase表达质粒的重组E.coli JM109(DE3)菌株进行大规模发酵培养,拟建立一种高效、低成本的生产重组尿酸酶的技术工艺路线。取冻存的工程菌接种于含质量分数1%琼脂的种子培养基中进行培养,从划线平板上挑取单菌落接种于摇瓶中继续培养,最后以体积分数5%接种量接种于发酵培养基中,绘制生长曲线;以乳糖作为诱导剂与传统IPTG诱导方法进行发酵培养比较;菌体经高压均质机破碎、质量分数40%~60%硫酸铵分级沉淀,以及Q-Sepharose F.F.层析进行分离纯化。结果显示,乳糖作为诱导剂在300 L的发酵罐中进行培养可获得菌体湿质量2 700 g,目的蛋白质表达量占菌体可溶性蛋白质的30%左右,略高于IPTG诱导的效果;经分离纯化后该酶的纯化倍数可达原来的4.5倍,活性回收率为40%;纯化的重组尿酸酶经SDS-PAGE和HPLC分析,显示单一蛋白质色带和单一洗脱峰。成果为该酶的医学实际应用奠定了理论实验基础。
2015, 34(3):316-323. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.014 CSTR:
摘要:为了优化蓝参降脂咀嚼片的处方工艺,采用单因素实验对矫味剂、粘合剂、润滑剂及片剂硬度进行筛选;采用Design-Expert软件中的D-最优混料设计,以气味、口味、口感、外观、可嚼性和可接受程度6个指标,对处方中6种成分的不同组合对咀嚼片感官品质的影响进行评价,确定最优处方。最终确定的处方工艺为:浸膏质量分数32.000%,甘露醇质量分数35.000%,乳糖质量分数26.000%,罗汉果甜苷质量分数3.000%,薄荷脑质量分数0.600%,桔子香精质量分数0.400%,以体积分数75%乙醇为粘合剂,质量分数2%滑石粉、质量分数1%硬脂酸镁为润滑剂,压片硬度60 N。制成的蓝参降脂咀嚼片表面光滑,色泽均匀,口感良好,硬度适中。表明采用本方法优化得到的处方工艺稳定可靠。
陈蕴 , 杨雪丽 , 周海燕 , 黄超 , 王文龙 , 龚笑海 , 冯柏年 , 金坚
2015, 34(3):324-329. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.015 CSTR:
摘要:建立PARP-1的体外活性测定方法并对84个具有潜在PARP抑制活性的化合物进行筛选。从Sf9昆虫细胞中提取酶液,以NAD+为底物,DNA为激活剂,建立PARP-1的活性测定方法;以高通量技术参数评价此方法,用已知PARP抑制剂进行验证,并以此方法进行PARP抑制剂的筛选。结果显示,确定的酶促反应体系为:12.5 nmol/L NAD+,15 μg/mL DNA,6.25×10-4 U PARP-1。评价Z'因子为0.76,S/B值为3.58。基于此模型筛出47个化合物在浓度7.4 μmol/L时对PARP-1的抑制率达到60%以上。表明所建立的PARP-1活性测定方法,适用于PARP-1抑制剂的高通量筛选。
2015, 34(3):330-335. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2015.03.016 CSTR:
摘要:小白牛肉中脂肪酸的分析尚未见文献报道。采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检测小白牛肉中的脂肪酸。回流法(90 ℃,90 min)提取,甲酯化样品中的脂肪,通过与标准对照品和NIST Library谱库比较,得到40种脂肪酸。饱和脂肪酸面积分数为51.165%,以棕榈酸和硬脂酸为主;不饱和脂肪酸面积分数为48.835%,以油酸、亚油酸和花生四烯酸为主。小白牛肉含有丰富的多不饱和脂肪酸,具有较高的营养价值。
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