2016, 35(11):1121-1128. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.001 CSTR:
摘要:20世纪后半叶,随着蛋白质与核酸测序技术的问世,人类所掌握的生物大分子结构与功能的信息量暴涨,并逐渐进入了理性设计序列,以达到建构生物大分子功能性三级结构的自由王国。随着21世纪的到来,得益于多学科交叉集成,DNA技术中的创新性设计智慧此起彼伏。人类成功重装了低等生命的基因组,设计基因组底盘、构建人工进化平台,推出CRISPR基因编辑术,发明DNA折纸术,精确自组装纳米级三维DNA材料。另外,可将设计学的立体构成原理与基于用户体验的设计方法应用于生物信息学数据库建设。
2016, 35(11):1129-1134. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.002 CSTR:
摘要:利用明串珠菌SK24.002发酵制备水溶性(1→3)(1→6)-α-D葡聚糖,采用高效液相色谱仪、扫描电镜、Zeta电位/粒径仪、热分析系统、差示扫描量热仪、旋转流变仪等现代分析方法测定其理化性质。结果表明,该葡聚糖表面呈多孔网络结构,能溶于水,溶液中粒径分布在40~160 nm范围内。相对分子质量分布呈单一峰,具有较高的热稳定性,200 ℃以下只失去了吸附水,当温度在265~345 ℃时,发生强烈的热裂解反应,(1→3)(1→6)-α-D葡聚糖溶液的黏度在5~10 g/dL范围内随着质量浓度增加呈指数上升,高浓度的葡聚糖溶液呈现剪切变稀特性,能形成弱凝胶。
2016, 35(11):1135-1141. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.003 CSTR:
摘要:宇佐美曲霉 (Aspergillus usamii) YL-01-78的糖苷水解酶5家族β-甘露聚糖酶 (AuMan5A) 是一种仅含催化域 (CM) 的单结构蛋白。为改善其酶学性质,基于理性设计将海栖热胞菌 (Thermotoga maritima) MSB8的27家族碳水化合物结合域 (CBM27)融合至AuMan5A的C-端,并采用重叠PCR技术构建融合酶基因Auman5A-cbm27。分别将Auman5A-cbm27和Auman5A在毕赤酵母GS115中进行表达,对重组表达产物reAuMan5A-CBM27和reAuMan5A进行纯化和酶学性质测定。结果表明,reAuMan5A-CBM27和reAuMan5A的最适温度均为68 ℃;两者分别在68和60 ℃及以下稳定。同时,前者较后者具有更广泛的pH稳定范围。reAuMan5A-CBM27对角豆胶的Km值由融合前的1.7 mg/mL降至0.7 mg/mL,表明AuMan5A的底物亲和力得到了提高。
2016, 35(11):1142-1147. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.004 CSTR:
摘要:阳离子多孔淀粉是一种新型化学改性淀粉,将其添加到卷烟过滤嘴中可用于吸附主流烟气中的小分子醛类。以玉米淀粉为原料制备玉米多孔淀粉,以3-氯-2羟丙基三甲基氯化铵为醚化剂,采用碱催化干法制备阳离子多孔淀粉,考察了醚化剂与多孔淀粉的质量之比、NaOH与醚化剂质量之比、反应温度及反应时间对取代度和反应效率的影响,优化出最佳条件如下:醚化剂与多孔淀粉质量之比0.04,NaOH与醚化剂质量之比2.0,反应温度80 ℃,反应时间4 h。将阳离子多孔淀粉添加到卷烟过滤嘴中考察其对卷烟主流烟气中巴豆醛的吸附效果,结果表明添加10 mg多孔淀粉的烟支中巴豆醛质量分数降低了14.94%,而添加10 mg阳离子多孔淀粉的烟支中巴豆醛质量分数降低了37.36%。
李由然 , 王珊瑛 , 杨韵霏 , 顾正华 , 张梁 , 丁重阳 , 石贵阳
2016, 35(11):1148-1155. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.005 CSTR:
摘要:海藻糖合成酶可将麦芽糖异构化为海藻糖,是海藻糖酶法生物转化的中心酶制剂。为了实现海藻糖合成酶在食品安全型表达宿主中高效生产,进而应用于食品级海藻糖的酶法合成,构建了革兰氏阳性菌重组表达质粒并转化入地衣芽孢杆菌。重组质粒携带了来自于嗜热放线菌Thermomonospora curvata海藻糖合成酶的编码基因,在地衣芽孢杆菌木糖异构酶启动子及其阻遏蛋白的介导下表达,胞内海藻糖合成酶发酵活力为12.1 U/mL。考察了不同培养条件对重组菌生长和产酶的影响,结果显示质量分数4%的麦芽糊精和质量分数0.4%的豆饼粉分别为产酶适宜的碳源和氮源;菌体培养10 h后加入终质量浓度为1 g/dL的诱导剂,于37 ℃诱导12 h后重组菌产酶最高达到23.7 U/mL。
陆光兴 , 詹晓北 , 朱莉 , 郑志永 , 吴剑荣 , 罗宸
2016, 35(11):1156-1162. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.006 CSTR:
摘要:单向两次薄层层析展开可以显著提高对热凝胶β-1,3-葡寡糖的分析效果,以Silica gel 60 F254硅胶板为固定相,V(乙酸)∶V(乙酸乙酯)∶V(水)=2∶2.4∶1.4为展开剂,展距20 cm时,单向两次展开可以较好地分离聚合度为2~13的热凝胶β-1,3-葡寡糖。此外还建立了Image J软件图像分析定量热凝胶β-1,3-葡寡糖的方法,在不同糖质量浓度范围(0.02~0.1、0.1~0.8、0.8~5.0 g/L)内寡糖显色斑点的灰度积分响应值与糖浓度分别有着很好的线性关系(R2>0.99)。该方法的灵敏度高达0.02 g/L,相对标准偏差为1 %~5 %,稳定性很好。与HPLC等方法相比具有操作简便、分析快速、不需专门仪器和特定寡糖标准品等优点。 关键词: 热凝胶;β-1,3-葡寡糖;薄层层析;图像分析;Image J软件 中图分类号:TQ 281 文献标志码:A 文章编号:1673—1689(2016)11—1156—07
巩转娣 , 魏锁成 , 魏黎敏 , 张涛杰 , 杨妍梅 , 梁浩勤 , 王欢 , 赖露菊 , 郑秧秧
2016, 35(11):1163-1168. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.007 CSTR:
摘要:将100只28日龄健康雄性小白鼠随机分为5组(n=20),COC-1和COC-2自由饮用50%和100%可口可乐,PEP-1和PEP-2自由饮用50%和100%百事可乐,CG为空白对照,实验持续15 d。于第3、5、7、10、13和15 d随机从每个组抓取3只小鼠断颈采血,4 000 r/min离心10 min,分离血清,无菌采集内脏器官,分别称重;ELISA法测定血清睾酮含量。结果表明至实验第7 d,COC-2和PEP-2组小鼠的体重均高于CG(P<0.01,P<0.05),15 d时,实验组小鼠体重均大于对照组(CG);第10 d时COC-1日增重明显低于PEP-2和CG,第15 d各实验组日增重均略小于对照组;第7 d时,COC-1、COC-2和PEP-2两侧睾丸平均重明显高于CG(P<0.05),到15 d实验组睾丸重均大于对照组(CG);PEP-2胃质量在第15 d大于其余4组;第7 d时COC-1、COC-2和PEP-2肾脏质量明显高于PEP-1(P<0.05);在实验期间各组的心、肝、脾和肺脏均无显著差异;第10d时PEP-1,PEP-2血清睾酮含量显著高于COC-1和CG(P<0.05),且COC-2和PEP-2在15 d明显高于CG(P<0.05)。短时期饮用高浓度可口可乐和百事可乐可以促进小鼠生长,轻度促进睾丸发育,增加血清睾酮含量。
郝立月 , 段晓梅 , 夏淑芳 , 李丽婷 , 乐国伟 , 施用晖
2016, 35(11):1169-1173. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.008 CSTR:
摘要:探讨白藜芦醇通过调节甲状腺激素代谢通路中的关键基因SIRT1、PGC1α进而缓解机体氧化应激,改善甲状腺激素及其相关受体水平,调节能量代谢维持机体稳态。C57 雄性小鼠随机分成3组,每周监测体质量,分别测定血脂、甲状腺激素以及氧化应激指标。与C组相比,HFD组小鼠体重、血脂显著升高(P<0.05);HFD组小鼠肝脏 GSH/GSSG 和 T-AOC 在第7周末显著降低,MDA显著上升(P<0.05);HFD组T4 以及FT4 水平与C组相比显著升高(P<0.05),T3以及FT3水平差异不显著;添加白藜芦醇能显著上调DIOI、TRβ、SIRT1、PGC1α的表达量。
2016, 35(11):1174-1181. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.009 CSTR:
摘要:研究了一种由浓缩乳蛋白粉(Milk Protein Concentration Powders,MPC Powders)和难溶性钙盐制备得到的新型钙增强剂(Ca-MPC),通过激光共聚焦扫描显微镜、ζ-电位等表征手段证实了此钙增强剂是蛋白质和难溶性钙盐通过分子间弱相互作用形成的复合物,并进一步分析了蛋白质的不同组分与钙盐之间相互作用的差异性。另外,对此类钙增强剂在纯水和蛋白溶液中的分散稳定性进行了考察,结果表明,该钙增强剂在水溶液和蛋白溶液中的悬浮稳定性都有所改善,可作为良好的食品外源性钙补充剂。
2016, 35(11):1182-1188. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.010 CSTR:
摘要:为提高低分子量肝素的生物活性,用末端接枝法将末端醛基低相对分子质量肝素(LMWH-CHO)缀合在羧甲基纤维素(CMC)主链上,形成一种强负电性的超支化聚合物(LMWH-grafted CMC,CH)。LMWH-CHO是通过亚硝酸钠降解法制备获得,利用EDC催化酰胺键生成反应使CMC氨基化,然后通过醛基和氨基的希夫碱反应将二者缀合。运用傅立叶变换红外光谱( FTIR)、核磁共振(NMR)、凝胶渗透色谱-多角度激光散射联用技术(GPC-MALLS)等方法对产物结构和分子量进行表征,并对聚合物的抗凝血、抗血栓活性进行了测定。结果显示,在氨基化CMC糖单元与LMWH-CHO摩尔比为1∶5的条件下反应12 h,得到接枝率为23.7%的CH超支化聚合物。该聚合物活化部分凝血活酶时间(APTT)为146 s,比LMWH延长了25%,凝血酶原时间(PT)为27.9 s,约为LMWH的2倍。此外,该聚合物抗Xa IC50值为104.2 nmol/L,比LMWH降低了近4倍;抗IIa IC50值为642 nmol/L,远低于LMWH(>2 000 nmol/L)。表明,制备的CH超支化聚合物抗凝血和抗血栓活性均远优于低相对分子质量肝素。
2016, 35(11):1189-1194. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.011 CSTR:
摘要:为了研究冷激处理对冷藏香蕉果实內源多胺和乙烯的影响及其与冷害的关系。将3 ℃冷激处理6 h和未经冷激处理的香蕉同时置于(8±0.5)℃下贮藏,定期测定香蕉果实冷害指数、感官品质、内源多胺和乙烯的含量。结果表明:腐胺与乙烯生成存在比较明显的正相关关系,但随着乙烯生成的增加,亚精胺和精胺含量会明显下降。与对照组相比,3 ℃冷激处理6 h可明显降低香蕉果实的腐胺含量和乙烯释放量,并延迟二者峰值的出现,延缓亚精胺和精胺含量的下降,同时降低香蕉果实的冷害指数,维持果实较好的的贮藏品质,从而减轻香蕉果实冷害的发生。
2016, 35(11):1195-1200. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.012 CSTR:
摘要:为综合利用我国蛤蜊资源,研究蛤蜊酱的发酵生产。以米曲霉为发酵微生物,比较了不同原料制曲和不同发酵工艺对蛤蜊酱中氨基氮和氨基酸含量的影响,结果显示:以麦麸制曲和发酵初期加入蛤蜊的工艺最佳,其总氨基氮质量分数最高,为1.25 g/hg;其谷氨酸为1.2 g/hg;呈味核苷酸为209.54 mg/hg。发酵结束后蛤蜊酱鲜味突出,其中5'-GMP的呈味强度值为8.460,说明发酵过程中产生的5'-GMP对蛤蜊酱鲜味有重要贡献。
2016, 35(11):1201-1205. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.013 CSTR:
摘要:通过测定新鲜带鱼肌肉的一般营养成分、脂肪酸组成、游离氨基酸、挥发性风味成分,分析了带鱼的营养及风味特性。结果表明:带鱼肌肉中不饱和脂肪酸占脂肪酸总质量的60.57%,其中多不饱和脂肪酸占31.98%,DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)含量较高;带鱼肌肉中游离氨基酸以赖氨酸、组氨酸和丙氨酸为主,质量分数分别为1.02、0.35、0.28 g/kg;带鱼肌肉中共检测出38种挥发性化合物,其中主要以三甲胺和醇类化合物相对含量较高,是构成带鱼腥味的主要物质。
杨乾栩 , 和智君 , 杨蕾 , 张天栋 , 曽晓鹰 , 王保兴 , 杨清
2016, 35(11):1206-1211. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.014 CSTR:
摘要:为提升烟梗品质,降低烟梗中大分子蛋白质、果胶和纤维素含量,发展了烟梗的酸性蛋白酶-果胶酶-纤维素酶的复合酶水解方法,并采用全局搜索方法对复合酶的水解条件进行了优化和验证。结果表明:不同酶对不同参数的响应不同,3个酶对pH均很敏感,尤以酸性蛋白酶最为敏感,作用区间较窄,果胶酶和纤维素酶对温度较为敏感,酸性蛋白酶受温度影响较小。整体上,3个酶在限定范围内达到最优水解率时的作用参数均不相同;参数优化后的复合酶对烟梗中的大分子物质具有较好的水解效果,总水解效率达28.34%,且感官品质较好;复合酶处理后的烟梗,其品质提升较为明显;结合工业生产特点,感官品质需求,及烟梗中蛋白、果胶和纤维素含量特点,可以有目的的在限定条件下优化烟梗水解效率及方向。
2016, 35(11):1212-1218. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.015 CSTR:
摘要:以副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)gyrB 基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增(Real-time fluorescence single primer isothermal amplification,实时荧光SPIA)检测副溶血性弧菌的方法。实时荧光SPIA在40 min反应时间内,对3株副溶血性弧菌和16株其他食源性致病菌进行实时荧光SPIA检测,结果表明除3株副溶血性弧菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线。进一步研究表明,实时荧光SPIA检测副溶血性弧菌纯培养DNA的灵敏度为8.2 fg/μL,对副溶血性弧菌菌悬液的检测灵敏度为13.5 CFU/mL;对鳕鱼、海蟹、牡蛎和咸鸭蛋等4种模拟样品中副溶血性弧菌的检出限均为14.7 CFU/g。研究结果表明,实时荧光SPIA检测副溶血性弧菌灵敏度高,特异性强,耗时短,方法简便。
2016, 35(11):1219-1223. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.016 CSTR:
摘要:研究了一种新的高纯度低聚异麦芽糖(IMO)生产方法。利用益生菌添加甜菜碱进行乳酸发酵,将可发酵性糖葡萄糖、果糖和麦芽糖转化为乳酸,使原料IMO等级由IMO-50提高到IMO-90,发酵液无需进行菌体分离即可用于食品加工。
2016, 35(11):1224-1231. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.11.017 CSTR:
摘要:通过PCR检测食用油中内源性DNA是鉴定食用植物油品种真实属性,检测食用油掺假的一种有效方法。然而由于精炼的食用油中DNA含量极低,如何有效富集食用油中的DNA是实现PCR鉴别粮油的关键。因此,作者研究了磁珠法富集食用油中的DNA并通过实时荧光PCR检测芝麻油、菜籽油、稻米油的内源基因。结果表明经过5次乳化后和磁珠进一步富集水相中的DNA,实时荧光PCR成功检测到了食用油中的内源性基因,琼脂糖凝胶电泳分析进一步证明实现了上述3种食用植物油的定性鉴定。
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