• 2016年第35卷第4期文章目次
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    • 中国传统食品“型、名、意”之谐

      2016, 35(4):337-341. DOI: 10.3979//j.issn.1673-1689.2016.04.001

      摘要 (440) HTML (0) PDF 867.67 K (1347) 评论 (0) 收藏

      摘要:大凡经世千载的民间食品,其“型”融于“名”,且隐于“意”。作者从促进中华传统食品非物质文化遗产挖掘的角度出发,借助多学科交叉纵横谈,领悟以圆、方、角、条为基型的食品渊源,以及中华食品“型、名、意”之间交互贯通的历史背景和文化轶趣。指出中华食品非遗保护的真谛,乃基于传承食品物性之外的更深层次的人文属性。呼吁唾弃地方保护主义,弃小见大、清源正本、返璞归真,推动有中华食品内涵特色的可持续发展。

    • 纳豆激酶分子结构与潜在应用价值分析

      2016, 35(4):342-349. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.002

      摘要 (395) HTML (0) PDF 1.92 M (845) 评论 (0) 收藏

      摘要:纳豆激酶因具有较强的溶血能力而著称。目前国内外大量研究人员聚焦于纳豆激酶研究,其开发利用已经获得了长足发展,但同时许多问题与不足也随之暴露出来。一方面是对纳豆激酶的开发利用大多局限于溶栓活性的利用与开发,低估了纳豆激酶应有的整体价值;其次是针对该酶开发和利用的方法过于传统,尚未形成组学大数据和生物信息学技术相结合的探索思维。因此,需要利用更为开阔的研究思路和开发手段来实现纳豆激酶开发利用的最大化。作者从纳豆激酶分子水平和家族分类层次上系统地阐述该酶分子特征,同时对纳豆激酶家族蛋白酶的应用现状进行分析,并对纳豆激酶研发前景进行了展望。

    • 可降解大豆过敏原蛋白酶的纯化与酶学性质

      2016, 35(4):350-356. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.003

      摘要 (1090) HTML (0) PDF 1.06 M (951) 评论 (0) 收藏

      摘要:将前期筛选获得的芽孢杆菌Bacillus sp. BBE201108发酵培养后,以其发酵上清液作为蛋白酶的粗酶液,经硫酸铵分级沉淀、透析除盐、Q FF 阴离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析,蛋白酶的比酶活达到2 575.45 U/mg,纯化倍数为10.55,回收率为6.48%,经SDS-PAGE电泳显示为单一条带,该蛋白酶的表观相对分子质量约为46 000。该酶与大豆分离蛋白在pH 8.0,50 ℃下反应30 min,可有效降解β-伴大豆球蛋白的α亚基和α'亚基。在pH 7.0~9.0以及30~40 ℃下的稳定较好;Ca2+存在的情况下,酶活提高了5%左右,而Mn2+、Fe2+和Cu2+在不同程度上对该蛋白酶有抑制作用;苯甲基磺酰氟(PMSF)对该蛋白酶的抑制作用较为显著。酶学性质分析表明,该蛋白酶的Km为4.19 g/L,Vmax为4.04 g/(L·s),Kcat为107.73 s-1,Kcat/Km为25.71 L/(g·s)。

    • 基于近红外及中红外光谱融合技术快速检测黄酒中的总酚含量及其抗氧化能力

      2016, 35(4):357-363. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.004

      摘要 (865) HTML (0) PDF 1.80 M (1418) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了实现对黄酒中总酚含量(TPC)及其抗氧化能力(TAC)的快速检测,探索了将傅立叶红外光谱技术应用于快速检测这两项重要指标的可行性。协同区间偏最小二乘算法(SiPLS)用于选出有效波长区间以提高模型的预测能力。支持向量机(SVM)和主成分分析(PCA)用来融合由SiPLS选出的中红外(ATR-IR)和近红外(FT-NIR)光谱的有效波段。实验结果表明基于SiPLS筛选的有效光谱变量而建立的偏最小二乘回归模型(PLS)的精度优于基于全光谱建立的经典PLS模型。基于ATR-IR建立的模型的效果略优于基于FT-NIR光谱建立的模型。此外,基于提取自ATR-IR合FT-NIR的有效区间而建立的SVM模型的预测能力要好于建立的PLS或SiPLS模型。因此,ATR-IR及FT-IR结合特征谱区筛选方法可以作为理化检测的替代手段实现对黄酒中的TAC和TPC的快速检测,同时基于两种光谱的融合技术可显著提高模型的预测精度。

    • 尿酸酶多囊脂质体的酶学性质及其免疫原性

      2016, 35(4):364-369. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.005

      摘要 (386) HTML (0) PDF 824.57 K (1546) 评论 (0) 收藏

      摘要:研究尿酸酶多囊脂质体(Uricase-multivesicular liposomes,UOMVLs)的酶学性质及其免疫原性。采用W/ O/ W 复乳法制备UOMVLs,测定UOMVLs中尿酸酶( Uricase,UOX)的最适反应温度、最适反应pH值、热稳定性以及储存稳定性,并以其为抗原免疫SD大鼠,制备抗血清,通过间接ELISA法检测血清抗体效价。UOMVLs和UOX最适反应温度均为40 ℃;最适反应pH值分别为8. 0和8. 5;UOMVLs的稳定性明显高于UOX;UOMVLs和UOX的血清抗体效价分别为1∶500和1∶8 000。因此 UOMVLs的酶学性质明显优于游离UOX,免疫原性明显低于游离UOX,为该酶的临床应用提供了实验依据。

    • MALDI-TOF-MS鉴定3种水稻细菌的方法

      2016, 35(4):370-374. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.006

      摘要 (947) HTML (0) PDF 1.00 M (10069) 评论 (0) 收藏

      摘要:用哥伦比亚培养基培养了水稻细菌性谷枯病菌(NCPPB 2391,NCPPB 3591)、水稻细菌性条斑病菌(NCPPB 1585)、水稻细菌性褐斑病菌(NCPPB 2844),菌落采用乙醇/甲酸处理法处理后用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析其蛋白质指纹图谱。除水稻细菌性条斑病菌无匹配结果外,其它2种细菌均有正确的鉴定结果。用Bruker公司标准方法建立了水稻细菌性条斑病菌蛋白质指纹图谱库。采用水稻叶片作为空白样品添加了上述3种植物病菌,回收实验结果表明3种植物病菌均可以用本方法检测。该研究为应用MALDI-TOF-MS方法检测水稻细菌奠定了基础。

    • 乙酰木聚糖酯酶协同木聚糖酶降解木聚糖的研究

      2016, 35(4):375-380.

      摘要 (764) HTML (0) PDF 775.35 K (1169) 评论 (0) 收藏

      摘要:探讨了宇佐美曲霉(Aspergillus usamii) 乙酰木聚糖酯酶和第10、11家族木聚糖酶之间的协同作用。利用作者所在实验室构建保藏的3株工程酵母Pichia pastoris GS115/Auaxe、GS115/Auxyn11A和GS115/Auxyn10A进行甲醇诱导发酵,分别获得重组乙酰木聚糖酯酶和木聚糖酶。在木聚糖酶最适pH、40 ℃、料液质量体积比1 g∶60 mL、水解2 h的条件下分别研究了不同加酶量作用于小麦麸皮时生成的还原糖量。结果表明,乙酰木聚糖酯酶与第11家族木聚糖酶有更好的协同作用,并在添加量比(酶活力比)为5∶1时所测协同效果最好,还原糖生成量较木聚糖酶单独作用增加了46%。因此,在乙酰木聚糖酯酶的作用下,木聚糖上乙酰基的去除,对提高木聚糖酶对木聚糖的水解效率具有重要作用。

    • 重组大肠杆菌产耐高温Fe-SOD(H29A)的发酵条件优化

      2016, 35(4):381-386. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.008

      摘要 (402) HTML (0) PDF 952.09 K (1235) 评论 (0) 收藏

      摘要:超氧化物歧化酶在药物和化妆品等工业中具有重要的应用价值。为了提高超氧化物歧化酶的产量,作者运用E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-SOD重组表达系统,采用单因素实验和正交实验相结合的方法,研究了诱导表达条件和发酵培养基对重组大肠杆菌产超氧化物歧化酶的影响。实验结果表明,在培养基中添加1.20 g/L亮氨酸,30 g/L酵母粉且碳氮质量比为3,诱导剂浓度0.20 mmol/L,诱导温度37 ℃,诱导时间8 h的条件下,菌体生长量达到最高并且Fe-SOD(H29A) 的产量达到全菌体蛋白的49.37%,表达量是LB培养基发酵的1.45倍。

    • 包埋固定化酶降解牛奶αs1-酪蛋白过敏性研究

      2016, 35(4):387-392. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.009

      摘要 (491) HTML (0) PDF 1.87 M (867) 评论 (0) 收藏

      摘要:利用海藻酸钠固定化蛋白酶,探求其对牛奶过敏原αs1-酪蛋白的特异性降解。以固定化酶的活力回收率为指标,探究了固定化的条件、固定化酶的部分性质以及固定化酶在去除牛奶过敏原蛋白的应用。结果表明:最优固定化条件为,海藻酸钠质量分数为4.0%,CaCl2的质量分数为3.0%,固定化时间0.5 h,固定化酶量为V(海藻酸钠)∶V(酶液)为1∶3,固定化效率达到67.5%;固定后的酶最适反应温度70 ℃,最适反应pH 10.0,连续使用6次后剩余酶活达到40.0%以上;将固定化酶作用于2.0%脱脂奶粉溶液中,60 ℃条件下反应25 min过敏原αs1-酪蛋白得到特异性降解。

    • 流感病毒组成蛋白质序列的分析与预测

      2016, 35(4):393-398. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.010

      摘要 (535) HTML (0) PDF 994.70 K (1240) 评论 (0) 收藏

      摘要:在NCBI数据库中获得1902—2013年关于流感病毒10种组成蛋白的所有氨基酸序列,在MATLAB中采用大数据编程分析,结合详细的HP模型,并基于CGR-WALK模型的方法将全部流感病毒蛋白质序列转化为数据形式,引入时间序列ARFIMA(p,d,q)模型来拟合所有序列,分析10种组成蛋白的序列在近80年的变化趋势,并对其未来10年的发展趋势进行预测. 通过分析可以发现,其对流感病毒变异趋势的预测有很好的效果,这为基于大数据分析流感病毒蛋白质序列,预测流感病毒的爆发提供一定的的研究参考价值.

    • 贡湖浮游植物时空分布特征及其与环境因子的关系

      2016, 35(4):399-407. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.011

      摘要 (332) HTML (0) PDF 1.15 M (1703) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了弄清贡湖生态环境特征,基于 2013 年 3 月至 2014 年 2 月间贡湖 8 个采样点水环境状况的监测数据,运用数理统计分析手段,对浮游植物时空分布特征及其与环境因子的相关性进行了分析。贡湖总体上处于富营养化状态,而水源地附近水环境状况相对较好。蓝藻水华易发期水质透明度、悬浮物、叶绿素 a 、亚硝态氮、总氮时空分布差异显著(ANOVA ,p < 0.05)。浮游植物细胞密度的空间分布差异显著(ANOVA ,p < 0.05),浮游植物细胞密度的最高值出现在 2 号点,最低值出现在 5 号点。利用 Pearson 相关性分析法分析藻细胞密度与环境因子间的关系,表明藻细胞密度与总氮、总磷、高锰酸盐指数、悬浮物、叶绿素 a 呈极显著相关,与溶解氧呈极显著负相关。利用冗余度分析(redundancy analysis,RDA) 浮游植物种类组成与环境因子之间的关系,表明营养盐(总氮、总磷和氨氮)、高锰酸盐指数、水温、悬浮物、pH 是影响浮游植物组成的主要因素。贡湖水生态环境特征存在显著的空间特征异质性。浮游植物群落结构组成受到水环境特征和空间相邻性的双重影响。

    • 基于内参的志贺氏菌实时荧光定量PCR快速检测

      2016, 35(4):408-418. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.012

      摘要 (402) HTML (0) PDF 2.17 M (1839) 评论 (0) 收藏

      摘要:根据Genbank已公布的志贺氏菌基因组序列,筛选特异性靶基因ipaH,设计特异性引物和探针,优化反应体系,并在体系中加入内参(IAC),通过标记不同荧光基团的TaqMan探针来监测IAC,进而实时监控整个PCR反应过程。按照人工污染样品,以评价所建立反应体系的性能。以志贺氏菌基因组DNA为模板,最低检测限为1 pg/uL;以10倍梯度稀释的菌液用水煮法提取DNA为模板,最低检测限为9×103 CFU/mL;以含有ipaH的质粒为模板,最低检测限可以达到103 考贝/uL;建立ipaH和ipaH-IAC标准曲线,Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(R2=0.999);人工污染初始菌量为20 g中10 CFU的羊肉时,志贺氏菌在增菌6 h后即可检出(水洗加试剂盒法)。作者建立的ipaH-IAC实时荧光定量PCR方法,既能有效检测食品中志贺氏菌,又能实时监测PCR反应过程,有效防止"假阴性"的发生,进一步保证了结果的可靠性,有利于实现样品中志贺氏菌实时荧光定量PCR检测方法的标准化。

    • 金黄色葡萄球菌DPO-PCR快速检测方法的建立与应用

      2016, 35(4):419-423. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.013

      摘要 (447) HTML (0) PDF 856.67 K (839) 评论 (0) 收藏

      摘要:为建立检测金黄色葡萄球菌(SA)的PCR方法,以SA Sa442基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了SA的DPO-PCR 快速检测方法。结果显示,在45~65 ℃退火温度范围内均能高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感,该方法的灵敏度为2.27×102 cfu/mL,同时DPO 引物特异性强,与其他菌株无非特异性扩增反应。利用该方法和行标法分别对采集的175份样品进行检测,均共计检出13份SA阳性样品,两者符合率为100%。作者建立的DPO-PCR 方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性,为快速准确检测SA提供新的检测手段。

    • 液相色谱-串联质谱法测定葱属蔬菜中的噻虫嗪、多菌灵等5种农药的残留量

      2016, 35(4):424-428. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.014

      摘要 (378) HTML (0) PDF 843.74 K (1246) 评论 (0) 收藏

      摘要:建立了葱属蔬菜(洋葱、大葱和韭菜)中噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、多菌灵和虫酰肼5种药物残留量的液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)检测方法。样品用正己烷饱和的乙腈提取,用QuEChERS方法净化,在正离子模式(ESI+)下,经分时段多反应监测(MRM)模式测定目标化合物,外标法定量。结果表明:5种农药在10~200 μg/L的范围内线性关系较好(r2>0.99);在5、10、50 μg/kg 3个添加水平下,平均回收率在77.3%~104.1%之间;5种农药的定量限(LOQ)均满足国际限量要求。该方法灵敏度高、重现性好、定量准确,可用于葱属蔬菜中上述5种农药残留的日常检测。

    • 平欧榛子油对高血脂大鼠部分器官的修复效应

      2016, 35(4):429-437. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.015

      摘要 (338) HTML (0) PDF 1.51 M (1257) 评论 (0) 收藏

      摘要:建立SD大鼠高血脂症模型并作灌胃处理,通过测定模型肾脏、心脏、骨骼肌生理指标及其组织病理变化,确定平欧榛子油对高脂血症大鼠肾脏、心脏、骨骼肌的修复效应。肾脏指标测定结果显示,饲喂平欧榛子油低剂量、中剂量、高剂量高血脂大鼠超氧化物歧化酶(SOD)活性较高脂对照组差异显著,分别提高了2%、 6%、15%;丙二醛(MDA)含量与高脂对照组差异也显著,分别降低了14%、28%、32%;过氧化氢酶(CAT)活性与高脂对照组差异极显著,分别提高了22%、39%、57%;豆油组、低剂量组、中剂量组、高剂量组甘油三酯(TG)水平较高脂对照组分别降低了13%、13%、37%、34%。心脏指标测定结果显示,饲喂平欧榛子油低剂量组、中剂量组的高血脂大鼠SOD活性、MDA含量差异不显著,高剂量组SOD活性、MDA含量差异显著,SOD提高了12%,MDA降低了30%;豆油和低剂量组TG水平显著降低,分别降低了8%、7%,而中剂量组和高剂量组TG水平极显著降低33%、33%;豆油组、低剂量组、中剂量组、高剂量组谷丙转氨酶(GPT)含量较高血脂对照差异显著,分别提高了31%、34%、33%、21%。骨骼肌指标测定结果显示,饲喂榛子油的高血脂大鼠SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、MDA和TG含量均有显著变化,胆固醇(TC)含量差异不显著。连续饲喂平欧榛子油可以提高高血脂大鼠抗氧化能力,对高血脂大鼠肾脏、心脏、骨骼肌具有一定的修复作用。

    • 星点设计-效应面法优化柚皮素包合物的制备工艺

      2016, 35(4):438-442. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.016

      摘要 (768) HTML (0) PDF 1.72 M (1291) 评论 (0) 收藏

      摘要:研究星点设计-效应面法优化柚皮素-β-环糊精(NAR-β-CD)包合物的制备工艺。采用搅拌法制备NAR-β-CD包合物,以β-CD与NAR的投料质量比、包合时间、包合温度为自变量,以包封率、包合物得率为因变量,采用星点设计-效应面优化法,对结果进行多元线性回归和二项式拟合,经效应面法预测最佳工艺条件,并作验证试验。并比较NAR-β-CD包合物和NAR的累积溶出率。NAR-β-CD包合物的最佳工艺:β-CD与NAR投料质量比为5∶1,包合时间为1.412 h,包合温度为48.11 ℃。包合率和包合物得率预测值与理论值的偏差分别为1.43%、1.99%。NAR和NAR-β-CD包合物的累积溶出率分别为37.15%,为83.24%。

    • 红薯葛根复合糊的工艺优化研究

      2016, 35(4):443-447. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2016.04.017

      摘要 (786) HTML (0) PDF 721.84 K (797) 评论 (0) 收藏

      摘要:以红薯和葛根粉为主要原料制作红薯葛根复合糊产品,通过正交实验对相关工艺参数进行优化。结果表明,红薯块采用柠檬酸质量分数0.2%,植酸质量分数0.1%复合护色,护色处理2.5 h,可使BD值最低,护色效果显著;干燥条件的适宜工艺参数为三段式温度干燥10 h;复合糊配方为红薯超微粉加入量100 g,葛根粉加入量50 g,大豆粉加入量8 g,白糖粉加入量35 g,植脂末加入量8 g品质最佳。

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