摘要:农兽药、非法添加剂及其他有毒有害化学污染物在食品和环境中的残留引起人们越来越多的关注。这些残留物多为小分子化合物，对其进行免疫测定因受限于分子量和抗原表位数量，多用竞争法，通常不能像检测大分子抗原一样采用夹心式的非竞争法，这就制约了其检测的灵敏度、稳定性及工作范围等。但非竞争免疫分析法也并非完全不适用于小分子化合物，这需要方法学上的改进或创新。作者从检测方法原理、体系构成及应用现状等方面综述了近几十年来有关小分子化合物非竞争免疫分析方法的研究成果，以期为相关研究者提供借鉴和参考。

摘要:吡咯喹啉醌（Pyrroloquinoline quinone，PQQ）是一种新型辅酶，具有广阔的应用前景。传统PQQ检测方法在检测发酵液中PQQ浓度时都存在一定的缺陷，且检测效率偏低。本研究在大肠杆菌（Escherichia coli BL21（DE3））中表达E. coli K-12来源的葡萄糖脱氢酶（PQQGDH），并通过亲和层析分离纯化PQQGDH，得到了高浓度、高纯度的PQQGDH。通过酶液和PQQ样品用量的双因素正交实验对传统重组酶法的反应体系加以改进，得到适用于96孔板高通量检测的反应体系。结果表明30 ?滋L纯化后酶液、2 ?滋L PQQ样品配合1.2 mL的显色剂组成的显色体系检测效果最佳。该方法线性范围大且具有较高的精确度和重现性。本研究中利用高浓度、高纯度的PQQGDH配合96孔板和酶标仪，所建立的PQQ高通量检测方法，不仅降低了实验误差，而且大幅提高了PQQ发酵液样品的检测效率。

摘要:为了高效生产活性灵芝多糖，以葡萄糖液体发酵的基本碳源，同时添加两种灵芝多糖的主要单糖组分——半乳糖和甘露糖，研究混合碳源对灵芝生长、多糖合成及其抗肿瘤活性的影响。结果表明，以不同的混合碳源作为灵芝液态发酵的碳源，发现不同比例的单糖碳源对灵芝多糖产量和生物量影响较小。不同的灵芝多糖剂量对皮肤基底癌细胞A431和人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖均有抑制作用，碳源比例对灵芝多糖活性影响较大。葡萄糖和半乳糖以质量浓度比1∶1作碳源时抑制率可达到50%~60%；葡萄糖和半乳糖质量浓度比1∶2作碳源时抑制率可达到75%~85%；葡萄糖和甘露糖质量浓度比1∶1作碳源时抑制率可达到60%~65%；葡萄糖和甘露糖质量浓度比1∶2作碳源时抑制率可达到80%~85%；葡萄糖、半乳糖和甘露糖质量浓度比1∶1∶1作碳源时抑制率可达到80%~85%。初始培养基中半乳糖和甘露糖所占比例大有利于灵芝多糖抗肿瘤活性的发挥。

摘要:用量子点偶联微囊藻毒素抗体作为探针，经过间接竞争反应之后，通过方波溶出伏安法测定Cd2+的浓度，从而实现对水中微囊藻毒素含量的检测。分别对缓冲液pH、浓度、沉积电位、沉积时间等因素进行优化。实验结果表明：Cd2+在-0.768 V左右会出现一个灵敏的溶出峰，在最优实验条件下进行检测，峰电流值与微囊藻毒素浓度的对数值在一定范围内呈良好的线性关系，线性范围在0.1～8 μg/L之间，线性方程为y=-196.66x+242.15，相关系数R2=0.992 45，检出限为0.08 ?滋g/L，加标回收率为91.0%～108.6%，相对标准偏差为2.97%～6.98％。

摘要:为了解冰藏和微冻两种贮藏方式对重要经济鱼类鮰鱼品质的影响，开发适用的贮藏保鲜技术，分别对其理化、微生物、质构相关指标进行测定。结果表明：两种贮藏方式下鮰鱼肉中pH变化不显著，而TVB-N含量和微生物数量均呈逐渐上升趋势，且冰藏条件下增加速度更快。持水力、硬度、弹性均随贮藏时间的延长呈下降趋势，肌纤维间隙逐渐变大，且微冻过程中下降速度更快。综合分析，冰藏和微冻条件下鮰鱼的货架期分别是13 d和19 d，微冻比冰藏较好延缓鮰鱼生化品质劣变。

摘要:将γ-谷氨酰转肽酶（GGT）在Bacillus subtilis 168同源过量表达，发现该酶能够自动分泌到细胞外，且重组菌酶活比原始菌提高了3 568倍。通过SDS-PAGE分析发酵液上清液发现，该γ-谷氨酰转肽酶是由一个相对分子质量为42 000的大亚基和一个22 000的小亚基组成。通过酶学性质分析发现，该γ-谷氨酰转肽酶是一个耐碱性的酶，最适反应pH为10；同时该酶具有良好的耐热性，最适反应温度达到50 ℃；另外，加入5.0 mmol/L的Mg2+、Ca2+、K+、La3+、Li+和 NH4+对GGT转肽活力具有明显的促进作用，其中添加的NH4+对GGT活力促进作用最为显著，GGT活力提高45%以上，而Cu2+和Zn2+则对其具有抑制作用。

摘要:为了阐明缺失转录因子CgAsg1p对光滑球拟酵母鲁棒性的影响，通过同源重组的方法构建突变菌株Cgasg1?驻，比较基因缺失突变株在不同条件下的细胞生长、基因转录水平和对不同胁迫的抵御能力。结果表明：与野生型菌株wt相比，突变菌株Cgasg1?驻失去在pH 2.0下的生长能力，转录因子CgAsg1p在低pH条件下通过改变一系列应答基因的转录水平，影响压力调控、氧化还原过程、跨膜转运、DNA复制、重组和修复等生物过程，此外，突变菌株Cgasg1?驻也失去了对氧化胁迫和高渗胁迫的抵御能力。因此，CgAsg1p是光滑球拟酵母抵御多种胁迫的关键转录因子。

摘要:首次采用水酶法提取猪油并对其提取条件进行了研究，以提油率为评价指标，比较了4种蛋白酶（Alcalase 2.4 L，Neutrase 1.5 MG，Flavourzyme 1 000 L 和 Protamex）的作用效果。结果表明：碱性蛋白酶Alcalase 2.4L的作用效果最好。选取碱性蛋白酶为酶解用酶，确定酶法提取猪油的最佳酶解工艺为：酶解时间2.0 h，pH 8.0，料液质量体积比为1 g∶1 mL，酶解温度55 ℃，加酶量为底物质量分数的1.0%，该条件下提油率可达到96.82%。与传统方式得到的猪油产品比较，酶法提取的猪油基本理化指标均较优。

摘要:植物纤维组织致密结构阻碍天然生物活性成分绿原酸的溶出，为减少绿原酸溶出的传质阻力，选取复配酶（纤维素酶和木质素酶）催化水解金银花叶溶浸获得绿原酸，并采用DPPH自由基清除法、铁氰化钾还原法评价提取物绿原酸的体外抗氧化性。分析酶解金银花叶后的SEM照片发现，酶能有效破坏植物纤维组织结构，有助于形成内部疏松结构，而金属离子对酶催化水解活性作用依次为Mg2+＞Na+＞Ca2+＞K2+＞Cu2+；选取纤维素酶?鄄木质素酶酶活比为3∶2的复配酶，在水浴温度45 ℃、pH 4的条件下，当复配酶投加量为50 U/g时，在Mg2+诱导催化水解2 g金银花叶11 h后，绿原酸浸提率达94.68%，比超声醇提法提高了19.60%，所得绿原酸具备高抗氧化性和还原性，为资源化利用金银花叶以及绿原酸生产提供了新途径。

摘要:在单因素的基础上，以Plackett-Burman（PB）设计结合响应面（RSM）分析法，对产色素海洋细菌Planococcus rifietoensis发酵培养基的8个营养成分配比进行优化。结果表明：培养基最佳碳氮源分别是葡萄糖和蛋白胨，葡萄糖、MgSO4·7H2O和酵母粉添加量显著影响色素的产量。Box-Benhnken设计分析确定最优培养基配方为：葡萄糖9.78 g/L，蛋白胨 8.00 g/L，酵母粉2.05 g/L，MgSO4·7H2O 8.17 g/L，Na2HPO4 0.1 g/L，FeSO4·7H2O 0.005 g/L，NaCl 10 g/L，CaCl2 0.1 g/L，培养54 h，在此培养条件下，色素的OD值可达0.984，比优化前提高了245%。

摘要:γ-氨基丁酸（GABA）具有多种生理功能，被广泛应用于食品、医药等行业。在谷氨酸棒杆菌ATCC13032中表达来自短乳杆菌的两个谷氨酸脱羧酶（GAD）编码基因gadB1、gadB2，可将其自身积累的L-谷氨酸有效转变成GABA。为了进一步提高GABA产量，首先在ATCC13032中敲除了丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PknG的编码基因pknG，以提高GABA的前体物质L-谷氨酸的供应，然后将GAD表达质粒pJYW-4-gadB1-gadB2转入pknG敲除菌株和ATCC13032中，构建出重组菌SNW203和SNW200，最后对两个重组菌进行上罐发酵。结果表明：相对于SNW200，菌株SNW203的L-谷氨酸和GABA产量都有所提高。发酵72 h后，GABA产量为（30.2±0.3） g/L，相对于SNW200提高了55.4%，L-谷氨酸和GABA的总摩尔浓度为0.3 mol/L，提高了36.4%。这说明敲除pknG能够促进重组谷氨酸棒杆菌的L-谷氨酸和GABA生物合成。

摘要:通过青霉产果胶酶降低烟梗末中的果胶的含量，从而提高梗末作为原料薄片工艺中的使用性能。首先通过正交实验确定了酶解的最佳条件为加酶质量分数6%，料液比1 g∶3 mL，酶解温度50 ℃，酶解时间2 h，果胶酶的最大降解率为38.92%。然后经热重分析表明，梗末经果胶酶降解后，最后的残重从24.46%下降至9.84%，说明酶解后的梗末的燃烧性得到提升。最后，利用热裂解-气相色谱/质谱联用分析酶解前后梗末的热裂解产物，发现酶解后裂解产中的乙酸含量降低，香味物质吡咯含量升高，这将有助于改善烟草薄片的吸食口感，本研究中为提高造纸法烟草薄片的品质提供了一个新的方法。

摘要:以丝蛋白（SF）和海藻酸钠（SA）为基质构建新型负载纳米银生物敷料。以SF溶液为稳定剂，采用紫外光照射法合成了纳米银，加入SA后，经氯化钙/乙醇/水（摩尔比，1∶71∶77）处理3 h，将上述材料润洗冻干后得到负载纳米银的SF/SA复合海绵（AgNPs-SF/SA）。透射电子显微镜（TEM）观察显示，合成的纳米银平均粒径为（5.03±1.42） nm，在丝蛋白溶液中分布均匀。扫描电子显微镜（SEM）图像显示，与纯丝蛋白海绵相比，AgNPs-SF/SA显示连通的多孔结构。SA的加入增强了海绵的吸水性和保水性；在SF和SA的协同作用下，AgNPs-SF/SA的水蒸气透过率有所提高。以K-B扩散法和菌液培养法测定了AgNPs-SF/SA的抗菌性，结果显示，AgNPs-SF/SA对金黄色葡萄球菌和铜绿色假单胞菌的抗菌性优于阳性对照AQUACEL?誖Ag；24 h和48 h的菌液培养显示，AgNPs-SF/SA具有更持久的抗菌活性。综上所述，AgNPs-SF/SA的物理性能和抗菌性能优良，有望作为一种新型的抗菌生物敷料用于预防和治疗创面感染。

摘要:通过测定干贝在贮藏过程中一系列理化指标的变化，研究了4 ℃下贮藏时环境相对湿度对干贝品质的影响。考察的指标包括干贝的pH、色泽、挥发性盐基总氮（TVB-N）、过氧化值（POV）和硫代巴比妥酸值（TBARS）等。研究结果表明，在较低相对湿度（RH 23%和43%）下贮藏的干贝，TVB-N值、POV值和TBARS值未发生明显变化。而在较高相对湿度（RH 65%和84%）下贮藏的干贝，TVB-N值、POV值和TBARS值均显著增加，导致品质下降。干贝适宜在较低的环境相对湿度下贮藏。

摘要:通过解析国际食品法典委员会、欧盟，以及澳大利亚和新西兰、英国、加拿大、美国、韩国、中国香港和澳门地区的即食食品微生物限量标准，比较微生物指标设定特点和限量要求，为我国制定即食食品微生物限量标准提供技术依据。