梁盈 , 黄萍 , 李佳佳 , 王荣 , 马酉初 , 林亲录
2017, 36(8):785-791. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.001 CSTR:
摘要:肿瘤的诱导分化研究一直是肿瘤治疗研究领域行之有效的手段之一。自采用全反式维甲酸进行诱导分化,对急性早幼粒细胞白血病治疗取得了较好的疗效后,诱导分化就吸引了越来越多学者的注意。药用类植物不仅具有药用价值,还具有一定的食用价值和经济价值。目前越来越重视药用类植物的开发利用,药用植物来源的分化诱导剂因其副作用小、毒性低等优点被较广泛地应用于治疗肿瘤细胞研究中。本文综述了药用植物源活性成分在肿瘤细胞诱导分化治疗研究领域的现状及其相关作用机制。
余美娟 , 赵兴树 , 陈阳 , 赵明星 , 黄振兴 , 阮文权
2017, 36(8):792-799. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.002 CSTR:
摘要:以苹果渣和剩余污泥为消化底物,在温度为37 ℃,初始pH值为8.0的条件下进行批式厌氧消化产氢试验,比较单独消化和混合消化的产气性能.结果表明,苹果渣组和剩余污泥组单独厌氧消化时,H2产量分别是11.5 mL/gVS和8.6 mL/gVS,混合厌氧消化时,混合组的H2产量达到16.9 mL/gVS,比计算值提高了68.16%。剩余污泥组的pH值最高,苹果渣组中SCOD浓度最高,混合组的pH值和SCOD浓度均介于两个单独消化组之间,这是由于混合组能均衡两种有机底物的营养成分,提高系统的缓冲能力。这说明混合消化不单单是两种有机物的简单叠加,两者之间相互促进,存在一定的协同作用,混合消化能够提高产氢效率。另外在整个反应过程中,苹果渣组脱氢酶的活性很低,混合组高于苹果渣组,混合组脱氢酶活性最大为384 TFμg/(mL·h),且基本维持在340 TFμg/(mL·h)左右。
2017, 36(8):800-806. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.003 CSTR:
摘要:为了探究待售水产品中抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)在水产品批发市场中的扩散污染情况,选取上海市3个大型水产品批发市场作为研究对象,采用PCR的方法,对市场内部和市场附近的排污沟表层淤泥中5大类(4种磺胺类、 8种四环素类、6种β-内酰胺类、5种氯霉素类、4种链霉素类)共27种ARGs进行了检测,并利用PCR-DGGE技术分析了细菌种群多样性。结果显示共有17种ARGs在批发市场淤泥中被检出,其中磺胺类、四环素类和链霉素类ARGs的检出率较高且检出种类较多,表明水产品批发市场含有种类丰富的ARGs,水产品以磺胺类、四环素类和链霉素类ARGs污染为主。对市场外围的检测显示市场外围区域ARGs的种类分布略低于市场内部,表明水产品批发市场中ARGs的存在会通过污水排放途径扩散到周边环境。DGGE图谱的分析结果显示,3个批发市场污泥样品细菌种类差异性较大,表明环境中ARGs的种类分布与细菌的种类并无直接关联。本研究表明水产品携带的ARGs会扩散到水产品批发市场中,导致水产品批发市场成为ARGs的重要储存库,以此造成的污染会进一步传播到周边环境,此外,这些种类丰富的ARGs重新扩散到待售水产品中的风险很大,需引起人们足够的重视。
2017, 36(8):807-813. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.004 CSTR:
摘要:本实验中以苹果冰淇淋为研究对象,分别研究了不同种类和添加量的油脂、稳定剂、乳化剂对其品质的影响。选择卡拉胶、瓜尔豆胶、槐豆胶作为稳定剂,单甘酯、三聚甘油单硬脂酸酯作为乳化剂,通过正交试验确定了改善苹果冰淇淋抗融性品质的复合稳定乳化剂的最优配方为(质量分数):卡拉胶0.016%、瓜尔豆胶0.10%、槐豆胶0.20%、单甘酯0.15%、三聚甘油单硬脂酸酯0.05%。按照这个配方生产的苹果冰淇淋具有良好的抗融性,同时产品组织细腻、口感清爽。
2017, 36(8):814-818. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.005 CSTR:
摘要:本研究确认了大豆皂苷I与II及苷元B对黄曲霉毒素B1和苯并芘的抗突变作用。Ames试验中,除了最小剂量时大豆皂苷I与II未能显著抑制移码突变外,3个受试物均明显抑制黄曲霉毒素B1和苯并芘诱发的TA98和TA100回复突变。而且,除了最小剂量时大豆皂苷I与II未能显著抑制苯并芘与DNA的结合外,3个受试物均明显抑制人肝癌(HepG2)及支气管上皮(BEAS-2B)细胞中突变剂与DNA加合物的形成。大体上,苷元B比大豆皂苷I与II更有效地抑制移码与碱基置换突变和加合物的形成。因此,3个食源活性成分不仅抑制基因突变同时也拮抗突变剂诱导的DNA损害。
董运海 , 胡蝶 , 邬敏辰 , 唐诗涵 , 王春娟 , 李剑芳
2017, 36(8):819-825. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.006 CSTR:
摘要:基于糖苷水解酶5家族(GHF5)β-甘露聚糖酶一级、三维结构的比对和分析,对宇佐美曲霉GHF5 β-甘露聚糖酶AuMan5A的关键位点氨基酸实施定点突变以获得酶学性质优良的突变酶AuMan5AG320D。采用大引物PCR技术将AuMan5A基因(Auman5A) 中编码Gly320的密码子GGT突变为Asp320的GAC,构建出突变酶基因Auman5AG320D。分别将Auman5A和Auman5AG320D在毕赤酵母GS115中进行了表达,分析了表达产物AuMan5A和AuMan5AG320D的酶学性质。结果表明:AuMan5AG320D的最适温度Topt由突变前的65 ℃提升至70 ℃,在70 ℃的半衰期t1/270由原酶的10 min延长至25 min;AuMan5AG320D的比活性由突变前的351.2 U/mg提高到1 729.1 U/mg,其催化效率(kcat/Km) 是原酶的9.3倍。将Gly320突变为Asp320不仅改善了AuMan5A的温度特性,而且显著提高了该酶的比活性和催化效率。
2017, 36(8):826-833. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.007 CSTR:
摘要:为降低麦汁和啤酒中反-2-壬烯醛与老化前驱体壬烯醛潜力的含量,研究糖化过程中影响麦芽脂肪氧合酶(LOX)作用的关键因素(蛋白休止温度、醪液pH值、麦芽粉碎度、麦芽LOX活力),确定最佳工艺:蛋白休止温度为55~60 ℃、醪液pH为5.5、EBC粉碎机磨盘间距为0.5 mm、LOX活力越低越好。大生产验证试验显示:蛋白质休止温度为55 ℃、使用低LOX麦芽时,啤酒中反-2-壬烯醛、壬烯醛潜力降低幅度分别为6.7%~25.0%、9.2%~20.3%,啤酒新鲜度得分提高4.2%~16.1%。
朱明君 , 刘刚 , 梅雪然 , 胡婷婷 , 杜娟 , 张晓喻
2017, 36(8):834-842. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.008 CSTR:
摘要:通过人工接种冠突散囊菌固态发酵栘??茶,探究栘??茶发酵前后感官品质和化学成分的变化。栘??茶经冠突散囊菌发酵7 d,通过感官评价可知发酵后茶汤滋味醇厚回甘,颜色橙黄明亮,具有独特的“菌花香”,并通过电子舌进一步证明栘??茶发酵前后感官品质存在差异。采用全自动氨基酸分析仪对主要氨基酸进行分析,结果发酵后氨基酸总量下降,但是呈味氨基酸和人体必需氨基酸质量分数升高。采用高效液相色谱仪对发酵前后化学成分的组成与主要指标成分进行含量分析,结果HPLC指纹图谱比较显示其化学成分组成与含量均发生了明显的变化,其中主要化学成分根皮苷质量分数由251.87 mg/g下降为198.25 mg/g,根皮素作为根皮苷的降解产物,其质量分数由2.4943 mg/g升高到19.619 mg/g。因此,通过发酵栘??茶,可以改善其感官品质和化学成分,具有较大的开发与应用价值。
2017, 36(8):843-848. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.009 CSTR:
摘要:以滤纸片及刃天青法测定受试菌抑菌圈直径及MIC、MBC,为水蒸气蒸馏法提取所得茜草精油的抑菌活性提供依据;另外,通过受试菌在受到精油作用后生长曲线、电导率及表面超微结构的变化初步研究了精油的抑菌机理。抑菌圈、MIC和MBC结果表明:精油对G+(表面葡萄球菌)和G-(痢疾杆菌)效果较强;对G+(枯草芽孢杆菌)和G-(大肠杆菌)效果较弱。生长曲线、细胞膜通透性及细菌细胞超微结构的研究结果表明:抑菌机理可能源于茜草精油能有效地抑制细菌的对数生长期分裂速度,导致细胞膜渗透性的增加。
2017, 36(8):849-854. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.010 CSTR:
摘要:为探讨高压协同中温对鲜菠萝汁活性和致敏性的影响,将鲜榨菠萝汁经不同压力组合温度处理后,测定其蛋白质水解活性、纤溶活性和致敏性的变化。结果表明:高压条件下,温度对蛋白质水解活性的影响削弱并变得不显著。400 MPa组合温度有利于纤溶活性的增加,而500 MPa组合温度使纤溶活性降低。致敏性则随着压力和温度的增加下降,500 MPa和50 ℃时致敏性降至51.39%。因此,压力组合中温对蛋白质水解活性、纤溶活性和致敏性影响各不相同,选择合适的温度和压力可以同时实现鲜菠萝汁的保活和减敏。
2017, 36(8):855-861. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.011 CSTR:
摘要:为提高米曲霉(Aspergillus oryzae) 糖苷水解酶家族(GHF) 11木聚糖酶AoXyn11A的耐热性,将其N-端置换为来源于嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca) 的同一家族耐热木聚糖酶pXYL11的对应区域。基于木聚糖酶耐热性的理性设计,采用大引物PCR技术将AoXyn11A基因(Aoxyn11A) 的5′-端DNA片段置换为pXYL11人工合成基因(xyn11PM) 的对应片段,构建出杂合木聚糖酶ATX11A基因(ATx11A)。分别将Aoxyn11A和ATx11A在毕赤酵母GS115中进行了表达,并分析了重组表达产物AoXyn11A和ATX11A的温度特性。结果表明:ATX11A的最适温度Topt由AoXyn11A的50 ℃提升至65 ℃,在60 ℃的半衰期t1/260为55 min,较AoXyn11A延长了41.3倍;ATX11A在55 ℃处理3 h保留60%以上的酶活性,而AoXyn11A处理15 min酶活性完全丧失。本研究通过N-端置换显著改善了AoXyn11A的温度特性。
段荣娟 , 李永富 , 卜玲娟 , 王莉 , 王韧 , 陈正行
2017, 36(8):862-868. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.012 CSTR:
摘要:研究了瞬时高温流化对玉米游离酚含量、抗氧化活性的影响,优化出制备高抗氧化活性玉米的最佳工艺条件。结果表明影响玉米抗氧化活性的因素主次次序为:流化温度>流化处理时间>进料速度;最佳工艺条件为:流化温度160 ℃,流化处理时间60 s,进料速度21 kg/h,所制备的玉米游离酚含量为345.88 mg GAE/hg,较原料玉米增加了27%(P<0.05);抗氧化活性为 8 104.09 μmol TE/hg,是原料玉米的1.5倍(P<0.05)。瞬时高温流化制备的玉米游离阿魏酸(FA)、游离p-香豆酸(p-CA)较原料玉米显著增加(P<0.05),结合酚、结合FA和结合p-CA较原料玉米显著降低(P<0.05)。瞬时高温流化处理能够显著增加玉米的游离酚含量和抗氧化活性。
胡凯弟 , 赵爽 , 彭杨 , 周康 , 敖晓琳 , 何利 , 刘书亮
2017, 36(8):869-876. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.013 CSTR:
摘要:为提高液态发酵食醋品质,在其传统工艺基础上添加麸皮浸出液,以四川麸醋醋醅中筛选的优良巴氏醋酸菌为菌种,根据单因素实验确定影响醋酸发酵的显著因素,并通过Box-Behnken设计试验优化,其最优发酵条件为:麸曲添加质量分数1.11%、醋酸菌接种体积分数13.71%、醋酸发酵温度31.50 ℃,在此条件下产酸量为68.48 g/L。以四川某醋厂生产的液态发酵食醋为对照,对所得液态发酵麸醋进行感官评价、挥发性成分和游离氨基酸分析。液态发酵麸醋口感柔和、香味独特,检测出20种挥发性成分、17种游离氨基酸;游离氨基酸总量为805.29 mg/dL,各项指标均优于液态发酵食醋,品质明显提升。
2017, 36(8):877-883. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.014 CSTR:
摘要:构建鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)的原核表达菌株Rosetta(pET28a-MBSP),获得重组MBSP,以制备MBSP多克隆抗体。将鲫鱼MBSP全长基因(MBSP)借助表达载体pET-28a构建重组表达菌株Rosetta(pET28a-MBSP),并进行诱导表达后获得重组MBSP。利用Ni-NTA agarose亲和层析柱纯化重组蛋白并进行质谱鉴定。以纯化后的重组MBSP作为抗原免疫新西兰兔,获得MBSP多克隆抗体。分别采用ELISA和Western blot技术测定其效价和特异性。诱导表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析、 Western blot检测及质谱鉴定,结果表明该蛋白质为重组MBSP,其相对分子质量约为28×103,与天然MBSP大小一致,主要以包涵体形式存在。将其免疫兔子后,从血清中获得了与MBSP发生特异性反应的高效价多克隆抗体。本研究中成功表达和纯化了重组MBSP蛋白,制备了高效价的特异性MBSP多克隆抗体,为MBSP的相关研究奠定基础。
2017, 36(8):884-889. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.015 CSTR:
摘要:采用UPLC-MS/MS法检测游离氨基酸含量,色谱柱以键合相C18硅胶为基质,流动相为水-乙腈,梯度洗脱,流速0.8 mL/min;采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定还原糖含量,研究山茱萸炮制过程中参与美拉德反应的底物游离氨基酸和还原糖质量分数的变化规律。山茱萸中共检测出15种游离氨基酸。各游离氨基酸的质量分数随着炮制时间的延长逐渐降低;还原糖质量分数在炮制中趋势不同于氨基酸,在炮制0~24 h逐渐降低,24~36 h还原糖质量分数有所上升,36 h后其质量分数变化趋于稳定。山茱萸中游离氨基酸和还原糖质量分数的变化与炮制中的美拉德反应密切相关,美拉德反应达到平衡时间与传统的炮制时间基本一致,这为炮制终点的判定提供了科学依据。
闫晗 , 丁之恩 , 董敏 , 李菁楠 , 吴艳立 , 朱梦婷
2017, 36(8):890-895. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.08.016 CSTR:
摘要:研究柑橘皮中生物碱辛弗林对营养型肥胖大鼠的减肥功效。提取、分离柑橘皮中辛弗林,纯化。制备营养型肥胖大鼠模型,模型动物给药4周,观察大鼠体质量、体脂、血脂的变化。研究结果表明:与高脂组相比,辛弗林高、中剂量组能明显降低肥胖大鼠的体质量、Lee's指数、肾脏及睾丸周围脂肪重量(P<0.05),辛弗林高、中、低剂量组均能明显降低肥胖大鼠的肝脏、肾脏系数(P<0.05);辛弗林高剂量组肥胖大鼠的血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、 血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)含量均比高脂组显著降低(P<0.05);与高脂组比较,辛弗林高剂量组肥胖大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量明显上升(P<0.01)。表明柑橘皮中生物碱辛弗林对营养型肥胖大鼠有显著的减肥功效。
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