摘要:探究长期摄入酪氨酸氧化产物对大鼠空间学习记忆及其对海马组织的影响。采用4周龄清洁级SD大鼠40只，随机分为Control组（正常日粮）、Tyr组（添加0.44%酪氨酸）、TOP1组（添加0.22 %酪氨酸氧化产物）、TOP2组（添加0.44%酪氨酸氧化产物）。饲喂24周后，用Morris水迷宫检测大鼠空间学习与记忆能力，测定海马组织中蛋白质和脂质氧化产物的含量，用RT-PCR检测海马组织抗氧化和炎症相关基因的表达。结果显示，饲喂24周后，与Control组和Tyr组相比，TOP1组和TOP2组大鼠出现空间学习与记忆障碍；海马组织中MDA、4-HNE、Dityr、3-NT、Aβ40含量都显著升高（p<0.05）；Nrf2、NF-κB和iNOS的mRNA表达也显著上调（p<0.05）。因此，酪氨酸氧化产物导致大鼠海马组织氧化损伤，蛋白质和脂质氧化产物积累，造成大鼠空间学习记忆能力受损。

摘要:研究汽化过氧化氢对聚对苯二甲酸乙二醇酯（Polyethylene Terephthalate，PET）瓶坯内表面上枯草芽孢杆菌的杀菌效果。采用单因素试验结合Box-Behnken中心试验设计原理，对过氧化氢溶液流量、灭菌时间和灭菌温度3种灭菌工艺条件进行了响应面优化分析。汽化过氧化氢杀灭PET瓶内表面枯草芽孢杆菌的最佳工艺条件为：过氧化氢溶液流量14 mL/min，灭菌时间9 s，灭菌温度120℃，在此条件下汽化过氧化氢对枯草芽孢杆菌的杀菌对数值可达5.40 log。为汽化过氧化氢灭菌的工业化应用提供理论依据。

摘要:以聚丙烯腈膜（PAN）为载体，采用吸附法固定化海藻糖合成酶粗酶液。通过单因素法探讨最佳固定化条件，并分析固定化酶酶学性质。结果表明，最佳固定化条件为：pH 7.6、30 ℃、加酶量0.1 mg/cm2条件下震荡吸附3 h；该条件下制备的固定化酶最适反应条件为：温度40 ℃、pH 7.4、初始麦芽糖底物浓度200 g/L。与游离酶相比，固定化酶热稳定性提高10 ℃、酸碱稳定性由pH 6.6~7.4扩展至pH 5.4~8.0；反应达到平衡时，反应液中海藻糖含量为50.9%，副产物葡萄糖含量为9.1%，较游离酶降低6个百分点，在目前已报道的固定化海藻糖合成酶催化反应中副产物含量最低；在40 ℃、pH 7.4、麦芽糖底物浓度200 g/L条件下，重复使用累计72 h后，固定化酶活仍保留在初始酶活的64.4%。

摘要:为了实现异维生素C前体2-酮基-D-葡萄糖酸在沙雷氏菌Serratia sp. FMME043中的高效生产，在30 L发酵罐中对补料策略和发酵条件进行了优化，建立了补料分批发酵工艺。最终确定发酵策略为：溶氧控制在40%，在发酵16、22 h及28 h时分别补加64、80 g和96 g硫酸铵，并且当残糖浓度降至15~25 g/L时，分五次等量补加801 g葡萄糖，优化后，发酵44 h，2-KGA的产量和转化率分别达到268.5 g/L和 1.04 g/g，分别比优化前提高了58.4%和9.9%。本研究结果为目前报道的产量和转化率在国内外属领先水平，为2-酮基-D-葡萄糖酸及异维生素C工业化生产打下了坚实的基础。

摘要:系统分析了11家族木聚糖酶EvXyn11TS N端区域对其耐热性的影响。在GenBank数据库中借助BLAST服务器搜寻与EvXyn11TS序列同源性大于55%且温度特性已知的30种木聚糖酶；运用ClustalW2程序和MEGA 5.1软件对31种木聚糖酶进行了多序列比对及进化树构建，从中选择了包含EvXyn11TS在内的8种代表性耐热和中温酶；采用生物学程序软件分析了所选酶在N端的异同点。分析结果表明，EvXyn11TS N端的耐热有利氨基酸含量、β-折叠股A1和氨基酸相互作用等对其耐热性有一定的贡献。

摘要:本研究组合了基因密码子优化及分子伴侣共表达策略提高碱性果胶酶（PGL）在毕赤酵母中的胞外产量。基于Pichia pastoris密码子偏好性，优化了来源于Bacillus sp.WSHB04-02 PGL高热稳定性突变体K314M基因，并克隆至pPIC9K的EcoR I-Not I得到PGL表达载体pPIC9K-PGL。pPIC9K-PGL转化Pichia pastoris GS115（his-）得到重组菌GS115/PGL 14#，胞外PGL酶活达到301.32 U/mL，较优化前提高25.1%。在此基础上，分别及同时共表达分子伴侣内质网蛋白折叠氧化还原辅助因子（ERO1）和泛素共轭酶（UBC1）。结果显示，同时表达ERO1和UBC1（GS115/PGLl-ERO1-UBC1 2#）使重组菌胞外PGL较共表达前提高49.3%，达到450.12 U/mL。应用指数流加策略对重组菌株GS115/PGLl-ERO1-UBC1 2#进行3 L罐发酵，诱导发酵96 h胞外PGL可达1 362.31 U/mL。研究结果对促进PGL产量的提升及其应用具有重要现实意义。

摘要:为了解库尔勒香梨“黑头病”病变组织中真菌群落结构特征，应用PCR-DGGE技术对库尔勒地区4个不同保鲜库中12个样品真菌群落结构进行了研究。根据DGGE图谱对生物多样性进行了分析。结果表明，所有样品群落结构存在一定的差异，造成差异的原因可能与库尔勒香梨的种植环境有关；不同样品的9号条带在整个病变过程中优势度最高，其代表的菌株，可被认为是导致库尔勒香梨“黑头病”的主要致病菌；对DGGE的优势条带序列分析，同源性最高的微生物属于链格孢属（Alternaria）。该研究初步揭示了库尔勒香梨病变组织中微生物群落的变化规律，为库尔勒香梨“黑头病”的研究提供理论依据。

摘要:采用原子转移自由基聚合（ATRP）反应合成不同嵌段比例的嵌段聚合物聚甲基丙烯酸丙酮缩甘油酯-聚甲基丙烯酸缩水甘油酯（PSA-b-PGMA），并通过"click"反应在聚合物上进行D-甘露糖修饰，得到了甘露糖修饰的两亲性聚合物聚甲基丙烯酸丙酮缩甘油酯-聚甲基丙烯酸缩水甘油酯-甘露糖（PSA-b-PGMA-Mannose）。利用该两亲性聚合物在水中自组装形成胶束，并通过胶束的疏水空腔包裹抗癌药物阿霉素（DOX）。PSA-b-PGMA-Mannose的分子结构通过核磁共振氢谱和傅立叶变换红外光谱表征确认。所形成胶束的形貌和粒径通过透射电镜和动态光散射进行表征。载药胶束的细胞内吞摄取以及细胞毒性通过激光共聚焦显微镜和MTT细胞毒性方法进行评价。实验结果表明：不同嵌段比的两亲性聚合物所形成的胶束，随着聚合物中亲水性链段的比例增大，形成胶束的粒径逐渐减小。同时，甘露糖受体过度表达的人乳腺癌细胞MDA-MB-231能够特异性识别并大量摄取载药胶束，从而在癌细胞内释放药物DOX发挥药效。

摘要:丝素中含约10%酪氨酸残基，但其可及度较低，影响了丝素蛋白的反应性。借助利用天然生物交联剂京尼平，将含酪氨酸多肽与丝素蛋白交联，提升酪氨酸酶催化丝素与外源氨基化合物接枝改性的效果；借助SDS-PAGE、FTIR和TG分析丝素分子量、结构与性能的变化，并评价酶催化ε-聚赖氨酸（ε-PL）在丝素表面接枝效率。研究表明，经京尼平处理后丝素蛋白的分子量增加，含酪氨酸多肽与丝素交联后，不仅使丝素膜材料热稳定性提升，也一定程度上增加了丝素蛋白膜材料机械性能，借助甲基橙比色法验证了接枝多肽能促进酪氨酸酶催化ε-PL在丝素表面接枝。基于京尼平法接枝含酪氨酸多肽为提高丝素的反应性提供了有效途径。

摘要:Cider Beer是一种以苹果汁为原料，结合啤酒酿造工艺研制的发酵型特种啤酒。通过发酵实验，发酵度、乙醇体积分数等指标检测，本产品选取7号浓缩苹果汁作为原料；通过对比贫氮条件下不同酵母的生长情况和发酵实验结果，最终确定酵母C作为发酵菌株。以感官品质为考察指标，采用单因素正交实验法考察发酵温度、发酵时间和酵母接种量对感官品质的影响。结果表明：Cider Beer的较佳发酵工艺条件为：发酵温度11 ℃，发酵时间7 d，酵母接种量8×106个/mL，所得产品的总糖质量浓度为13.28 g/L，总酸质量浓度为6.5 g/L，乙醇体积分数为2.85%，游离氨基酸质量浓度为3.60 g/L，多酚质量浓度为1.04 g/L，色香味俱佳。

摘要:为了研究胞质还原路径对酿酒酵母积累L-苹果酸的影响，通过在酿酒酵母中过量表达源于黄曲霉的丙酮酸羧化酶（Afpyc）、苹果酸脱氢酶（Afmdh）及C4-二羧酸转运蛋白（Afmae），成功构建了L-苹果酸合成的胞质还原路径。结果表明：（1） 当低水平表达Afpyc时，其丙酮酸浓度降低了42%，但不能积累L-苹果酸；（2） 当共表达Afpyc和Afmdh时，菌株W005积累了1.93 g/L的L-苹果酸，与对照菌株W004相比细胞干重提高了350%，丙酮酸降低了65.9%；（3） 当共表达Afpyc、Afmdh和Afmae时，菌株W006的L-苹果酸产量提高了21.2%，达到2.34 g/L；4） 通过提高接种量至初始OD600=2，L-苹果酸的产量提高到3.28 g/L。通过在酿酒酵母中过量表达黄曲霉胞质还原路径的关键基因，使得工程菌能够积累L-苹果酸，为目标产物的高效积累提供了一种可借鉴的思路。

摘要:来源于黑曲霉（Aspergillus niger）的β-1，4-内切葡聚糖酶（AnCel5A）是糖苷水解酶第5家族成员，水解纤维素分子无定形区的β-1，4-糖苷键，在纤维素的降解过程中发挥关键作用。本研究通过对AnCel5A的结晶条件初筛，获得并优化AnCel5A晶体以期解析其蛋白质晶体结构。将截去N端信号肽的AnCel5A蛋白在Pichia pastoris X33/pPICZαA中进行表达，发酵液上清透析除盐并进行Endo H去糖基化酶切，后续依次通过离子交换层析、疏水层析，获得高纯度蛋白。通过坐滴气相扩散法对AnCel5A的结晶条件进行初筛，在CryoI screen kit （A6）孔中长出了初始晶体，经优化获得了更好的晶体。蛋白晶体于台湾新竹同步辐射中心（NSRRC）BL15A1线站进行了X射线衍射数据收集，结果显示其分辨率达到1.8 ?。

摘要:肉毒神经毒素（BoNT）是肉毒梭菌产生的神经毒素，是最强大的毒素之一。为了研究肉毒神经毒素A在酵母中的活性及功能，在酿酒酵母细胞中表达 BoNT/A LC，观察其对酵母生长影响以及通过蛋白免疫印迹方法研究其在酵母中蛋白表达水平。结果表明：BoNT/A抑制野生型酵母的生长；在酿酒酵母细胞中BoNT/A具有水解酶活性，当其活性位点突变后，BoNT/A突变体的表达不会抑制酿酒酵母的生长；过量表达酵母的SNAP25同源基因SEC9可以回补BoNT/A轻链过表达的酵母的生长。在BoNT/A轻链表达的酵母细胞中，其催化活性可以通过酵母的生长来检测。因此，这类特殊的酵母细胞可以用来分析BoNT/A。

摘要:从海洋源鱿鱼中筛选高产蛋白酶菌株。通过检测蛋白酶产生水解圈结合蛋白酶活性测定的方法筛选高产蛋白酶菌株，采用PCR技术对筛选菌株进行16S rRNA鉴定，并构建目的菌株的系统发育树，同时研究粗蛋白酶的酶学特性。结果表明：筛选得到的10株产蛋白酶活力较高的菌株，经鉴定分别属于芽孢杆菌属（Bacillus sp.）、普罗威登斯菌属（Providencia sp.）和假单胞菌属（Pseudomonas sp.）。其中SW5菌株产酶活性最高达257.67±2.44 U/mL，为甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）。该菌株所产粗蛋白酶的酶学特性研究发现，其最适pH为8.0，最适温度为40 ℃，终离子浓度为1 mmol/L时Mn2+、Ba2+和Ca2+对该蛋白酶活性有较高的激活作用，而Fe2+和Zn2+能明显抑制该蛋白酶活性。