摘要:研究证实，茶叶中儿茶素对预防癌症起到重要的作用，其中表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）具有比较强的抗氧化、抑制癌细胞增殖和诱导细胞的凋亡能力，是化学预防癌症最具潜力的天然产物之一。作者归纳了儿茶素的生物活性、EGCG与天然抗癌产物和临床药物的增效机制研究进展，为更加深入地开展EGCG癌症化学预防机制研究提供参考。

摘要:微生物谷氨酰胺转氨酶（mTGase） 作为一种性能优良的交联酶，用于提高蛋白质的加工性能。由于异肽键的生成，mTGase交联能够引起蛋白质消化率和免疫原性的变化；mTGase可能会作为乳糜泻患者的自身抗原，引发自身免疫疾病。为此，作者主要分析了mTGase交联对健康的影响和相应的检测手段，为mTGase的安全应用提供参考。

摘要:酵母β-葡聚糖是一种具有多种生物功能的细胞壁结构多糖，但天然的酵母β-葡聚糖水溶性较差，影响了其在医疗、保健食品和化妆品行业中的应用。作者通过β-1，3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1，6-葡聚糖水解酶BT3312水解酵母β-葡聚糖制备小分子酵母葡聚糖，提高其水溶性。以大肠杆菌为宿主，异源表达β--1，3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1，6-葡聚糖水解酶BT3312。在25 ℃条件下，添加0.2 mmol/L IPTG诱导后，Gly5m和BT3312的最高酶活分别为1 0β86 U/mL和2 355 U/mL。酵母β-葡聚糖经过Gly5m和BT3312水解后，溶解率分别提高了2.6倍和2.4倍。采用Gly5m和BT3312共同水解，酵母β-葡聚糖溶解率提高了3.2倍（水溶性酵母葡聚糖的质量浓度为12.5 g/L）。因此，Gly5m和BT3312在提高酵母葡聚糖的水溶性和制备小分子酵母葡聚糖领域具有重要的应用价值。

摘要:为实现生物法“一步”合成他汀类药物侧链中间体（3R，5S）-6-氯-2，4，6-三脱氧己内酯，采用生物偶联的方法分别构建不同抗性的两种重组质粒，即来源于Streptococcus suis的脱氧核糖醛缩酶基因与Lodderomyces elongisporus的醇脱氢酶基因的重组质粒，将两种重组质粒共转化于大肠杆菌 BL21同一细胞中，实现两种酶的可溶性共表达。以重组大肠杆菌为生物催化剂，全细胞催化两种底物：400 mmol/L乙醛与200 mmol/L氯乙醛发生反应，获得产物（3R，5S）-6-氯-2，4，6-三脱氧己内酯。在缺少标准产物对照的条件下，利用质谱（MS）以及氢谱（¹H-NMR）进行产物鉴定，最终确定合成的产物为他汀类药物侧链中间体（3R，5S）-6-氯-2，4，6-三脱氧己内酯。

摘要:辅酶Q₁₀（CoQ₁₀）是天然存在的抗氧化剂和细胞代谢激活剂，具有消除自由基、维持细胞膜通透性、提高机体免疫功能等多种生理作用。选育CoQ₁₀高产菌株并通过发酵法实现该功能化合物的高效合成具有重要价值。作者从污水处理厂的淤泥中分离纯化获得了一株CoQ₁₀高产菌株YLL-13，通过形态观察、生化特性分析及16S rDNA序列比对，鉴定为类球红细菌（Rhodobacter sphaeroides），命名为R. sphaeroides YLL-13。随后，以R. sphaeroides YLL-13为出发菌株，以维生素K3和4-羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid，pHBA）为复合筛选标记，通过亚硝基胍化学诱变，筛选高产突变菌株，并初步研究了其生产CoQ₁₀特性。结果显示，经诱变选育获取了一株遗传稳定的CoQ₁₀高产突变株R.sphaeroides YLL-13-T，其具有相对低类胡萝卜素合成、高生长速率和高CoQ₁₀积累特性。在所考察的发酵体系中，发酵120 h后突变菌株YLL-13-T的生物量、CoQ₁₀产量和CoQ₁₀产率达到83.5、1.04 g/L和12.46 mg/g，比出发菌株分别提高了12.3%、42.5%和23.6%，展现出良好的工业化应用前景。

摘要:笔者在前期研究中已从嗜热菌Dictyoglomus thermophilum 中克隆并异源表达了一种β-木糖苷酶Xln-DT，通过获得高酶活、酶学性质优异的β-木糖苷酶Xln-DT突变体，进而提高其在生物燃料、食品和医药等行业中的应用价值。基于提高比酶活的目的，通过生物信息学方法确定了β-木糖苷酶Xln-DT可突变的关键氨基酸位点，在161、202和231位点处分别引入HIS/LEU、PHE/LEU和TRP，获得Xln-DT比酶活明显提高的突变型酶Xln-DT-202PHE和Xln-DT-202LEU，并分析比较突变前后的酶学性质。突变型酶Xln-DT-202PHE和Xln-DT-202LEU的酶活较Xln-DT分别提高了3.28和2.97倍，比酶活分别提高了2.86和2.54倍。Xln-DT-202PHE和Xln-DT-202LEU的最适pH下降明显，由6.0分别下降至4.5和5.0。Xln-DT-202LEU在75 ℃下保温2 h酶活维持不变，较Xln-DT在75 ℃下的温度稳定性相比有明显提高。Xln-DT-202PHE和Xln-DT-202LEU在pH 4.0~7.0的范围内保温24 h，仍能保持80%以上的剩余酶活力。突变型酶不但显著提高了酶的活力，而且热稳定性得到了极大的改善，为其在食品热加工等领域中的应用奠定了基础。

摘要:PAPS是生物体内磺化反应的惟一活性磺酸基团供体。腺苷磷酰硫酸激酶是催化APS和ATP生成PAPS和ADP的一类酶。为实现PAPS的酶法合成，作者通过密码子优化来自结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis AUSMDU00018547）的腺苷磷酰硫酸激酶编码基因与共表达硫氧还蛋白TrxB，实现了腺苷磷酰硫酸激酶在大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）中的异源高活性表达。采用His-Tag标签实现了对腺苷磷酰硫酸激酶的纯化，进一步酶学性质分析结果表明，重组腺苷磷酰硫酸激酶最适温度、最适pH以及比酶活分别为35 ℃、7.5和（1.26±0.08） U/mg。腺苷磷酰硫酸激酶的异源活性表达与酶学性质分析为未来实现酶法合成PAPS奠定了基础。

摘要:为构建一株高效表达内切β-1，3-葡聚糖酶的毕赤酵母菌株，并用于水解热凝胶生产β-1，3-葡寡糖。作者首先对哈茨木霉来源内切β-1，3-葡聚糖酶基因进行随机突变，并构建BGN13.1a突变库；然后采用高通量技术及刚果红平板筛选高表达菌株；最后采用TLC薄层色谱和MALDI-TOF MS分析热凝胶水解产物，并分析了酶学性质。结果表明，本研究成功筛选得到毕赤酵母突变株K827，酶活较初始菌株提高了25 %；其水解产物聚合度为2~10，且寡糖产量为1.492 g/L；其最适pH与最适温度分别为5.5和50 ℃；相较亲本酶，突变株K827的pH稳定性与温度稳定性都有明显提高。本研究为内切β-1，3-葡聚糖酶的工业化生产及应用提供依据。

摘要:甘露糖基转移酶Alg11是N糖基化途径中的关键酶，催化第4和第5个甘露糖（Man）残基以α-1，2连键的形式转移到底物Man3- GlcNAc2-PP-Dol生成Man5-GlcNAc2-PP-Dol，人类ALG11基因致病突变会导致相关的先天性糖基化疾病ALG11-CDG （Congenital Disorders of Glycosylation）。目前，对ALG11-CDG的研究更侧重于其临床症状，而患者Alg11突变蛋白的性质还有待探索。作者以研究ALG11-CDG突变蛋白的重组表达及活性为目的，首先在人胚胎肾细胞HEK293和酿酒酵母中分别表达了Alg11野生型及突变体蛋白，发现其表达量存在显著差异，突变体蛋白不能稳定表达。最终在大肠杆菌中成功稳定表达了野生型及ALG11-CDG相关突变蛋白，利用液质联用定量分析了蛋白质的活性，结果显示，突变蛋白的活性存在不同程度的降低，其降低程度与ALG11-CDG疾病的严重程度存在一定的相关性。上述研究结果证明：1）ALG11-CDG相关突变蛋白的不稳定有可能是造成疾病的原因之一；2）体外定量测试大肠杆菌表达的ALG11-CDG相关突变蛋白的活性可以为相应患者的疾病严重程度提供参考。

摘要:科学家试图利用建立在高科技基础之上的“人造肉”生产来解决当今在全世界范围内日益迫近的肉类危机：一方面，未来肉类农产品的供应量存在巨大缺口；另一方面，目前肉类的安全性问题，如食源性疾病带来的危害等，已经引起人们的普遍担忧。作者通过对人造肉生产逻辑的分析，即通过对人造肉生产4个基本问题的回答，不仅对人造肉生产的产品类型、过程原理、技术瓶颈等进行了归纳与总结，还对人造肉生产的社会意义，如“数量或质量的优先判断”、“发展生产和风险防范的本质”、“标准的制定与话语权及相关利益之间的关系”等进行了分析与讨论，目的在于了解人造肉生产的实情，把握人造肉生产的逻辑，树立对人造肉生产的信心。

摘要:在N-糖基化途径中，双功能型的甘露糖转移酶Alg2蛋白催化两个甘露糖分别以α-1，3/1，6连键组装到多萜醇寡糖Man1GlcNAc2-PP-Dol上，形成Man3GlcNAc2-PP-Dol。作者探究人来源的Alg2蛋白（hAlg2）在酿酒酵母中的体内功能和在大肠杆菌中表达并纯化后的体外活性。构建酿酒酵母w303a-GAL1pr-ALG2，并利用该菌株的生长被葡萄糖抑制的特点，发现过表达hALG2基因能够回补其生长缺陷，证实了hALG2和ScALG2的功能同源性。作者利用大肠杆菌表达系统，成功表达并纯化了TrxA-hAlg2，并以Man1GlcNAc2-PP-Phy（PPGn2M1）代替hAlg2的天然底物，测定了其体外活性。结合液质联用的方法，检测发现TrxA-hAlg2具有催化PPGn2M1生成PPGn2M2和PPGn2M3的甘露糖基转移酶活性，为建立基于大肠杆菌表达纯化的hAlg2体外反应体系奠定了基础。

摘要:开发具有特色风味的干酪产品是提高我国消费者对干酪接受度的重要手段。以新鲜牛乳为原料，选取蔗糖添加量、干酪发酵剂添加量、凝乳酶添加量为因素，以干酪产率、感官评定为主要检测指标，通过单因素实验和正交实验对添加酿酒酵母的类Cheddar干酪的加工工艺进行优化，并以感官评定为主要检测指标，对最佳工艺进行验证。结果表明，添加酿酒酵母的类Cheddar干酪的最佳工艺条件为：蔗糖质量浓度50 g/L，干酪发酵剂质量浓度0.02 g/L，凝乳酶活力223.5 IMCU/L。在此优化条件下，成品新鲜干酪的感官评分为76.29，色泽明亮，组织状态结实，奶香味与酒香味浓郁且适宜。

摘要:为探求从鱼类废弃组织及漂洗水中回收Cystatin的高效方法，首先自制了溴化氢-木瓜蛋白酶-琼脂糖凝胶（CNBr-Papain-Speharose 4B） 亲和填料，确定了适宜的配基Papain偶联密度，之后测定了该亲和填料的热稳定性、酸碱稳定性、贮藏性能及使用的重复性，最后以该制备的填料对鱼糜漂洗水中的CPIs活性进行了初步回收。以对重组鲢鱼Cystatin吸附率为评价指标，确定适宜Papain偶联密度，即CNBr-Speharose 4B和Papain溶液最佳料液比为1∶7（g∶mL）。CNBr-Papain-Speharose 4B的适宜使用温度为4~40 ℃，且在pH 3.0~12.0之间稳定。CNBr-Papain-Speharose 4B在4 ℃下，6个月的贮藏期内，表现较好的稳定性。将填料装柱后进行验证实验，证明该填料的使用重复性能稳定，且最终成功高效地回收了鲢鱼鱼糜漂洗水中的CPIs。

摘要:为了解发酵时间对安岳坛子肉风味及坛内细菌菌群结构的影响，采集坛内发酵 20、40、60、75、90、105、120、135 d 的坛子肉和萝卜丝作为样品，利用 Illumina MiSeq 测序平台以及电子鼻、电子舌对样品的细菌菌群结构、风味进行检测分析。结果发现，16 组样品获得有效序列数平均为 38 247 条，发酵 60 d 时，坛内细菌菌群结构的多样性最高；发酵 75 d 时，坛内菌群多样性开始下降，且在随后的发酵时间内呈波动下降趋势；乳酸杆菌在坛内占有绝对优势，坛子肉发酵 90 d 后若再继续发酵，其细菌菌群组成会发生较大变化。电子鼻及电子舌检测发现，在气味上， 135 d 坛子肉、 75 d 坛子肉与其他坛子肉的差异较大（P＜0.01）；在滋味上，60 d 坛子肉与其他坛子肉差异较大（P＜0.01）。