蛇毒类凝血酶基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化
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Q78

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辽宁省科技基金项目(No.99305001)资助课题.


Fusion Expression and Purification of Gloshedobin, a Thrombin-Like Enzyme from Gloydius Shedaoensis in E. coli
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    将大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin)基因克隆到载体pET32-a(+)上,在T7lac启动子下以N端融合硫氧还蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,诱导条件为:30℃诱导6 h,IPTG浓度为1 mmol/L.利用固定化金属离子(Ni2+)亲和层析分别对胞内可溶物和变性条件下的包涵体进行纯化.通过SDS-PAGE检测融合蛋白的纯度,采用点杂交和纤维蛋白凝结活性检测分析,显示纯化产物具有较高生物活性.

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引用本文

李民,杨青,包永明,雷旭宇,许建强,安利佳.蛇毒类凝血酶基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化[J].食品与生物技术学报,2003,22(2).

LI Min, YANG Qing, BAO Yong-ming, LEI Xu-yu, XU Jian-qiang, AN li-jia. Fusion Expression and Purification of Gloshedobin, a Thrombin-Like Enzyme from Gloydius Shedaoensis in E. coli[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2003,22(2).

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