荧光素酶编码基因luc在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化
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Q939.97

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国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划),江苏省自然科学基金,教育部长江学者和创新团队发展计划


Cloning, Expression and Purification of Firefly Luciferase in E.coli
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    以荧光虫荧光素酶报告载体pXP2 DNA为模板,扩增得到编码萤火虫荧光素酶(LUC)的基因(luc),构建了诱导型表达载体pQE30-luc.将载体导入 E.coli M15获得高效诱导表达萤火虫荧光素酶基因的重组菌M15/pQE30-luc.SDS-PAGE电泳分析显示:重组蛋白的相对分子质量为 60 000 ,表达量占全菌胞内可溶性蛋白质的50.9 %. 利用表达载体pQE30上的His*Tag标记选用Ni柱纯化表达具有活性的萤火虫荧光素酶(LUC),纯化后比酶活达到1.43×10 9 RFU/ mg,纯化倍数达10.6倍,回收率为25.3%.

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引用本文

夏蕾,饶志明,沈微,方慧英,诸葛健.荧光素酶编码基因luc在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化[J].食品与生物技术学报,2008,27(5).

XIA Lei, RAO Zhi-ming, SHEN Wei, FANG Hui-ying, ZHUGE Jian. Cloning, Expression and Purification of Firefly Luciferase in E. coli[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2008,27(5).

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