产甘油假丝酵母甘油合成关键酶基因CgGPD1多拷贝表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达
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Q939.97

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国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划),江苏省自然科学基金


Construction of Multicopies Vectors of Key Enzymes Gene GPD1 in Glycerol Synthesis of Candida glycerolgenesis and Its Expression in Escherichia coli
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    采用PCR的方法从产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes) 中扩增出3-磷酸甘油脱氢酶的编码基因及侧翼序列 CgGPD1,分别构建了含不同 CgGPD1 拷贝数的根癌农杆菌双元载体pCAM3300-zeocin-CgGPD1(Ⅰ)、pCAM3300-zeocin-CgGPD1-CgGPD1(Ⅱ)和pCAM3300-zeocin-CgGPD1 -CgGPD1-CgGPD1(Ⅲ).在大肠杆菌JM109中,研究了其在不同质量浓度NaCl、葡萄糖胁迫下表达情况.结果表明,在大肠杆菌中GPDH的活性随着NaCl、葡萄糖质量浓度的升高而增加.当NaCl质量浓度达到2.5 g/dL时,GPDH的酶活比在0.5 g/dL NaCl下平均提高31.2%; 当葡萄糖质量浓度提高至10 g/dL时,GPDH的酶活比2 g/dL葡萄糖下平均提高31.8%;在相同的NaCl、葡萄糖质量浓度下,GPDH的活性随着 CgGPD1 拷贝数的增加而升高,JM109(Ⅱ)比JM109(Ⅰ)的GPDH酶活平均提高8.2%,JM109(Ⅲ)比JM109(Ⅱ)的GPDH酶活平均提高9.9%.以上结果表明,在大肠杆菌中 CgGPD1 基因的表达同样受渗透压胁迫调节.

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引用本文

王震,饶志明,诸葛斌,沈微,方慧英,诸葛健.产甘油假丝酵母甘油合成关键酶基因CgGPD1多拷贝表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达[J].食品与生物技术学报,2008,27(5).

WANG Zhen, RAO Zhi-ming, ZHUGE Bin, SHEN Wei, FANG Hui-ying, ZHUGE Jian. Construction of Multicopies Vectors of Key Enzymes Gene GPD1 in Glycerol Synthesis of Candida glycerolgenesis and Its Expression in Escherichia coli[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2008,27(5).

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