三聚氰胺单克隆抗体的制备及鉴定

doi:10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.027

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三聚氰胺单克隆抗体的制备及鉴定
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                        10.3969/j.issn.1673-1689.2011.01.027
                    
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Production and Identification of Monoclonal Antibodies to Melamine

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为建立三聚氰胺免疫分析方法,采用戊二醛法合成免疫抗原MEL-BSA和包被抗原MEL-OVA,全抗原经紫外吸收法检测证实偶联成功且偶联比约为16∶1。用MEL-BSA免疫BALB/c小鼠,用常规单克隆制备技术筛选获得1株稳定分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的细胞株6E3。腹水经纯化后,研究了抗体效价、竞争抑制能力及与结构类似物的交叉反应率,其中抗体效价为1∶64 000,检测线性范围为0.1~3.2 mg/L,IC50为1.01 mg/L,与三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺及三聚氰酸二酰胺的交叉反应率均小于0.1%,该方法有望用于三聚氰胺免疫检测试剂的研制开发。

Abstract:

In order to establish the immunoassay method of melamine(MEL),two artificial antigens(MEL-BSA,MEL-OVA) were prepared by glutaraldehyde crosslinking method,which were identified by UV absorbency spectrum.MEL-BSA was used as immuneogen to produce a cell strain(6E3) secreting monoclonal antibody against melamine from BALB/c.After purification,its titers of ascetic fluids were 64000 by indirect ELISA.The lineal range and half-inhibitory concentration(IC50) of the monoclonal antibody were from 0.1 to 3.2 mg/L and 1.01 mg/L.The percentages of cross-activity to cyanuric acid,Ammelid and Ammeline were all less than 0.1%.Results indicated that the monoclonal antibody against melamine would be useful in the development of melamine residue ELISA test kit or colloid gold-immunochromatography assay strip.

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引用本文

李康,桑丽雅,卜令杰,陈育旺.三聚氰胺单克隆抗体的制备及鉴定[J].食品与生物技术学报,2011,30(1):156-160.

LI Kang, SANG Li-ya, BO Ling-jie, CHEN Yu-wang. Production and Identification of Monoclonal Antibodies to Melamine[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2011,30(1):156-160.

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