三聚氰胺脱氨酶基因克隆表达及活性测定
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国家863计划项目(2007AA10Z427)


Cloning,Expression and Characterization of Recombinant Melamine Deaminase in E.coli
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    从载体pUC57-MDA中获得经过大肠杆菌密码子偏好性优化的三聚氰胺脱氨酶编码基因,将该基因连接至表达载体6HisT-pRSET中,构建了重组表达质粒6HisT-pRSET-MDA,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),得到重组工程菌BL-MDA并进行诱导表达,利用SDS-PAGE对表达产物进行分析并测定酶活性。SDS-PAGE电泳分析结果显示,表达上清液在53 000处有明显的蛋白质条带,与理论相对分子质量的吻合,其脱氨酶活性达5.61 U。

    Abstract:

    The melamine deaminase gene MDA with optimized codon usage was obtained from vector pUC57-MDA,and subcloned into the expression vector 6HisT-pRSET generating recombinant expression vector 6HisT-pRSET-MDA.The recombinant strain BL-MDA was generated after 6HisT-pRSET-MDA was transformed into E.coli BL21(DE3).Expression of BL-MDA was analyzed by SDS-PAGE and the activity of recombinant enzyme was determined by indophenol blue spectrophotometric method.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

涂追,许杨,季艳伟,陶勇.三聚氰胺脱氨酶基因克隆表达及活性测定[J].食品与生物技术学报,2011,30(2):234-238.

TU Zhui, XU Yang, JI Yan-wei, TAO Yong. Cloning, Expression and Characterization of Recombinant Melamine Deaminase in E. coli[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2011,30(2):234-238.

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