Clostridium cellulolyticum D-塔格糖3-差向异构酶基因的克隆、表达及酶活性
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中央高校基本科研业务费专项资金项目(JUSRP31002);江苏省社会发展科技支撑项目(BE2010626)


Cloning,Expression and Characterization of Clostridium cellulolyticum D-Tagatose 3-Epimerase
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    D-塔格糖3-差向异构酶是生物法生产新型功能性因子D-阿洛酮糖最为有效的酶。作者克隆到一种新型的D-塔格糖3-差向异构酶基因,来源于微生物Clostridium cellulolyticumH10。以pET-22b(+)为载体质粒,E.coliBL21(DE3)为宿主细胞,构建了基因重组菌,IPTG可诱导目的蛋白质的过量表达;经亲和层析纯化的重组蛋白质样品进行SDS-PAGE分析,在约31 000处出现显著的特征蛋白质条带;活性检测结果表明:该重组酶具有较高的转化活性。

    Abstract:

    D-tagatose 3-epimerase(DTE) is the most effective enzyme for the biological production of D-psicose,a novel functional factor.In this study,a novel gene encoding DTE from Clostridium cellulolyticum H10 was cloned.pET-22b(+) was for the plasmid,E.coli BL21(DE3) acted as host cells,then the recombinant strains were constructed.The target protein was over-expressed by IPTG induction;the recombinant DTE purified to electrophoretical homogeneity with affinity chromatography was analyzed by SDS-PAGE,showing approximately 31 000 characteristic protein.The result of activity detection revealed that the recombined enzyme had a higher transforming activity.

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    引证文献
引用本文

储菲菲,邢庆超,沐万孟,张涛,缪铭,江波,周榴明. Clostridium cellulolyticum D-塔格糖3-差向异构酶基因的克隆、表达及酶活性[J].食品与生物技术学报,2011,30(2):283-286.

CHU Fei-fei, XING Qing-chao, MU Wan-meng, ZHANG Tao, MIAO Ming, JIANG Bo, ZHOU Liu-ming. Cloning, Expression and Characterization of Clostridium cellulolyticum D-Tagatose 3-Epimerase[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2011,30(2):283-286.

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