金黄色葡萄球菌DPO-PCR快速检测方法的建立与应用
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R37

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A DPO- PCR Method for the Rapid Detection of Staphylococcus aureus
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    摘要:

    为建立检测金黄色葡萄球菌(SA)的PCR方法,以SA Sa442基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了SA的DPO-PCR 快速检测方法。结果显示,在45~65 ℃退火温度范围内均能高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感,该方法的灵敏度为2.27×102 cfu/mL,同时DPO 引物特异性强,与其他菌株无非特异性扩增反应。利用该方法和行标法分别对采集的175份样品进行检测,均共计检出13份SA阳性样品,两者符合率为100%。作者建立的DPO-PCR 方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性,为快速准确检测SA提供新的检测手段。

    Abstract:

    A dual-priming oligonucleotide (DPO)-based PCR was developed for the rapid detection of Staphylococcus aureus (SA) using Sa442 of SA as a target gene. DPO primers were able to efficiently amplify the target gene in a temperature range from 45 ℃ to 65 ℃,indicating that the DPO-PCR method was not sensitive to the annealing temperature. The DPO-PCR sensitivity was 2.27×102 cfu/mL. Because of a high specificity of DPO-PCR due to the special structures of DPO primers,no non-specific amplifications were produced in reaction. In addition,13 positive samples for SA were detected from 175 clinical samples by the DPO-PCR method,which was in accordance with the result by the SN/T 1870-2007 standard detection protocol. Therefore,the DPO-PCR could be used as a sensitive,rapid and simple tool.

    参考文献
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    引证文献
引用本文

李丹丹,徐义刚,邱索平,王昱,高会江,高慎阳.金黄色葡萄球菌DPO-PCR快速检测方法的建立与应用[J].食品与生物技术学报,2016,35(4):419-423.

LI Dandan, XU Yigang, QIU Suoping, WANG Yu, GAO Huijiang, GAO Shenyang. A DPO- PCR Method for the Rapid Detection of Staphylococcus aureus[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2016,35(4):419-423.

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