谷氨酸棒杆菌中谷氨酰胺合成酶的克隆表达及固定化

doi:10.3969/j.issn.1673-1689.2016.08.015

首页 > 过刊浏览>2016年第35卷第8期 >883-889. DOI:10.3969/j.issn.1673-1689.2016.08.015

谷氨酸棒杆菌中谷氨酰胺合成酶的克隆表达及固定化
DOI:
                        10.3969/j.issn.1673-1689.2016.08.015
                    
作者:
                        
                        
                    
作者单位:
作者简介:
通讯作者:
中图分类号:Q78
基金项目:

Cloning，Expression and Immobilization of Glutamine Synthetase from Corynebacterium glutamicum

Author:

Affiliation:

Fund Project:

摘要

图/表

访问统计

参考文献

相似文献

引证文献

资源附件

文章评论

摘要:

对谷氨酸棒杆菌（C. glutamicum）来源的谷氨酰胺合成酶进行腺苷酰化位点定点突变，并在大肠杆菌中进行异源表达，得到的重组酶活为6.215 U/mg。分离纯化重组突变酶后，对其固定化条件及固定化酶的性质进行研究。结果得到固定化条件为：以LX?鄄1000EP树脂作为固定载体，载体量 0.176 g/U、pH 值8.0、温度 30 ℃、吸附时间 16 h。固定化酶活力达到 3.658 U/g，酶活回收率达到 67.17%。重组酶固定化后，反应最适温度没有变化，最适pH略向碱性偏移，储藏稳定性提高，转化谷氨酸生产谷氨酰胺的水平与游离酶相当，对50 mmol/L谷氨酸的转化率为92.83%，为酶法生产谷氨酰胺后续研究提供了参考。

Abstract:

The glutamine synthetase encoded gene of Corynebacterium glutamicum was cloned and mutated on polyadenylation sites，followed by heterogeneous expression in E. coli with high enzyme activity of 6.215 U/mg. The recombinant mutant enzyme（GS'） was purified，and LX1000-EP resin was employed as the immobilization carrier. The results showed that the optimal conditions for immobilization were in the following：0.176 g carriers/1 U enzyme，pH 8.0，25 ℃ and 16 h. Under the above conditions the highest bioactivity （3.658 U/g） of immobilized GS' was achieved with high active recovery rate of 67.17%. Compared with free enzyme，the immobilized GS has the same optimal temperature and stability，however the optimal pH was slightly increased. The immobilized GS has the same conversion rate of 92.83% when 50 mmol/L glutamate was added in the bioconversion system. This work is useful for further large-scale bioproduction of glutamine.

参考文献

相似文献

引证文献

引用本文

曹慧萍,郑璞,唐云平,徐志南.谷氨酸棒杆菌中谷氨酰胺合成酶的克隆表达及固定化[J].食品与生物技术学报,2016,35(8):883-889.

CAO Huiping, ZHENG Pu, TANG Yunping, XU Zhinan. Cloning，Expression and Immobilization of Glutamine Synthetase from Corynebacterium glutamicum[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2016,35(8):883-889.

复制

文章指标

点击次数:
下载次数:
HTML阅读次数:
引用次数:

历史

收稿日期:
最后修改日期:
录用日期:
在线发布日期: 2016-11-01
出版日期:

地址：江苏省无锡市蠡湖大道1800号邮政编码：214122

电话：0510-85913526 电子邮件：xbbjb@jiangnan.edu.cn

技术支持：北京勤云科技发展有限公司

引用本文

分享

文章指标

历史

微信公众号二维码

手机版网站二维码