重组大肠杆菌生产海藻糖合酶发酵工艺优化

doi:10.3979//j.issn.1673-1689.2016.09.003

首页 > 过刊浏览>2016年第35卷第9期 >913-919. DOI:10.3979//j.issn.1673-1689.2016.09.003

重组大肠杆菌生产海藻糖合酶发酵工艺优化
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                        10.3979//j.issn.1673-1689.2016.09.003
                    
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Optimization of Trehalose Synthase Fermentation Conditions from Recombinant Escherichia coli

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为了实现来源于嗜热栖热菌的海藻糖合酶的高效表达，对E.coli BL21（DE3）/pET24a（+）-TreS基因工程菌在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化，获得的最优发酵条件为：诱导温度32 ℃，当OD600达到50时以0.2 g/（L·h）的速率补加乳糖进行诱导产酶，在该条件下发酵35 h时酶活达到472 U/mL，是优化前的2.3倍；进而采用该条件在30 L发酵罐进行了初步放大研究，酶活达到356 U/mL。由于该海藻糖合酶热稳定性好，因此尝试了高温处理破碎E.coli细胞以释放海藻糖合酶，结果表明，80 ℃处理30 min，海藻糖合酶的得率可达72.3％，具有工业化应用前景。

Abstract:

In order to achieve efficient production of the trehalose synthase from Thermus thermophilus，the optimization of fermentation conditions was investigated in E.coli BL21（DE3） harboring the plasmid pET24a（+）-TreS. The optimized fermentation conditions were as follows：the inducing temperature is 32 ℃，the adding rate of lactose is 0.2 g/（L·h） When OD600 reached 50. Under the condition，the enzyme activity reached 472 U/mL at cultivation of 35 h，was 2.3 times than before. In addition，the fermentation was performed in 30 L bioreactor under the condition of preceding narrative，the enzyme activity reached 356 U/mL. Because the thermal stability of trehalose synthase is good， E.coli cell was broken up through high temperature. The results showed that treated it 30 min under 80 ℃ the yield of trehalose synthase reached 72.3％. It have industrial application prospect.

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张悦,宿玲恰,吴敬.重组大肠杆菌生产海藻糖合酶发酵工艺优化[J].食品与生物技术学报,2016,35(9):913-919.

ZHANG Yue, SU Lingqia, WU Jing. Optimization of Trehalose Synthase Fermentation Conditions from Recombinant Escherichia coli[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2016,35(9):913-919.

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