基于酶联免疫反应的玉米细菌性枯萎病菌快速检测方法
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Rapid Detecion of Pantoea stewartii subsp. Stewartii Using Enzyme-Linked Immunoassay
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    摘要:

    通过菌体免疫小鼠获得高灵敏的高特异性单克隆抗体,并以此为基础建立一种快速、灵敏的单克隆抗体双抗体夹心法检测玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartill subsp.Stewartii)。通过小鼠脾脏融合实验获得3株单克隆抗体(12B4、10B1、11C2),并通过双抗体夹心法筛选配对细胞株,建立双抗体夹心法。最低检测限(LOD)为1.5×104 cfu/mL,线性范围在4.57×105~1.11×108 cfu/mL。该方法对玉米细菌性枯萎病菌具有很好的特异性,对玉米种子添加回收实验回收率为85.6%~90.2%,相对标准偏差低于5.0%。

    Abstract:

    A sensitive and rapid monoclonal antibody-based sandwich enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was established to detect Pantoea stewartill subsp.Stewartii(Pss). Three murine hybridomas(12B4/10B1/11C2) were obtained from the spleen cells fused produce. A pair of monoclonal antibodies(mAb) was selected for the sandwich ELISA method. The mAb 10B1 was conjugated with horseradish peroxidase(HRP) as the detection antibody and the mAb 11C2 was used as the capture antibody. The limit of detection of this method was 1.5×104 cfu/mL,and the linear range from 4.57×105 to 1.11×108 cfu/mL.

    参考文献
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    引证文献
引用本文

孔德昭,彭娟,刘丽强,唐丽娟.基于酶联免疫反应的玉米细菌性枯萎病菌快速检测方法[J].食品与生物技术学报,2016,35(9):958-962.

KONG Dezhao, PENG Juan, LIU Liqiang, TANG Lijuan. Rapid Detecion of Pantoea stewartii subsp. Stewartii Using Enzyme-Linked Immunoassay[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2016,35(9):958-962.

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