产D-海因酶微生物的筛选及其催化特性

doi:10.3969/j.issn.1673-1689.2016.12.010

首页 > 过刊浏览>2016年第35卷第12期 >1292-1299. DOI:10.3969/j.issn.1673-1689.2016.12.010

产D-海因酶微生物的筛选及其催化特性
DOI:
                        10.3969/j.issn.1673-1689.2016.12.010
                    
作者:
                        
                        
                    
作者单位:
作者简介:
通讯作者:
中图分类号:Q93
基金项目:

Screening of D-Hydantoinase-Producing Microorganism and Its Catalytic Properties

Author:

Affiliation:

Fund Project:

摘要

图/表

访问统计

参考文献

相似文献

引证文献

资源附件

文章评论

摘要:

为获得高活性和立体选择性海因酶生产菌株，首先采用氨基酸关环法合成了数种5'-单取代海因衍生物及N-氨甲酰-氨基酸，建立了相关液相色谱检测方法。然后以实验室保藏的野生菌株出发，利用底物诱导的方法筛选到6株具有D-海因酶活性的野生菌，其中荧光假单胞菌产生的D-海因酶具有较好的底物谱，较高的活性和立体选择性。经优化后，其最适产酶温度为30 ℃，培养时间为12 h，发酵活力达到92.1 U/L。该菌催化D-海因水解的最适反应温度为60 ℃，pH 8.5。在50 mL体系中，利用0.25 g菌体（干重）可对映选择性水解20 mmol/L对羟基苯海因底物，反应3 h转化率达到98%。

Abstract:

Hydantoinases are important enzymes with industrial potential in producing D-amino acids. In this study，6 strains with hydantoinase activity were selected from 23 wildtype microbial strains using 5'-monosubstituted hydantoin derivatives as induce substrates. Four 5'-monosubstituted hydantoins were chemically synthesized and verified with 1H-NMR. From 6 hydantoinase-producing strains，strain Pseudomonas fluorescenswas successfully identified with the highest enantioselectivity，desired substrate specificity and high activity in the hydrolysis of 5'-monosubstituted hydantoins andwas selected for further study. After induction with hydantoin substrates at 30 ℃ for 12 h，the D-hydantoinase activity could reach 92.1 U/L. The reaction condition was optimized to be 60 ℃ and pH 8.5，which was in favor of the spontaneous racemization of substrate. In a 50 mL whole-cell biocatalytic system，20 mmol/L D，L-p-hydroxyphenyl hydantoin was enantioselectively hydrolyzed by 0.25 g dry cells with a conversion ratioof 98% within 3 hours.

参考文献

相似文献

引证文献

引用本文

李磊,许国超,韩瑞枝,倪晔.产D-海因酶微生物的筛选及其催化特性[J].食品与生物技术学报,2016,35(12):1292-1299.

LI Lei, XU Guochao, HAN Ruizhi, NI Ye. Screening of D-Hydantoinase-Producing Microorganism and Its Catalytic Properties[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2016,35(12):1292-1299.

复制

文章指标

点击次数:
下载次数:
HTML阅读次数:
引用次数:

历史

收稿日期:
最后修改日期:
录用日期:
在线发布日期: 2017-02-10
出版日期:

地址：江苏省无锡市蠡湖大道1800号邮政编码：214122

电话：0510-85913526 电子邮件：xbbjb@jiangnan.edu.cn

技术支持：北京勤云科技发展有限公司

引用本文

分享

文章指标

历史

微信公众号二维码

手机版网站二维码