谷氨酰胺酶基因的克隆、表达和酶学性质研究

doi:10.3969/j.issn.1673-1689.2019.10.009

首页 > 过刊浏览>2019年第38卷第10期 >60-66. DOI:10.3969/j.issn.1673-1689.2019.10.009

谷氨酰胺酶基因的克隆、表达和酶学性质研究
DOI:
                        10.3969/j.issn.1673-1689.2019.10.009
                    
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中图分类号:Q815
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Cloning，Expression and Characterization of Bacillus Subtilis Glutaminase

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以枯草芽孢杆菌基因组为模板通过PCR扩增获得谷氨酰胺酶基因ylaM，构建重组质粒pMA5-ylaM，将其转化到枯草芽孢杆菌168中获得重组菌BS168/pMA5-ylaM，并在宿主菌成功得到表达，纯化后的谷氨酰胺酶比酶活大小为939.48 U/mg。谷氨酰胺酶的反应最适pH为7.5，反应最适温度为55 ℃，La³⁺、Zn²⁺、Fe³⁺和Al³⁺对谷氨酰胺酶活力具有一定的抑制作用，在NaCl浓度为15%~17.5%的条件下，该酶酶活力可以保留50%以上。在5 L罐中，通过分批补料发酵，其最高酶活力产量为215.06 U/mL。

Abstract:

The glutaminase gene（ylaM）was amplified from Bacillus subtilis by PCR.Construction of pMA5-ylaM and expressed in 168.The specific activity of purified glutaminase was 939.48 U/mg. The optimization activity of recombinant enzyme was at pH 7.5 and 55 ℃. La³⁺、Zn²⁺、Fe³⁺ and A^l3+ inhibited the glutaminase activity. More than 50% of the maximum activity was retained in the presence of 15%~17.5% NaCl.The highest production of glutaminase of fed-batch fermentation was 215.06 U/mL in the 5 L fermentation.

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引用本文

张美丹,饶志明,张显,杨套伟,徐美娟.谷氨酰胺酶基因的克隆、表达和酶学性质研究[J].食品与生物技术学报,2019,38(10):60-66.

ZHANG Meidan, RAO Zhiming, ZHANG Xian, YANG Taowei, XU Meijuan. Cloning，Expression and Characterization of Bacillus Subtilis Glutaminase[J]. Journal of Food Science and Biotechnology,2019,38(10):60-66.

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